本文關(guān)鍵詞：基于納米金復(fù)合物一次性探測(cè)頭的電化學(xué)生物傳感器構(gòu)建及對(duì)IFN-γ的檢測(cè)

  更多相關(guān)文章： 生物傳感器 納米金復(fù)合物 一次性探測(cè)頭 干擾素-γ檢測(cè) 靈敏度

【摘要】：肺結(jié)核是目前世界上最主要的感染性致死疾病,生物樣本中表達(dá)的干擾素-γ(IFN-γ)被作為感染肺結(jié)核的重要指標(biāo)。目前臨床生物樣本IFN-γ的檢測(cè)大多采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),盡管其靈敏度高、穩(wěn)定性好,但存在價(jià)格昂貴、耗時(shí)、步驟繁瑣、需要大量樣本等缺點(diǎn)�，F(xiàn)在普遍采用的基于玻碳電極負(fù)載納米金的電化學(xué)生物傳感器雖然靈敏度和穩(wěn)定性很高、操作簡(jiǎn)單,但成本高等缺陷限制其推廣應(yīng)用。本學(xué)位論文針對(duì)目前IFN-γ檢測(cè)的技術(shù)缺陷,先通過納米金等修飾氧化銦錫(ITO)導(dǎo)電玻璃得到納米金復(fù)合物,再負(fù)載抗體、抗原等工藝制備一次性探測(cè)頭,然后固定在鉑電極夾上得到工作電極,并以此構(gòu)建了兩類低成本、可快速和高效檢測(cè)IFN-γ的電化學(xué)生物傳感器,研究了結(jié)構(gòu)和性能。其主要研究?jī)?nèi)容如下:1、采用檸檬酸鈉還原法制備出球形、分布均勻、平均粒徑為25 nm的納米金微粒;聚二甲基二烯丙基氯化銨(PDDA)修飾的ITO表面有一層均勻覆蓋的鱗片狀薄膜,靜電吸附納米金(AuNPs)后的AuNPs/PDDA/ITO復(fù)合物表面有均勻分布的球形粒子;石墨稀-殼聚糖(Gr-Chit)修飾的自制絲網(wǎng)印刷ITO電極表面形成一層有明顯褶皺的均勻薄膜,靜電吸附谷胱甘肽包被的納米金(GSH-AuNPs)后的GSH-AuNPs/Gr-Chit/ITO復(fù)合物表面均勻分散著大量的球形粒子。2、先依次通過在AuNPs/PDDA/ITO復(fù)合物上負(fù)載抗體、BSA封閉、依靠特異性反應(yīng)鍵接IFN-γ、修飾納米金偶聯(lián)辣根過氧化物酶標(biāo)記IFN-γ抗體復(fù)合物(HRP-Ab2-AuNPs),制備了一次性探測(cè)頭,然后組裝工作電極和構(gòu)建生物傳感器,并研究其結(jié)構(gòu)和性能。研究結(jié)果表明:制備的一次性探測(cè)頭HRP-Ab2-AuNPs/IFN-γ/BSA/Ab1/AuNPs/PDDA/ITO呈現(xiàn)蜂窩狀的結(jié)構(gòu)。在最優(yōu)條件下,制備的傳感器表現(xiàn)出較高的靈敏度以及較寬的線性范圍(0.1-10000 pg/mL),檢測(cè)限為0.048 pg/mL(S/N=3)。且具有優(yōu)良的選擇性、穩(wěn)定性和重復(fù)性,用該法檢測(cè)臨床血清樣本得出的結(jié)果和參比結(jié)果一致。3、先通過在GSH-AuNPs/Gr-Chit/ITO復(fù)合物上負(fù)載抗體、BSA封閉、依靠特異性反應(yīng)鍵接IFN-γ,制備了一次性探測(cè)頭,然后組裝工作電極和構(gòu)建生物傳感器,并研究其結(jié)構(gòu)性能。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn):制備的一次性探測(cè)頭IFN-γ/BSA/Ab1/GSH-AuNPs/Gr-Chit/ITO呈蜂窩狀結(jié)構(gòu);在最優(yōu)條件下,相對(duì)增加的示差脈沖伏安(DPV)峰電流值與IFN-γ濃度(5-4000pg/mL)的對(duì)數(shù)值成線性關(guān)系,最低檢測(cè)限為0.5 pg/mL(S/N=3)。制備出的IFN-γ生物傳感器顯示了優(yōu)越的重復(fù)性、選擇性、穩(wěn)定性。此外,在真實(shí)血清樣本的檢測(cè)過程中,和ELISA的結(jié)果一致。
【關(guān)鍵詞】：生物傳感器 納米金復(fù)合物 一次性探測(cè)頭 干擾素-γ檢測(cè) 靈敏度
【學(xué)位授予單位】：暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：O657.1;TP212
【目錄】：

• 摘要3-5
• Abstract5-8
• 第一章 緒論8-15
• 1.1 結(jié)核病概述8
• 1.2 結(jié)核病現(xiàn)階段的診斷方法及其局限性8-10
• 1.3 電化學(xué)生物傳感器10-11
• 1.4 納米材料在電化學(xué)傳感器中的應(yīng)用11-13
• 1.5 選題意義、主要研究?jī)?nèi)容及創(chuàng)新點(diǎn)13-15
• 第二章 基于AuNPs/PDDA/ITO一次性探測(cè)頭的電化學(xué)生物傳感器構(gòu)建及對(duì)IFN-γ的檢測(cè)15-29
• 2.1 引言15
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分15-19
• 2.3 結(jié)果與討論19-27
• 2.4 小結(jié)27-29
• 第三章 基于GSH-AuNPs/Gr-Chit/ITO一次性探測(cè)頭的生物傳感器構(gòu)建及對(duì)IFN-γ的檢測(cè)29-42
• 3.1 引言29
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分29-32
• 3.3 結(jié)果與討論32-41
• 3.4 小結(jié)41-42
• 第四章 結(jié)論與展望42-44
• 4.1 結(jié)論42
• 4.2 展望42-44
• 參考文獻(xiàn)44-54
• 碩士期間學(xué)術(shù)成果54-55
• 致謝55

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