目的Tau蛋白是一類微管相關(guān)蛋白,可促進(jìn)微管蛋白聚合,參與神經(jīng)細(xì)胞骨架的構(gòu)成。Tau蛋白有六種異構(gòu)體,它們結(jié)構(gòu)上的差異主要在于氨基末端區(qū)域(N末端)與羧基末端區(qū)域(C末端)的不同。僅含N末端的tau蛋白就能引起認(rèn)知功能的減退。認(rèn)知功能障礙是癡呆的典型臨床表現(xiàn),癡呆癥作為一種進(jìn)行綜合征嚴(yán)重影響著患者的生活能力。Tau蛋白亞型中最長(zhǎng)的異構(gòu)體tau-441蛋白含有兩個(gè)N末端片段,tau-441蛋白水平與認(rèn)知功能障礙密切相關(guān),其有望評(píng)估認(rèn)知障礙,從而成為癡呆早期診斷的生物標(biāo)志物。Tau-441蛋白可存在腦脊液與血液中。相比于腦脊液,血樣取材更為方便、低創(chuàng)。但由于血腦屏障,tau-441蛋白在血液中含量少,目前常用的酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)尚無法滿足檢測(cè)要求。電化學(xué)生物傳感器在提高靈敏度方面極具優(yōu)勢(shì),且通過納米材料的應(yīng)用,能進(jìn)一步提高檢測(cè)的靈敏度。本研究旨在構(gòu)建出基于碳納米材料與金納米粒子的多重信號(hào)放大的電化學(xué)生物傳感器對(duì)tau-441蛋白進(jìn)行靈敏測(cè)定,并將構(gòu)建的分析方法應(yīng)用于正常人、輕度認(rèn)知障礙患者、癡呆患者的實(shí)際血清樣本中,為癡呆的早期診斷提供一種新的思路。方法本研究通過將合成的多壁碳納米管-還原氧...

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第1章 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器耗材
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.2 儀器耗材
    1.2 方法
        1.2.1 原理
        1.2.2 MWCNTs-rGO-CS復(fù)合物的合成
        1.2.3 Tau-441-AuNPs共軛體的合成
        1.2.4 納米材料的電鏡表征
        1.2.5 金電極的修飾
        1.2.6 特異性抗體的固定
        1.2.7 電化學(xué)分析測(cè)量
        1.2.8 實(shí)際血清樣本的處理
        1.2.9 方法學(xué)驗(yàn)證
        1.2.10 溶液的配制
第2章 結(jié)果
    2.1 納米材料的電鏡表征
        2.1.1 AuNPs的電鏡表征
        2.1.2 MWCNTs、rGO、MWCNTs-rGO的電鏡表征
    2.2 電化學(xué)測(cè)量評(píng)估信號(hào)的放大和抗體的固定
    2.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        2.3.1 MWCNTs-rGO-CS復(fù)合物體積的優(yōu)化
        2.3.2 Tau-441 蛋白與AuNPs體積比的優(yōu)化
        2.3.3 Tau-441-AuNPs共軛體與特異性抗體孵育時(shí)間的優(yōu)化
    2.4 方法學(xué)驗(yàn)證
        2.4.1 DPV測(cè)定圖及標(biāo)準(zhǔn)曲線
        2.4.2 方法檢出限
        2.4.3 電化學(xué)生物傳感器的特異性
        2.4.4 電化學(xué)生物傳感器的準(zhǔn)確度與精密度
        2.4.5 電化學(xué)生物傳感器的穩(wěn)定性
        2.4.6 電化學(xué)生物傳感器的重現(xiàn)性
    2.5 人體血清樣本的檢測(cè)
第3章 討論
    3.1 納米材料的電鏡表征
        3.1.1 AuNPs的電鏡表征
        3.1.2 MWCNTs、rGO、MWCNTs-rGO的電鏡表征
    3.2 電化學(xué)測(cè)量評(píng)估信號(hào)的放大和抗體的固定
    3.3 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        3.3.1 MWCNTs-rGO-CS復(fù)合物體積的優(yōu)化
        3.3.2 Tau-441 蛋白與AuNPs體積比的優(yōu)化
        3.3.3 Tau-441-AuNPs共軛體與特異性抗體孵育時(shí)間的優(yōu)化
    3.4 方法學(xué)驗(yàn)證
        3.4.1 DPV測(cè)定圖及標(biāo)準(zhǔn)曲線
        3.4.2 方法檢出限
        3.4.3 電化學(xué)生物傳感器的特異性、準(zhǔn)確度、精密度、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性
    3.5 人體血清樣本的檢測(cè)
第4章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝
附錄1 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄2 攻讀碩士學(xué)位期間參加的科研項(xiàng)目



本文編號(hào)：3901601