在本課題中,我們構(gòu)建了一個(gè)簡單的基于GR-5 DNAzyme和催化發(fā)卡自組裝（CHA）無蛋白酶信號遞增型電化學(xué)生物傳感器,用于超靈敏檢測鉛離子。在鉛離子的存在下,GR-5 DNAzyme可以特異性與鉛離子反應(yīng),切割底鏈為兩條游離的DNA片段,其中的一條DNA片段可以打開固定在金電極上的發(fā)卡捕獲探針,觸發(fā)CHA反應(yīng)。通過CHA反應(yīng),大量標(biāo)記著兩個(gè)亞甲藍(lán)分子的發(fā)卡信號探針被捕獲到金電極上,促進(jìn)電子轉(zhuǎn)移,從而產(chǎn)生一個(gè)大的亞甲藍(lán)電流。通過這個(gè)方法檢測鉛離子,檢測范圍為4×10^-11–3×10^-6 M,檢測限低至2.7×10^-11 M（S/N=3）。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,構(gòu)建的生物傳感器對鉛離子具有高度特異性并具有良好的分析性能。該生物傳感器還采用加標(biāo)法檢測血清中添加的鉛離子,其檢測結(jié)果具有良好的回收率。該傳感器的優(yōu)越性能有望應(yīng)用于輔助臨床診斷鉛中毒。 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：41 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

基于GR–5DNAzyme和催化發(fā)夾自組裝無蛋白酶信號遞增型電化學(xué)傳感器超靈敏檢測鉛離子原理示意圖

曲線的半圓增大，電荷轉(zhuǎn)移阻力增加，這是由于 DNA 帶負(fù)電荷的磷酸鹽骨架阻礙了電荷的轉(zhuǎn)移[59]，說明 Hc 已經(jīng)通過 Au-S 鍵組裝到了金電極的表面。當(dāng) MCH 組裝到電極表面后(曲線 c)，Ret 進(jìn)一步增加，這是由于 MCH 的生物分子特性，阻礙了電荷在金電極表面轉(zhuǎn)移，這說明 MCH 成功的結(jié)合到了金電極表面，并起到了封閉電極的作用。隨后，在無鉛離子的條件下加入鉛離子特異性DNAzyme 和信號發(fā)卡 DNA 的混合物，Ret 只是輕微增大（曲線 d）；而在鉛離子特異性 DNAzyme 與鉛離子反應(yīng)后，加入信號發(fā)卡 DNA 反應(yīng)，Ret 則大大增加（曲線 e）。這說明在沒有鉛離子的條件下，CHA 反應(yīng)不能進(jìn)行，只有極少量的 Hc-Hs復(fù)合物形成；而在鉛離子存在的情況下，CHA 反應(yīng)可以進(jìn)行，大量的 Hc-Hs 復(fù)合物形成。這也證明了本試驗(yàn)對鉛離子的具有高度識別作用。CV 檢測結(jié)果（圖 2B）與 EIS 檢測結(jié)果一致，氧化還原峰隨每一步的修飾過程發(fā)生相應(yīng)變化。EIS 和 CV圖證明了傳感器的每一步修飾過程均按照圖 1 進(jìn)行。

（.A）每一步的修飾后的電極在20mMTris-HCl、140mMNaCl和5mMMgCl2溶液(pH


本文編號：3538337