赭曲霉毒素A（OTA）是由曲霉屬和青霉屬等真菌產(chǎn)生的一種次級(jí)代謝產(chǎn)物,廣泛存在于各類食品及飼料中。研究表明,OTA不僅具有強(qiáng)烈的肝臟和腎臟毒性,還具有致癌、致畸、致突變和免疫抑制作用,嚴(yán)重危害著人類和動(dòng)物的生命安全和身體健康。目前,我國OTA檢測(cè)主要以高效液相色譜法和高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法為主。雖然這兩種方法具有良好的靈敏性和選擇性,但是這兩種檢測(cè)方法的操作流程較復(fù)雜,且需要昂貴的儀器和專業(yè)的技術(shù)人員,在一定程度上限制了它們?cè)谌粘z測(cè)中的應(yīng)用。因此,開發(fā)靈敏、快速、便捷的新型檢測(cè)技術(shù)用于OTA現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)分析對(duì)于保障食品安全和人類健康具有十分重要的重要意義。本文利用核酸適配體作為識(shí)別分子,結(jié)合酶催化信號(hào)放大策略,構(gòu)建了新型適配體傳感器用于OTA的可視化檢測(cè)分析。具體的研究?jī)?nèi)容如下:（1）基于納米酶級(jí)聯(lián)催化信號(hào)放大策略的適配體傳感器用于OTA的可視化檢測(cè)在本工作中開發(fā)了一種基于納米酶級(jí)聯(lián)催化信號(hào)放大策略的適配體傳感器用于OTA的可視化檢測(cè)。為了實(shí)現(xiàn)對(duì)OTA的檢測(cè),設(shè)計(jì)了一個(gè)由磁珠（MBs）、OTA適配體、與適配體部分互補(bǔ)的寡核苷酸（cDNA）以及堿性磷酸酶（ALP）組成的復(fù)合探針MBs-DN... 

【文章來源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

（A）基于適配體構(gòu)象變化調(diào)控GQD的聚集/解聚策略的熒光適配體傳感器用于OTA的

西南大學(xué)碩士學(xué)位論文12解離，通過磁分離，PP-DNA1-GO將存在于上清液中，向上清液中滴加NaOH溶液時(shí)，GO上修飾的PP在堿性環(huán)境中成粉紅色，使上清液的顏色發(fā)生明顯變化，根據(jù)顏色變化的深淺可以有效判斷OTA的含量。由于該方法僅采用普通的顯色分子作為指示劑，可以方便地用于OTA檢測(cè)，其在花生樣品中檢測(cè)限低至10ng/mL（10.0μg/kg），線性范圍10-250ng/mL。圖1.3（A）基于AuNPs二聚體的解聚策略的比色適配體傳感器用于OTA的檢測(cè)(Xiaoetal.2015)。（B）基于脂質(zhì)體信號(hào)放大策略的比色適配體傳感器用于OTA的高靈敏度檢測(cè)(Linetal.2018a)。（C）基于納米酶Au@Fe3O4的比色適配體傳感器用于OTA的檢測(cè)(Wangetal.2016a)。（D）基于HCR信號(hào)放大策略的免標(biāo)記比色適配體傳感器用于OTA的檢測(cè)(Wangetal.2015)。Fig1.3(A)DisassemblyofgoldnanoparticledimersforcolorimetricdetectionofochratoxinA(Xiaoetal.2015).(B)HighlysensitivecolorimetricaptasensorforochratoxinAdetectionbasedonenzyme-encapsulatedliposome(Linetal.2018a).(C)ColorimetricaptasensorforochratoxinAdetectionusingAu@Fe3O4nanoparticlesassignalindicatorandmagneticseparator(Wangetal.2016a).(D)Label-freecolorimetricaptasensorforsensitivedetectionofochratoxinAutilizinghybridizationchainreaction(Wangetal.2015).1.3.3化學(xué)發(fā)光適配體傳感器化學(xué)發(fā)光（CL）是物質(zhì)在進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)過程中伴隨的一種光輻射現(xiàn)象(Joetal.2016)。CL測(cè)定技術(shù)具有極高的靈敏度，且具有操作簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品安全、醫(yī)療診斷等領(lǐng)域。

第1章緒論13圖1.4（A）基于SPCM的高通量低背景化學(xué)發(fā)光適配體傳感器用于OTA的檢測(cè)(Shenetal.2017)。（B）基于CRET的適配體傳感器用于咖啡中OTA的檢測(cè)(Joetal.2016)。Fig1.4(A)High-throughputlow-backgroundG-quadruplexchemiluminescenceaptasensorbasedonsinglephotoniccrystalmicrospherefordetectionofochratoxinA(Shenetal.2017).(B)Chemiluminescenceresonanceenergytransfer-basedaptasensorfordetectionofochratoxinAincoffee(Joetal.2016).過氧化物酶可以催化H2O2氧化魯米諾產(chǎn)生化學(xué)發(fā)光。Li等(Shenetal.2017)利用單分散二氧化硅光子晶體微球（SPCM），結(jié)合DNA過氧化物酶構(gòu)建了一個(gè)背景信號(hào)低的化學(xué)發(fā)光分析方法用于OTA的高通量、高靈敏檢測(cè)（圖1.4A）。在此方法中，將包含血紅素適配體和OTA適配體序列的DNA1固定在SPCM的表面上，加入DNA2，由于DNA2與DNA1部分堿基互補(bǔ)配對(duì)，從而將血紅素適配體和OTA適配體進(jìn)行封閉。無OTA時(shí)，DNA過氧化物酶無法形成，表現(xiàn)為無化學(xué)發(fā)光信號(hào)

【參考文獻(xiàn)】：
碩士論文
[1]適配體生物傳感技術(shù)用于檢測(cè)赭曲霉毒素A的研究[D]. 趙陽陽.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2018
[2]基于新型納米材料信號(hào)放大的生物傳感界面的構(gòu)筑及其在赭曲霉毒素A檢測(cè)中的研究[D]. 黃亞培.江西師范大學(xué) 2018
[3]基于適配體技術(shù)的化學(xué)發(fā)光體系檢測(cè)谷物中赭曲霉毒素A[D]. 沈鵬.南京師范大學(xué) 2017
[4]基于上轉(zhuǎn)換發(fā)光納米探針的赭曲霉毒素A檢測(cè)方法研究[D]. 戴邵亮.江南大學(xué) 2016



本文編號(hào)：3123546