發(fā)布時間：2018-04-13 12:16

  本文選題：雞蛋 + S-卵白蛋白　； 參考：《華中農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：為了快速且準(zhǔn)確地監(jiān)測禽蛋蛋清中S-卵白蛋白和卵類粘蛋白含量,本文以S-卵白蛋白和卵類粘蛋白為研究對象,采用分子印跡技術(shù)、免疫技術(shù)、電化學(xué)聚合技術(shù)手段,基于新型納米材料,制得電化學(xué)印跡傳感器和免疫傳感器,對S-卵白蛋白和卵類粘蛋白進行了特異性超靈敏檢測。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:(1)鑒于蛋清中S-卵白蛋白的含量與雞蛋新鮮度和品質(zhì)有較大相關(guān)性,將S-卵白蛋白含量作為評價雞蛋新鮮度和品質(zhì)的指標(biāo)具有較大的前景和意義。本文通過循環(huán)伏安法和差分脈沖伏安法對傳感器制備的掃描圈數(shù)、掃描速率、模板洗脫時間和孵育時間進行了優(yōu)化,確定最佳掃描圈數(shù)為18,掃描速率為100 mV/s,模板洗脫時間為1.5 h,孵育時間為40 min,成功制備了能特異性識別S-卵白蛋白的印跡聚吡咯膜電化學(xué)傳感器。采用場發(fā)射掃描電鏡對印跡和非印跡傳感器的微觀結(jié)構(gòu)進行了表征。通過差分脈沖伏安法,探討了不同S-卵白蛋白濃度與峰電流變化的關(guān)系,確定S-卵白蛋白濃度在10-6-10-3 mg/mL范圍內(nèi)時,濃度與峰電流變化值具有較好的依賴關(guān)系。因此,該印跡傳感器對S-卵白蛋白具有良好特異性性響應(yīng),有潛力用于定量檢測S-卵白蛋白。(2)采用分子印跡和電化學(xué)共聚合技術(shù),結(jié)合多壁碳納米管和殼聚糖復(fù)合膜,制備了S-卵白蛋白電化學(xué)印跡傳感器。通過紅外光譜和掃描電鏡對修飾材料進行了表征。借助循環(huán)伏安法、差分脈沖伏安法和交流阻抗法對修飾電極的性能、峰電流與目標(biāo)蛋白濃度以及印跡傳感器的特異性進行了系統(tǒng)地評價。在最佳條件下,所得傳感器對S-卵白蛋白的檢測范圍為10~(-8)-10~(-4) mg/m L,檢出限為2.95×10-9 mg/m L。此外,印跡傳感器展現(xiàn)出寬檢測范圍、高靈敏度。(3)本實驗采用共沉淀法和檸檬酸鈉還原法制備Fe_3O_4@Au NPs復(fù)合納米粒子,通過紫外-可見光譜、紅外光譜、X射線衍射和掃描電鏡對Fe_3O_4@Au NPs進行了分析表征,表明成功制備了分散均一的磁核金殼復(fù)合納米粒子。基于抗體與抗原特異性結(jié)合原理,在修飾有Fe_3O_4@Au NPs的電極表面俘獲卵白蛋白抗體,制得S-卵白蛋白電化學(xué)免疫傳感器。采取循環(huán)伏安法和交流阻抗法對免疫傳感器的層層阻抗過程進行了性能對比,借助差分脈沖伏安法對抗體孵育濃度、反應(yīng)溫度和pH進行了優(yōu)化,探討了免疫傳感器結(jié)合S-卵白蛋白后所產(chǎn)生的響應(yīng)峰電流與S-卵白蛋白濃度之間的依賴關(guān)系,測定了免疫傳感器對混合體系的抗干擾能力。結(jié)果表明,響應(yīng)峰電流與S-卵白蛋白濃度呈負相關(guān)線性關(guān)系,檢測范圍為10~(-12)-10~(-7) mg/mL和10~(-6)-10~(-2) mg/mL,檢出限為2.35×10~(-13) mg/mL。此免疫傳感器具有較低檢出限、較寬檢測范圍、較高的特異性和穩(wěn)定性,可應(yīng)用于實際樣品的檢測。(4)本研究采用檸檬酸鈉還原法制得GO/Au NPs復(fù)合納米粒子,基于Au-S鍵和GO表面的活性基團將卵類粘蛋白抗體固定在修飾電極表面,構(gòu)建了卵類粘蛋白電化學(xué)免疫傳感器。通過紫外-可見光譜、紅外光譜、X射線衍射和掃描電鏡對GO和Au NPs及其復(fù)合材料進行了分析表征。以循環(huán)伏安法、差分脈沖伏安法和交流阻抗法對免疫傳感器的層層阻抗過程進行了性能對比,探討了免疫傳感器識別卵類粘蛋白后所產(chǎn)生的響應(yīng)峰電流與卵類粘蛋白濃度之間的關(guān)系,測定了免疫傳感器對混合體系的抗干擾能力。結(jié)果表明,響應(yīng)峰電流與卵類粘蛋白濃度呈負相關(guān)線性關(guān)系,檢測范圍為10~(-8) mg/m L-10-1 mg/m L,檢出限為1.32×10-9 mg/m L。此傳感器對卵類粘蛋白具有較高的特異性響應(yīng),且在4℃下保存15 d以內(nèi)仍具有較好的檢測性能。
[Abstract]:In order to quickly and accurately monitor the content of S - egg albumin and egg - like protein in egg white of eggs , the relationship between the concentration of S - egg albumin and the change of peak current was studied by means of cyclic voltammetry and differential pulse voltammetry . An electrochemical immunosensor was prepared by the method of cyclic voltammetry , IR , X - ray diffraction and scanning electron microscopy . The results showed that the immunosensor had a negative correlation with the concentration of S - egg albumin , and the detection limit was 2.35 脳 10 ~ ( -13 ) mg / mL .

【學(xué)位授予單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：TS253.1;TP212.2

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 李晶;王薇;張燕;陸e，

本文編號：1744447