發(fā)布時間：2018-01-09 13:12

  本文關(guān)鍵詞：基于Pd@Pt雙金屬納米粒子催化特性用于腫瘤標(biāo)記物L(fēng)MP-1的電化學(xué)免疫傳感器的研究　出處：《重慶醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:EB(Epstein-Barr)病毒即人類皰疹病毒4型,是Epstein與Barr于1964年最先從非洲惡性淋巴瘤組織培養(yǎng)中發(fā)現(xiàn)的一種病毒,它主要感染人類口咽部的上皮細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞。與EB病毒感染密切相關(guān)的疾病包括非腫瘤性的疾病(如傳染性單核細(xì)胞增多癥)和腫瘤性疾病(如Burkitt淋巴瘤、霍奇金病、鼻咽癌),在其它疾病(如與免疫功能受損有關(guān)的平滑肌肉瘤、大細(xì)胞間變性淋巴瘤、惡性組織細(xì)胞增生癥)中也檢測到EB病毒的存在。然而,EB病毒潛伏膜蛋白1(LMP-1)是目前唯一被證實與細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān)的具有癌基因功能的潛伏蛋白,LMP-1通過干擾細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)以影響疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移。本研究構(gòu)建了一種準(zhǔn)確、靈敏和快速的免疫傳感器新方法用于LMP-1抗原的檢測,從而對相關(guān)疾病進(jìn)行早期的篩查。方法:1.Pd@Pt雙金屬納米粒子的合成。在水浴條件下持續(xù)超聲4h,L-抗壞血酸將K2Pt Cl4和Na2Pd Cl4還原為Pd@Pt納米粒子,且在聚醚F127的作用下Pd@Pt雙金屬納米粒子均勻的分散于溶液中。使用TEM和XPS對合成的雙金屬納米粒子進(jìn)行表征。2.信號探針的制備。Pd@Pt雙金屬納米粒子在強(qiáng)陽離子吸附劑PDDA的介導(dǎo)下通過靜電吸附作用連接到羧基化的MWCNTs上,接著硫堇修飾的多抗通過酰胺鍵與Pd@Pt-MWCNTs作用,然后辣根過氧化物酶通過NH2-Pt鍵作用形成最后的信號探針(Ab2/Thi/HRP/Pd@Pt-MWCNTs)。通過掃描電鏡和電化學(xué)的方法對其進(jìn)行表征。3.經(jīng)Al2O3粉末打磨完成后的玻碳電極作為反應(yīng)基板,以沖入氮氣的磷酸鹽緩沖液作為基礎(chǔ)反應(yīng)液。在對基礎(chǔ)反應(yīng)液p H值、石墨烯與多壁碳納米管的比例、抗原抗體孵育時間和過氧化氫濃度等實驗條件進(jìn)行優(yōu)化后,利用差分脈沖伏安法對不同濃度的LMP-1抗原進(jìn)行電化學(xué)檢測。根據(jù)檢測結(jié)果繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線,并對此LMP-1電化學(xué)免疫傳感器的穩(wěn)定性、靈敏度和特異性進(jìn)行評估。結(jié)果:1.成功合成了Pd@Pt雙金屬納米粒子。通過透射電鏡可以觀察到其分散性好以及其粒子的平均尺寸為41.4 nm。并結(jié)合X射線光電子能譜對成功合成的Pd@Pt雙金屬納米粒子進(jìn)行元素分析。2.構(gòu)建成功的免疫傳感器,在優(yōu)化的條件下檢測目標(biāo)物L(fēng)MP-1,在1.00×10-2到4.00×101 ng m L-1范圍內(nèi)信號與目標(biāo)物濃度的對數(shù)呈線性相關(guān)性,R2=0.992,最低檢測限為0.62 pg m L-1(S/N=3),線性方程為I(u A)=7.803Log[C]+32.95。3.該免疫傳感器性能良好,批間差異和批內(nèi)差異均小于5%。同時具有好的特異性和穩(wěn)定性。結(jié)論:通過將石墨烯-多壁碳納米管復(fù)合物修飾于玻碳電極表面,以增大電極表面積、導(dǎo)電性和單克隆抗體的負(fù)載量,制備成功的免疫傳感器用于快速、靈敏地檢測標(biāo)志物L(fēng)MP-1。本研究在免疫反應(yīng)的基礎(chǔ)上,結(jié)合了Pd@Pt(具有類似辣根過氧化物酶的活性)雙金屬納米粒子,通過Pd@Pt和HRP共同催化過氧化氫以放大信號,從而使得該免疫傳感器擁有了較寬的檢測范圍和較高的靈敏度。此電化學(xué)免疫傳感器具有較好的特異性、重復(fù)性和較高的靈敏度,為臨床定量檢測LMP-1提供了有效的方法。
[Abstract]:Objective : Epstein - Barr virus ( EB ) virus , a kind of human herpesvirus type 4 , is a kind of virus found by Epstein Barr virus in the tissue culture of malignant lymphoma in Africa .

【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R730.43;TP212

【參考文獻(xiàn)】

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1 ;Determination of Trace Thiocyanate by a Chitosan-Modified Glassy Carbon Electrode[J];Chemical Research in Chinese Universities;2002年03期

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本文編號：1401515