本文關(guān)鍵詞：基于金屬—有機(jī)骨架材料及石墨烯的C-反應(yīng)蛋白免疫分析技術(shù)的研究

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【摘要】：金屬有機(jī)骨架材料(MOFs)具有多孔結(jié)構(gòu)、比表面積大、易修飾等特點(diǎn),已經(jīng)受到越來越多科研工作者的青睞。SNHKUST-1是Cu-MOF中的一種,具有納米模擬酶的特性。本文合成了生物相容性好并且具有較強(qiáng)催化性能的中空銀鉑納米顆粒(Ag-Pt)、Au/SNHKUST-1納米復(fù)合材料、Pt/SNHKUST-1納米材料、Pt/MnO2復(fù)合材料,并將其用于構(gòu)建免疫傳感器檢測C-反應(yīng)蛋白(CRP)。具體內(nèi)容如下:(1)通過置換反應(yīng)水熱合成法合成中空銀鉑納米材料,并對它進(jìn)行表征,利用它的催化活性制備了一種靈敏的標(biāo)記型C-反應(yīng)蛋白免疫傳感器。傳感器首先以中空石墨烯為固定材料將C-反應(yīng)蛋白抗體固定在電極上,采用中空銀鉑納米顆粒標(biāo)記C-反應(yīng)蛋白抗體,通過夾心法檢測C-反應(yīng)蛋白。在最優(yōu)的實(shí)驗(yàn)條件下,其線性范圍為0.1~150 ng/mL,線性相關(guān)系數(shù)為0.9643,檢測限為0.02 ng/mL。(2)在常溫下合成了Au納米顆粒負(fù)載的金屬有機(jī)骨架化合物超納米結(jié)構(gòu)材料(Au/SNHKUST-1),并以其為標(biāo)記材料標(biāo)記C反應(yīng)蛋白抗體。合成了中空狀石墨烯納米材料和Au納米顆粒作為固定基質(zhì),利用中空石墨烯與玻碳電極之間的π-π吸附再加入導(dǎo)電材料Au,進(jìn)一步增大固定抗體的數(shù)量,制備了夾心型的C-反應(yīng)蛋白免疫傳感器。通過檢測標(biāo)記物對H2O2的催化電流,實(shí)現(xiàn)對C-反應(yīng)蛋白的定量測定。該傳感器在C-反應(yīng)蛋白濃度為0.2ng/mL-200ng/mL的范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系,線性相關(guān)系數(shù)R2=0.9947,檢測下限0.05ng/mL。該傳感器為C-反應(yīng)蛋白測定提供了一種新的簡單快速的檢測方法。(3)合成了Pt納米顆粒負(fù)載的一種Cu-MOF(SNHKUST-1),并以其作為標(biāo)記材料,標(biāo)記C反應(yīng)蛋白抗體;同時(shí)以合成的氧化石墨烯作為固定基質(zhì),制備了夾心型的C-反應(yīng)蛋白免疫傳感器。通過檢測標(biāo)記物對H2O2的催化電流,實(shí)現(xiàn)對C-反應(yīng)蛋白的定量測定。該傳感器在C-反應(yīng)蛋白濃度0.1ng/mL-100ng/mL范圍內(nèi)有線性響應(yīng),線性方程為I(μA)=0.72894C+1.43293,線性相關(guān)系數(shù)為0.9915,檢測下限為0.033ng/mL,該傳感器可用于真實(shí)血清樣品中CRP的檢測。(4)酶聯(lián)免疫法就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合,然后通過顯色來檢測抗原的一種分析方法。本文在常溫下合成了Pt/MnO2顆粒并且使之與葡萄糖氧化酶結(jié)合,用來標(biāo)記CRP抗體。葡萄糖氧化酶(GOx)對β-D(+)葡萄糖具有專一的催化性,生成的中間產(chǎn)物H2O2可以使TMB(3,3',5,5'-四甲基聯(lián)苯胺)顯色。本實(shí)驗(yàn)利用夾心型模擬酶聯(lián)免疫法(ELISA),采用紫外可見分光光度計(jì)(UV-VIS)檢測吸光度實(shí)現(xiàn)CRP含量的測定。在最優(yōu)條件下,吸光度值與CRP濃度成正比關(guān)系,線性范圍為0.05ng/mL-2000.00 ng/mL。本法可用于真實(shí)樣品中CRP的定量測定。
【學(xué)位授予單位】：云南師范大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：TB383.1;TP212.3

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1278035