與傳統(tǒng)的光學(xué)顯微成像技術(shù)相比,熒光顯微成像技術(shù)的信噪比更高,且具有較強(qiáng)的特異性,因此得到了更為廣泛的應(yīng)用。但是熒光顯微成像技術(shù)和傳統(tǒng)的光學(xué)顯微成像技術(shù)一樣,存在著分辨率衍射受限的問(wèn)題。為了解決這一問(wèn)題,一系列基于不同原理的超分辨熒光顯微成像技術(shù)被提出。其中結(jié)構(gòu)光照明超分辨熒光顯微成像技術(shù)(SIM)具有快速成像和低光毒性等優(yōu)點(diǎn),在細(xì)胞生物學(xué)研究領(lǐng)域得到了特別的關(guān)注。SIM技術(shù)使用余弦形式的結(jié)構(gòu)光照明,利用余弦照明條紋的移頻作用實(shí)現(xiàn)成像分辨率的提高。數(shù)字微鏡器件(DMD)已經(jīng)被應(yīng)用在SIM超分辨顯微成像中,然而在使用激光光源時(shí)基于DMD的SIM成像系統(tǒng)中存在著激光散斑問(wèn)題,影響成像效果。因此基于DMD的SIM成像系統(tǒng)一般使用非相干光源。本文提出一種基于MEMS微鏡掃描的消散斑方法,解決了 DMD照明調(diào)制中的激光散斑問(wèn)題,搭建了 DMD照明調(diào)制的熒光顯微成像系統(tǒng)。在此基礎(chǔ)上,實(shí)現(xiàn)了余弦結(jié)構(gòu)光SIM超分辨顯微成像。利用DMD的數(shù)字可編程特性,對(duì)盲SIM顯微成像技術(shù)進(jìn)行了改進(jìn),將所需實(shí)驗(yàn)圖像的數(shù)量從幾百到上千減少至幾十,極大地提高了盲SIM的成像效率。對(duì)超分辨光學(xué)漲落顯微成像(SOFI)技術(shù)進(jìn)行了...

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．１熒光產(chǎn)生的機(jī)理??

?浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文???一種是非輻射形式的能量損耗（例如轉(zhuǎn)換為熱量），另一種便是直接躍遷至基態(tài)并輻射出光??子，而這一方式所產(chǎn)生的光輻射就稱(chēng)為熒光。??三二：：：：１１７＾?Ｅ?１?中間振動(dòng)??激發(fā)態(tài)Ｓｌ?＾?——?Ｔ能級(jí)??Ｉ??Ｉ??Ｉ??Ｉ??Ｉ??激發(fā)?熒光?非輻射損....

圖１．３熒光顯黴成像系統(tǒng)的兩種形式??３??

????熒光顯微成像系統(tǒng)按照成像方式可以分為寬場(chǎng)［８］和共聚焦［９］兩種類(lèi)型。寬場(chǎng)顯微成像??系統(tǒng)通過(guò)顯微物鏡和場(chǎng)鏡（ｔｕｂｅ?ｌｅｎｓ）的組合直接將熒光樣品的放大實(shí)像成在面探測(cè)器的感??光面上，從而獲得樣品的熒光圖像。寬場(chǎng)顯微成像系統(tǒng)中，通常使用同一個(gè)顯微物鏡用于??照明和熒光....

圖１．４兩個(gè)艾里斑的混疊現(xiàn)象??

多次曝光，因此成像速度較慢。此外，??共聚焦熒光顯微成像系統(tǒng)的視場(chǎng)通常要比寬場(chǎng)熒光顯微成像系統(tǒng)的更校二者各有優(yōu)勢(shì)和??劣勢(shì)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際應(yīng)用場(chǎng)景的需求進(jìn)行選擇。??１．２超分辨焚光顯微成像技術(shù)??熒光顯微成像技術(shù)的分辨率同樣存在著衍射極限。由于衍射效應(yīng)，樣品上單個(gè)熒光分??子的像表....

圖１．５隨機(jī)光學(xué)重構(gòu)顯微成像技術(shù)（ＳＴＯＲＭ）原理示意圖「１３］??１．３結(jié)構(gòu)光照明超分辨熒光顯微成像技術(shù)??

??熒光顯微成像技術(shù)的基礎(chǔ)上，使用了余弦狀的結(jié)構(gòu)光照明而不是均勻的寬場(chǎng)照明。利用結(jié)??構(gòu)光的移頻作用并結(jié)合后期算法，可以提取出樣品細(xì)節(jié)的高頻信息，能夠?qū)⒎直媛侍岣咧??接近原來(lái)的２倍［｜４］。這些超分辨熒光顯微成像技術(shù)突破了傳統(tǒng)熒光顯微成像的衍射極限，??在材料科學(xué)和生物學(xué)等研究....

本文編號(hào)：4043257