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基于散斑效應的細胞濃度檢測計設計與制備

發(fā)布時間:2020-05-28 03:15
【摘要】:細胞是構成人體組織、器官的主要組成元素,細胞計數(shù)技術被廣泛應用在生物醫(yī)學、藥物篩選、環(huán)境監(jiān)測等多個領域。本文基于散斑聚焦效應,結合生物傳感技術,設計制備了一種細胞濃度檢測計,并將其應用于貼壁細胞濃度的檢測。該細胞濃度檢測方法相比于傳統(tǒng)的細胞計數(shù)方法具有免標記、操作簡單、成本低廉等優(yōu)點。具體工作如下:1.通過對細胞濃度檢測計各功能單元的分析,闡釋了細胞濃度計數(shù)原理。利用Mathematica軟件完成了檢測計各結構單元的初步設計,并利用Zemax光學仿真優(yōu)化了所設計結構尺寸,最終確定了細胞濃度檢測計各關鍵光學部件的具體尺寸。2.基于所設計的細胞濃度檢測計結構,設計了相應加工流程。其中基底的加工通過干法刻蝕完成,主要包括HDMS增粘、勻膠、軟烘、紫外照射、后烘、顯影、堅膜、刻蝕;蓋片的制備主要通過標準的lift-off光刻工藝完成,分為蓋片陽模制備階段、蓋片倒模階段,其中倒模過程需要經過陽模硅烷化、澆筑PDMS、抽真空、加熱固化、撕模五個步驟。在完成基底和蓋片的制備后,利用雙面光刻機完成了基底和蓋片的對準鍵合。3.以Hela細胞為檢測對象,驗證了細胞濃度檢測計對細胞濃度檢測的正確性,表征了檢測計的性能指標,實驗結果表明本文所設計的細胞濃度檢測計可以實現(xiàn)對細胞濃度的準確檢測。
【圖文】:

細胞計數(shù)


典型的發(fā)明就是細胞計數(shù)板,也可以稱為顯微鏡計。其具體方法是,首先將待測細胞樣本制備成懸浮滴加在具有一定規(guī)格尺寸的矩形框內,使用光學顯進行觀察計數(shù),,最后通過一定的計算完成細胞計數(shù)所使用顯微鏡的分辨率及放大倍數(shù)決定,在很大程程度。該計數(shù)方法一般用于待測細胞樣本濃度較小小等參量的情況。人工計數(shù)由于其計數(shù)簡單方便始的那一天直到今天,仍然被許多科研機構及實驗依舊存在著一些無法克服的問題,例如對同一個待同一實驗人員不同次數(shù)所得到的計數(shù)結果均會有一胞樣本需要經過多次的重復計數(shù)甚至無法使用人工作量較大,檢測結果一致性不好,人為因數(shù)造成的檢

示意圖,光信號,細胞,示意圖


是在細胞樣本活動的情況下實現(xiàn)檢測,首先將待測細胞驅動力的作用下使細胞一個一個的通過流式細胞儀的檢激光光源出射的光束經過聚焦后會激發(fā)細胞表面標記發(fā)出具有特定波長的熒光,光電檢測器把檢測到激發(fā)光會對細胞的其他物理參量和生化特征參數(shù)實現(xiàn)檢測,根特征參數(shù)實現(xiàn)對細胞種類的分選同時進行不同類別細光抗體標記的細胞時會激發(fā)出以細胞為球心徑向輻射的發(fā)出的熒光信號[16],其中散射光信號又可以分為前向號[18],如圖 1-2 所示。通過對散射光信號的探測,可以濃度等物理參數(shù)[19],其中前向散射光信號的強弱與被測射光信號可以獲得樣本內部相關結構的信息。
【學位授予單位】:太原理工大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:TH79

【參考文獻】

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本文編號:2684612

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