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凡納濱對蝦血清中直接與病原菌相結(jié)合的主要蛋白的鑒定

發(fā)布時間:2018-06-24 17:09

  本文選題:凡納濱對蝦 + 親和蛋白質(zhì)組學(xué) ; 參考:《水產(chǎn)學(xué)報(bào)》2008年01期


【摘要】:以凡納濱對蝦為研究對象,將其血清分別與溶藻酸弧菌,哈維氏弧菌,嗜水氣單胞菌和金黃色葡萄球菌等4種病原菌孵育,采用親和蛋白質(zhì)組學(xué)和Western-blotting等分子生物學(xué)方法純化、鑒定和確證其中可與病原菌直接結(jié)合的蛋白。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比4種病原菌與蝦血清孵育5h后均可與對蝦血清中分子質(zhì)量約為75 000(p75)的蛋白相結(jié)合,而孵育15h后既可與p75相結(jié)合,還可與分子質(zhì)量約為77 000(p77)的蛋白以及0~4種不同分子質(zhì)量的蛋白相結(jié)合。經(jīng)MALDI-TOF/MS分析和Mascot搜索引擎檢索,p75和p77蛋白分別與凡納濱對蝦中分子質(zhì)量約為75 000、77 000的2個血藍(lán)蛋白亞基具有顯著一致性。尤其是p75蛋白還可與兔抗血藍(lán)蛋白75 000亞基抗體發(fā)生特異性結(jié)合。由此推斷,凡納濱對蝦血清中與病原菌直接結(jié)合的主要蛋白為血藍(lán)蛋白,提示血藍(lán)蛋白全蛋白可能具有抗菌活性。
[Abstract]:The serum of Penaeus vannamei was incubated with Vibrio alginate, Vibrio harvetii, Aeromonas hydrophila and Staphylococcus aureus respectively, and purified by affinity proteomics and Western-blotting. To identify and confirm the proteins which can directly bind to pathogenic bacteria. The results showed that after incubation with shrimp serum for 5 h, the four pathogens could bind to protein with molecular weight of 75 000 (p75) in the serum of Penaeus penaeus, but after 15 hours of incubation, they could bind to p75. It also binds to proteins with molecular weight of about 77000 (p77) and four proteins with different molecular weights. By MALDI-TOF / MS analysis and Mascot search engine, the p75 and p77 proteins were found to be significantly consistent with the two hemocyanin subunits with molecular weight of 75,000 ~ 77000 in Penaeus vannamei, respectively. In particular, p75 protein can bind specifically with rabbit anti-hemocyanin 75 000 subunit antibody. It is inferred that the main protein that binds directly to pathogenic bacteria in the serum of Penaeus vannamei is hemocyanin, suggesting that the whole protein of hemocyanin may have antibacterial activity.
【作者單位】: 汕頭大學(xué)理學(xué)院生物學(xué)系 汕頭大學(xué)理學(xué)院生物學(xué)系 汕頭大學(xué)理學(xué)院生物學(xué)系 汕頭大學(xué)理學(xué)院生物學(xué)系 汕頭大學(xué)海洋生物研究所 汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院
【基金】:國家自然科學(xué)基金(30400258) 廣東省自然科學(xué)基金(06027212) 汕頭市科技計(jì)劃項(xiàng)目(2006-148) 廣東省科技計(jì)劃項(xiàng)目(2006A36502004)
【分類號】:S945.4

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號:2062326

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