為獲得能利用葡萄糖/木糖混合糖液的高產(chǎn)油脂菌種,以野生酵母菌株Trichosporon dermatis ZZ-46為出發(fā)菌進行常壓室溫等離子體(atmospheric room temperature plasma,ARTP)-硫酸二乙酯(diethyl sulfate,DES)復(fù)合誘變,并分別以淺藍菌素和氯化三苯基四氮唑(triphenyl tetrazolium chloride,TTC)分別為篩選因子結(jié)合尼羅紅熒光染色進行高通量篩選,最終選育出1株高產(chǎn)菌株L7。該菌以混合糖為碳源進行搖瓶復(fù)篩后,生物量、油脂產(chǎn)量和油脂含量分別達到22.7 g/L、11.4 g/L和50.5%,較出發(fā)菌株分別提高12.6%、33.2%和7.8%;且該菌具有良好的遺傳穩(wěn)定性,其脂肪酸組成與出發(fā)菌相同,與植物油相似。結(jié)果表明,該菌具有較好利用混合糖液生產(chǎn)生物柴油的潛力。

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【部分圖文】：

圖1 不同濃度TTC和淺藍菌素對ZZ-46的生長的影響

TTC是一種氧化還原劑，溶于水時無色，當(dāng)接受脫氫酶脫下來的H+時被還原成紅色物質(zhì)三苯基甲臢(triphenylformazan,TF)，其顏色越深則表示脂肪酸脫氫酶的活性越強，不飽和脂肪酸的含量就越高[22]。淺藍菌素是一種抗真菌抗生素，可抑制脂肪酸合酶的活性，從而不可逆地抑制....

圖2 野生油脂酵母ZZ-46的ARTP致死率曲線

隨著誘變時間延長，菌落的數(shù)量越來越少，致死率越來越高。當(dāng)處理時間的140s時，致死率達到96.1%，處理170s時，致死率達到100%。由于AR-TP誘變產(chǎn)生的突變具有隨機性，致死率和正突變之間的關(guān)系并不明確，這主要取決于誘變方法和菌株自身特性[16]。因此，為了獲得生存能力....

圖8 野生菌株ZZ-46和突變菌株L7的發(fā)酵曲線圖

木質(zhì)纖維素完全水解后得到的葡萄糖和木糖能達到總糖的90%以上，且兩者的質(zhì)量比約為2∶1[18]，因此選擇葡萄糖∶木糖=2∶1(質(zhì)量比)的初始碳源模擬纖維素水解液，總糖質(zhì)量濃度保持70g/L�？疾煲吧闦Z-46和突變菌株L7生長和積累油脂的情況，結(jié)果如圖8所示。由圖8可知，Z....

圖3 ARTP誘變菌株的相對OD600 nm和熒光強度

將經(jīng)過ARTP處理140s后的酵母稀釋到合適濃度并涂布到含有1.67×10-2g/LTTC和4.107×10-6mol/L淺藍菌素的YPD平板上。按照1.2.2.2小節(jié)中的方法進行平板初篩和高通量篩選，測得各突變菌株的OD600nm和熒光強度。如圖3所示，表明原始菌株和誘變....

本文編號：4012359