本文關(guān)鍵詞：內(nèi)皮細(xì)胞在涂層心血管植入物表面的生長:模似仿生性構(gòu)建具有生物活性的細(xì)胞外基質(zhì)

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【摘要】：背景:冠狀動脈內(nèi)置入藥物涂層支架顯著解決了支架內(nèi)再狹窄,但是,支架內(nèi)晚期及超晚期血栓帶來新的難題加快支架內(nèi)皮化,預(yù)防血栓形成成為研究的關(guān)鍵。目的:觀察內(nèi)皮細(xì)胞在經(jīng)刻蝕并構(gòu)建仿生的生物活性表面,整合細(xì)胞外基質(zhì)成分的金屬鈦表面的生長情況。設(shè)計、時間及地點:對比觀察,于2007-08/2009-01在西南交通大學(xué)先進材料與技術(shù)教育部重點實驗室完成。材料:成年雜交犬6只,體質(zhì)量15～20kg,純鈦(99.997%)為西安寶雞有色金屬有限公司產(chǎn)品,切割成5mm×5mm×2mm圓片試樣。方法:在已刻蝕的鈦表面通過自組裝技術(shù)構(gòu)建膠原-肝素-血管內(nèi)皮生長因子-內(nèi)皮祖細(xì)胞膜蛋白抗體為組分的多層膜作為涂層組;未涂層的鈦為未涂層組。成年雜交犬6只,涂層組樣品置入右側(cè)股動脈,未涂層組置入左側(cè)股動脈內(nèi),獲得2h,15d,3個月的樣品。主要觀察指標(biāo):乳酸脫氫酶實驗測定黏附血小板的數(shù)量;酶聯(lián)免疫法測定GMP-140以檢測黏附血小板激活程度;掃描電鏡觀察黏附血小板的形貌;采用SysmexCA-600凝血儀測定活化部分凝血活酶時間及凝血酶原時間。掃描電鏡觀察植入物在不同時間點,內(nèi)皮細(xì)胞在其表面的生長;免疫熒光法觀察置入2h的試片表面分化成熟的內(nèi)皮細(xì)胞,其血管內(nèi)皮生長因子受體2的表達。結(jié)果:①乳酸脫氫酶實驗顯示涂層樣片的乳酸脫氫酶值比未涂層顯著減少,說明涂層鈦可以減少血小板的黏附(P0.05)。②黏附血小板激活程度的定量分析結(jié)果顯示在涂層上黏附血小板P-選擇素的表達顯著小于未涂層上的表達(P0.05)。③掃描電鏡可見涂層鈦表面黏附血小板形貌的變形程度小于未涂層鈦。④涂層的活化部分凝血活酶時間和凝血酶原時間分別是(134.2±13.3),(34.2±5.7)s;未涂層的活化部分凝血活酶時間和凝血酶原時間分別是(44.9±2.3),(17.3±2.4)s,可見涂層的凝血時間顯著延長(P0.05)。⑤掃描電鏡可見置入2h:對照樣品被血凝塊覆蓋;涂層樣品表面血凝塊少而局限。置入15d:對照組大量纖維狀物質(zhì)沉積;涂層樣品表面均勻覆蓋一層長梭形細(xì)胞。置入3個月:對照組表面增生特別明顯,沿血流方向排列;實驗組表面覆蓋組織顯示更加成熟,均勻覆蓋一層細(xì)胞,細(xì)胞的形態(tài)也更加接近血管內(nèi)膜的內(nèi)皮細(xì)胞。⑥免疫熒光可見涂層樣品表面黏附大量的血管內(nèi)皮生長因子受體2陽性細(xì)胞,而對照組血管內(nèi)皮生長因子受體2陽性細(xì)胞較少。結(jié)論:內(nèi)皮細(xì)胞在仿生性的具有生物活性的細(xì)胞外基質(zhì)中能迅速被捕獲固定,內(nèi)皮細(xì)胞生長必須以抗凝為前提。對于促進內(nèi)皮細(xì)胞的生長和分化構(gòu)建有生物活性的仿生底物是途徑之一。
【作者單位】： 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院心臟科;教育部先進材料重點實驗室 西南交通大學(xué)材料學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 內(nèi)皮細(xì)胞 體內(nèi)內(nèi)皮化 血管再狹窄 血管支架 細(xì)胞外基質(zhì)成分 活化部分凝血活酶時間 血管內(nèi)皮生長因子受體 藥物涂層支架 血小板激活 生物活性
【基金】：“973”項目(國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃《組織誘導(dǎo)性生物醫(yī)用材料的基礎(chǔ)研究》項目下屬子項目“誘導(dǎo)抗凝血生物化表面的設(shè)計和構(gòu)建”)(2005CB623904) 國家自然科學(xué)基金資助項目(20603027) 博士后基金資助項目(20060401019)~~
【分類號】：R318.08
【正文快照】： 0引言盡管血管支架的問世對狹窄血管的重建開創(chuàng)了一個嶄新的領(lǐng)域,尤其是中等動脈狹窄的心腦血管疾病,經(jīng)過支架的置入治療,得以挽救患者生命,并在很大程度上提高了生活質(zhì)量。但是,支架置入后發(fā)生的支架內(nèi)再狹窄一直是困擾臨床醫(yī)生和材料學(xué)者的問題[1-5]。再狹窄的發(fā)生原因是擴

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8 閔e，

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