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紅肉臍橙(Citrus sinenesis Osbeck)果實(shí)生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中類胡蘿卜素生物合成基因表達(dá)的原位檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2024-03-23 10:42
  柑橘是富含類胡蘿卜素的水果,大多情況下果皮含量多于果肉。近年來(lái)以柑橘紅肉突變體為對(duì)象的研究引起了越來(lái)越廣泛的關(guān)注,這些突變體一方面賦予本身優(yōu)良的外觀,另一方面為柑橘果實(shí)芽變發(fā)生的機(jī)理研究以及柑橘果肉中的類胡蘿卜素生物合成的研究提供了理想的材料。本研究以紅肉臍橙(C.sinensis Osbeckcv ’Cara Cara’)和清家臍橙(C.sinensis Osbeck cv ’Seika’)為實(shí)驗(yàn)材料,利用RNA原位雜交技術(shù)分析了果實(shí)不同組織中類胡蘿卜素生物合成相關(guān)基因的表達(dá)。主要研究結(jié)果如下: 1.通過(guò)對(duì)汁胞進(jìn)行徒手切片和壓片的顯微觀察,在紅肉臍橙汁胞中檢測(cè)到了紅色線狀有色體的存在。在番茄和紅色葡萄柚中發(fā)現(xiàn)了類似的情形,隨著果實(shí)發(fā)育的進(jìn)行這種形狀的有色體在紅肉臍橙汁胞中有積累的趨勢(shì)。 2.將不同發(fā)育時(shí)期的紅肉臍橙和清家臍橙果實(shí)樣品制成石蠟切片,利用特異性的cRNA探針進(jìn)行原位雜交,結(jié)果表明:psy、pds、lcyb在紅肉臍橙和清家臍橙黃皮層中均有表達(dá);mRNA多積累在接近皮層的表層細(xì)胞內(nèi),在油胞及其周邊組織細(xì)胞中未能檢測(cè)到mRNA的積累;不同果實(shí)發(fā)育期mRNA的積累存在差異;白皮層...

【文章頁(yè)數(shù)】:65 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖2一1高等植物類胡蘿卜素生物合成途徑中的主要酶及其基因(Fraser等,2009)

圖2一1高等植物類胡蘿卜素生物合成途徑中的主要酶及其基因(Fraser等,2009)

Gantt1995),最早由Porter和Lineoln(1950)提出,柑橘類胡蘿卜素生物合成途徑同所有高等植物一樣,均以MEP途徑形成的5碳的異戊二烯焦磷酸(正P)為前體,如圖2一1示,首先,異戊烯焦磷酸在IPP異構(gòu)酶(IPPI)和垅兒基垅牛兒基焦磷酸合成酶(GGPS)作用下....


圖4一1柑橘汁胞的形態(tài)觀察(D紅肉臍橙汁胞的徒手切片觀察(11)

圖4一1柑橘汁胞的形態(tài)觀察(D紅肉臍橙汁胞的徒手切片觀察(11)

柑橘汁胞是由薄壁細(xì)胞組成的胞體和胞柄以及液泡化的空腔組成的細(xì)胞,與清家臍橙相比,紅肉臍橙汁胞呈紅色表型,這種表型主要體現(xiàn)在汁胞胞體和汁柄處,而汁液中仍呈現(xiàn)與清家臍橙類似的橙色(圖4一11),我們分別對(duì)160DAF和220DAF的紅肉臍橙和清家臍橙汁胞進(jìn)行壓片觀察發(fā)現(xiàn),紅肉臍橙汁胞....


圖4--2紅肉臍橙和清家臍橙汁胞中質(zhì)體的壓片觀察Fig.4一2Plastidobservationof’CaraCara,and’Se業(yè)a.navelorangejuicesaewithsquashPreParation

圖4--2紅肉臍橙和清家臍橙汁胞中質(zhì)體的壓片觀察Fig.4一2Plastidobservationof’CaraCara,and’Se業(yè)a.navelorangejuicesaewithsquashPreParation

圖4--2紅肉臍橙和清家臍橙汁胞中質(zhì)體的壓片觀察Fig.4一2Plastidobservationof’CaraCara,and’Se業(yè)a.navelorangejuicesaewithsquashPreParation一B:190DAF,220DAF紅肉臍橙汁胞;C:F從固定液....


圖4一4紐荷爾臍橙和紅肉臍橙果實(shí)中RNA的提取

圖4一4紐荷爾臍橙和紅肉臍橙果實(shí)中RNA的提取

4.2.1RNA提取本實(shí)驗(yàn)室從紐荷爾臍橙、紅肉臍橙黃皮層、白皮層、囊衣、汁胞中分別提取RNA,其質(zhì)量如圖4一4示。將mRNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA第一鏈后,直接以cDNA為模板PCR擴(kuò)增目的基因。圖4一4紐荷爾臍橙和紅肉臍橙果實(shí)中RNA的提取Fig.4一4RNAIsolati....



本文編號(hào):3935804

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