本文關(guān)鍵詞：灰氈毛忍冬新品種ISSR分子標(biāo)記及組織培養(yǎng)的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：灰氈毛忍冬(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz)又名擬大花忍冬、大銀花等,是忍冬科忍冬屬多年生半常綠小灌木植物,其花蕾綠原酸含量在全國(guó)各種藥用忍冬植物中最高,是湖南、重慶、貴州等地藥用忍冬植物生產(chǎn)的主栽品種。雖然我國(guó)藥用忍冬植物產(chǎn)業(yè)取得了長(zhǎng)足的發(fā)展,但是,仍存在著良種缺乏,品種混雜,干花產(chǎn)量和藥用活性成份綠原酸含量低,繁殖技術(shù)落后,育苗周期長(zhǎng),繁殖系數(shù)小等系列問(wèn)題,從而制約了我國(guó)藥用忍冬植物產(chǎn)業(yè)健康可持續(xù)發(fā)展。本文以灰氈毛忍冬新品種‘金翠蕾’、‘銀翠蕾’和‘白云’為研究對(duì)象,研究了灰氈毛忍冬新品種ISSR分子標(biāo)記和組織培養(yǎng),系統(tǒng)地分析了新品種組織培養(yǎng)增殖分化及生根過(guò)程中的內(nèi)源激素、內(nèi)源多胺的變化規(guī)律和調(diào)控作用,旨有效地從分子水平鑒別灰氈毛忍冬新品種,建立新品種高效組培快繁技術(shù)體系,促進(jìn)我國(guó)藥用忍冬植物產(chǎn)業(yè)又好又快發(fā)展。主要研究結(jié)果如下： (1)灰氈毛忍冬新品種ISSR分子標(biāo)記的研究。以灰氈毛忍冬葉片基因組DNA為模板,研究了退火溫度、Taq DNA聚合酶的用量及模板DNA、引物、dNTPs、Mg2+濃度等6種因素對(duì)ISSR—PCR擴(kuò)增的影響,建立了灰氈毛忍冬ISSR-PCR的優(yōu)化反應(yīng)體系和擴(kuò)增程序。利用優(yōu)化的反應(yīng)體系,從100條ISSR引物中篩選出10條能夠擴(kuò)增出清晰、穩(wěn)定條帶的引物。以該10條引物對(duì)3個(gè)灰氈毛忍冬新品種和其它19個(gè)藥用忍冬植物品種基因組DNA擴(kuò)增,共擴(kuò)增出108條帶,其中多態(tài)性條帶96條,多態(tài)性條帶比率為88.9%,說(shuō)明藥用忍冬植物的遺傳多樣性豐富。并利用該體系構(gòu)建3個(gè)灰氈毛忍冬新品種和其它19個(gè)藥用忍冬植物品種DNA指紋圖譜,可從分子水平將3個(gè)新品種與現(xiàn)在藥用忍冬植物品種進(jìn)行鑒別；利用UPGMA和主成分分析,將22個(gè)供試藥用忍冬植物品種劃分為忍冬種群和灰氈毛忍冬種群2個(gè)大類(lèi),每一大類(lèi)又分為北方種群與南方種群。研究發(fā)現(xiàn),不同藥用忍冬植物品種之間的遺傳差異與地理環(huán)境的差異存在相關(guān)性。 (2)灰氈毛忍冬新品種組織培養(yǎng)的研究。以灰氈毛忍冬新品種金翠蕾、銀翠蕾和白云為研究對(duì)象,采用單因素、雙因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),開(kāi)展了外植體選擇、滅菌處理、基本培養(yǎng)基、植物激素及其配比、D-生物素濃度、活性炭濃度、培養(yǎng)溫度、移栽基質(zhì)、移栽容器、組培生根苗消毒處理、降低生產(chǎn)成本措施等系列試驗(yàn),建立了組織培養(yǎng)的無(wú)菌體系,獲得了適宜的初代培養(yǎng)基：金翠蕾和銀翠蕾為MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.1mg·L-1,白云則為MS+6-BA1.0mg·L-1+IBA0.1mg·L-’；篩選出適宜的繼代培養(yǎng)基：金翠蕾為改良MS+6-BA0.5mg·L1+NAA0.1mg·L-1+D-生物素1.0mg·L-1,銀翠蕾為改良MS+6-BA0.5mg·L-1+NAA0.05+D-生物素1.0mg·L-1,白云則為改良MS+6-BA1.0mg·L1+IBA0.1mg-L-1+D-生物素0.5mg·L-1,平均增殖系數(shù)4.65；研究發(fā)現(xiàn)適當(dāng)?shù)蜏赜欣谡T導(dǎo)灰氈毛忍冬組培苗生根,找到了其組培苗生根培養(yǎng)的適宜溫度為20℃；篩選出3個(gè)品種適宜的生根培養(yǎng)基是1/2MS+IBA3.0mg-L-1+AC210mg·L-1,平均生根率97.4%。同時(shí)以金翠蕾葉片為外植體,誘導(dǎo)出了愈傷組織和不定芽,篩選出了葉片誘導(dǎo)愈傷組織的最佳培養(yǎng)基為：B5+6-BA1.0mg·L-1+2,4-D0.5mg·L-1,愈傷組織誘導(dǎo)率為86.7%；誘導(dǎo)不定芽的最佳培養(yǎng)基為：B5+KT0.2mg·L1+NAA1.0mg·L-1,不定芽誘導(dǎo)率為73,4%。研究出組培苗“塑料杯單株一步移栽”技術(shù),適宜移栽基質(zhì)為黃心土+糠殼灰+細(xì)砂(1：2：2),平均移栽達(dá)成活率達(dá)95%以上。用涼開(kāi)水替代蒸餾水,白砂糖代替蔗糖配制培養(yǎng)基,可顯著降低了組培苗生產(chǎn)成本,提高了灰氈毛忍冬新品種工廠化育苗的生產(chǎn)效益。 (3)灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插繁殖技術(shù)的研究。以灰氈毛忍冬新品種‘金翠蕾’組培苗為試驗(yàn)材料,開(kāi)展了不同的扦插基質(zhì)、扦插時(shí)期、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑、ABT6濃度及浸泡時(shí)間對(duì)灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插繁殖的影響試驗(yàn),研究結(jié)果表明,扦插基質(zhì)以泥炭土+珍珠巖(體積比1：3)為宜,適宜的扦插時(shí)期是5月和9月,適宜的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑是300mg·L-1的ABT6浸泡插穗120min,扦插成活率達(dá)95%以上,大幅度降低了灰氈毛忍冬新品種組培苗生產(chǎn)成本。 (4)灰氈毛忍冬新品種組織培養(yǎng)過(guò)程內(nèi)源激素變化的研究。以金翠蕾組培苗為試驗(yàn)材料,分析了組培苗增殖分化、生根及愈傷組織和不定芽誘導(dǎo)過(guò)程的內(nèi)源激素含量變化,研究了6-BA濃度對(duì)繼代培養(yǎng)組培苗、IBA濃度對(duì)生根培養(yǎng)組培苗內(nèi)源激素含量的影響。結(jié)果表明：①灰氈毛忍冬組培苗繼代增殖分化主要受內(nèi)源ZR、ABA和GA3調(diào)控,較高濃度的ZR、GA3和較低ABA有利于灰氈毛忍冬組培苗繼代增殖分化,適當(dāng)高濃度的IAA對(duì)叢芽增殖分化和生長(zhǎng)也有利,但作用不明顯,而較高IPA含量有利于灰氈毛忍冬外植體啟動(dòng)培養(yǎng),但與增殖分化關(guān)系不密切。內(nèi)源激素平衡關(guān)系中是GA3/ZR值主導(dǎo)組培苗增殖分化,較高的GA3/ZR值有利于啟動(dòng)組培苗增殖分化和生長(zhǎng),而增殖分化盛期則需要較低的GA3/ZR值, GA3/ABA值也表現(xiàn)了類(lèi)似效應(yīng)。②在灰氈毛忍冬組培苗不定根的形成過(guò)程中,不同的內(nèi)源激素對(duì)不定根形成的作用不同。較高濃度內(nèi)源IAA、ABA和較低濃度的內(nèi)源GA3、IPA、ZR有利于根原基的分化形成,促進(jìn)了組培苗不定根的形成。而較高濃度的內(nèi)源IAA、GA3、ZR、IPA和較低濃度的內(nèi)源ABA有利于根原基的生長(zhǎng)發(fā)育。內(nèi)源激素的平衡關(guān)系也協(xié)同參與灰氈毛忍冬組培苗根原基分化形成及生長(zhǎng)發(fā)育。較低的(ZR+IPA)/IAA值和較高的IAA/ABA、ABA/GA3值有利于根原基的分化形成,較高(ZR+IPA)/IAA值和較低ABA/GA3值有助于根原基生長(zhǎng)發(fā)育。③不同的內(nèi)源激素在灰氈毛忍冬愈傷組織和不定芽誘導(dǎo)過(guò)程中的作用不同。低濃度的內(nèi)源GA3、IAA、ZR、ABA有利于愈傷組織的誘導(dǎo),而高濃度的內(nèi)源GA3、IAA、ZR促進(jìn)了愈傷組織的生長(zhǎng)。不定芽誘導(dǎo)主要受內(nèi)源IAA和ABA調(diào)控,低水平的內(nèi)源IAA、ABA、ZR、GA3含量有助于愈傷組織分化成不定芽。 (5)灰氈毛忍冬新品種組織培養(yǎng)過(guò)程多胺變化的研究。以金翠蕾組培苗為試驗(yàn)材料,分析了組培苗增殖分化、生根過(guò)程的內(nèi)源多胺含量變化,研究了6-BA濃度對(duì)繼代培養(yǎng)組培苗、IBA濃度對(duì)生根培養(yǎng)組培苗內(nèi)源多胺含量的影響。結(jié)果表明：①不同的內(nèi)源多胺在灰氈毛忍冬組培苗增殖分化過(guò)程中有不同效應(yīng)。組培苗增殖分化主要與Spd、Put含量和Put/Spm值關(guān)系密切,與Spm含量和Put/Spd值、Put/(Spd+Spm)值關(guān)系不大；高水平的Spd、Put含量和Put/Spm值有利于組培苗增殖分化的啟動(dòng),而增殖分化盛期則需要維持較低水平的Put、Spd含量和Put/Spm值。②Put、Spd、Spm及其平衡關(guān)系在灰氈毛忍冬組培苗根原基的分化形成與生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的作用各異。高水平的Put、Spm含量和Put/Spd值、Put/(Spd+Spm)值有利于組培苗根原基的分化形成,而低水平的Put、Spm含量和Put/Spd值、Put/(Spd+Spm)值則促進(jìn)根原基的生長(zhǎng)發(fā)育。低水平的Spd含量和Put/Spm值,既可有利于組培苗根原基的分化形成,又可促進(jìn)根原基生長(zhǎng)發(fā)育。
【關(guān)鍵詞】：灰氈毛忍冬 忍冬植物 ISSR 組織培養(yǎng) 激素 多胺
【學(xué)位授予單位】：中南林業(yè)科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2012
【分類(lèi)號(hào)】：S567.79
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-19
• 1 緒論19-38
• 1.1 藥用忍冬植物品種資源研究進(jìn)展19-20
• 1.2 藥用忍冬植物育種研究進(jìn)展20-21
• 1.3 ISSR分子標(biāo)記技術(shù)的研究進(jìn)展21-24
• 1.3.1 ISSR分子標(biāo)記技術(shù)的理論基礎(chǔ)21-22
• 1.3.2 ISSR分子標(biāo)記技術(shù)的基本反應(yīng)程序22-23
• 1.3.3 ISSR分子標(biāo)記技術(shù)的應(yīng)用23-24
• 1.3.3.1 遺傳作圖構(gòu)建及目的基因定位23-24
• 1.3.3.2 種質(zhì)資源研究24
• 1.3.3.3 植物遺傳多樣性的分析24
• 1.4 藥用忍冬植物分子生物學(xué)的研究進(jìn)展24-27
• 1.4.1 藥用忍冬植物DNA提取24-25
• 1.4.2 藥用忍冬植物DNA染色體核型分析25-26
• 1.4.3 藥用忍冬植物分子標(biāo)記方法26
• 1.4.4 藥用忍冬植物測(cè)序方法26
• 1.4.5 藥用忍冬植物分子生物學(xué)研究存在的問(wèn)題26-27
• 1.5 植物組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)27-28
• 1.6 藥用忍冬植物組織培養(yǎng)的研究進(jìn)展28-31
• 1.6.1 莖尖、莖段、芽的培養(yǎng)28-30
• 1.6.1.1 外植體28-29
• 1.6.1.2 初代培養(yǎng)29
• 1.6.1.3 繼代培養(yǎng)29-30
• 1.6.1.4 生根培養(yǎng)30
• 1.6.1.5 煉苗與移栽30
• 1.6.2 葉片離體培養(yǎng)及愈傷組織誘導(dǎo)30-31
• 1.6.3 細(xì)胞培養(yǎng)31
• 1.6.4 藥用忍冬植物組織培養(yǎng)存在的問(wèn)題31
• 1.7 植物組織培養(yǎng)過(guò)程中內(nèi)源激素的研究進(jìn)展31-35
• 1.7.1 植物組織培養(yǎng)過(guò)程中內(nèi)源激素研究的種類(lèi)32
• 1.7.2 內(nèi)源激素對(duì)培養(yǎng)物分化的調(diào)控32-33
• 1.7.3 內(nèi)源激素在植物愈傷組織誘導(dǎo)中的作用33-34
• 1.7.4 外源激素與內(nèi)源激素的關(guān)系34
• 1.7.5 內(nèi)源激素在植物組織培養(yǎng)研究中存在的問(wèn)題34-35
• 1.8 植物組織培養(yǎng)過(guò)程中內(nèi)源多胺的研究進(jìn)展35-38
• 1.8.1 內(nèi)源多胺在植物體細(xì)胞胚胎發(fā)生中的作用35-36
• 1.8.2 內(nèi)源多胺在植物愈傷組織誘導(dǎo)中的作用36
• 1.8.3 內(nèi)源多胺在不定芽和不定根發(fā)生中的作用36-37
• 1.8.4 內(nèi)源多胺在植物組織培養(yǎng)研究中存在的問(wèn)題37-38
• 2 本課題研究概述38-41
• 2.1 課題的來(lái)源38
• 2.2 研究的目的意義38-39
• 2.3 研究的主要內(nèi)容39-40
• 2.4 研究的技術(shù)路線40-41
• 3 灰氈毛忍冬新品種ISSR分子標(biāo)記的研究41-62
• 3.1 材料與方法41-45
• 3.1.1 試驗(yàn)材料41-42
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)方法42-45
• 3.1.2.1 基因組DNA提取42-43
• 3.1.2.2 ISSR反應(yīng)體系的建立與優(yōu)化43-44
• 3.1.2.2.1 ISSR-PCR擴(kuò)增43
• 3.1.2.2.2 ISSR反應(yīng)程序43-44
• 3.1.2.2.3 擴(kuò)增產(chǎn)物檢測(cè)44
• 3.1.2.2.4 ISSR-PCR反應(yīng)體系的優(yōu)化試驗(yàn)設(shè)計(jì)44
• 3.1.2.3 引物篩選44
• 3.1.2.4 ISSR擴(kuò)增44-45
• 3.1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)及分析45
• 3.2 結(jié)果與分析45-60
• 3.2.1 藥用忍冬植物基因組DNA提取45-47
• 3.2.1.1 DNA的不同提取方法對(duì)純度和濃度的影響45-46
• 3.2.1.2 樣品提取及檢測(cè)46-47
• 3.2.2 ISSR反應(yīng)體系建立與優(yōu)化47-50
• 3.2.2.1 Taq DNA聚合酶單位對(duì)ISSR-PCR反應(yīng)的影響47-48
• 3.2.2.2 dNTPs濃度對(duì)ISSR-PCR反應(yīng)的影響48
• 3.2.2.3 引物濃度對(duì)ISSR-PCR反應(yīng)的影響48-49
• 3.2.2.4 Mg~(2+)濃度對(duì)ISSR-PCR反應(yīng)的影響49
• 3.2.2.5 模板DNA濃度對(duì)ISSR-PCR反應(yīng)的影響49
• 3.2.2.6 退火溫度對(duì)ISSR-PCR反應(yīng)的影響49-50
• 3.2.2.7 優(yōu)化的ISSR-PCR反應(yīng)體系的建立50
• 3.2.3 ISSR引物篩選50-53
• 3.2.4 ISSR擴(kuò)增53-56
• 3.2.5 ISSR多態(tài)性及指紋分析56
• 3.2.6 遺傳相似性分析56-57
• 3.2.7 聚類(lèi)分析57-59
• 3.2.8 主坐標(biāo)分析59-60
• 3.3 小結(jié)與討論60-62
• 4 灰氈毛忍冬新品種組織培養(yǎng)的研究62-87
• 4.1 材料與方法62-68
• 4.1.1 試驗(yàn)材料62
• 4.1.2 外植體消毒62
• 4.1.3 培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件62
• 4.1.4 試驗(yàn)設(shè)計(jì)62-67
• 4.1.4.1 組織培養(yǎng)無(wú)菌體系的建立63
• 4.1.4.2 適宜繼代培養(yǎng)基的篩選63-65
• 4.1.4.3 愈傷組織及不定芽的誘導(dǎo)65-66
• 4.1.4.4 適宜生根培養(yǎng)基的篩選66
• 4.1.4.5 組培苗移栽技術(shù)體系的建立66-67
• 4.1.4.6 降低組培生產(chǎn)成本試驗(yàn)67
• 4.1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析67-68
• 4.2 結(jié)果與分析68-84
• 4.2.1 組織培養(yǎng)無(wú)菌體系的建立68-70
• 4.2.1.1 不同消毒處理對(duì)接種污染率及無(wú)菌外植體得率的影響68
• 4.2.1.2 不同時(shí)期的外植體對(duì)接種污染率及無(wú)菌外植體得率的影響68-69
• 4.2.1.3 初代培養(yǎng)基的激素配比對(duì)誘導(dǎo)外植體萌芽的影響69-70
• 4.2.2 適宜繼代培養(yǎng)基的篩選70-76
• 4.2.2.1 基本培養(yǎng)基對(duì)叢生芽增殖的影響70
• 4.2.2.2 MS基本培養(yǎng)基大量營(yíng)養(yǎng)元素含量對(duì)叢生芽增殖的影響70
• 4.2.2.3 細(xì)胞分裂素種類(lèi)及濃度對(duì)叢生芽增殖的影響70-72
• 4.2.2.4 生長(zhǎng)素種類(lèi)及濃度對(duì)叢生芽增殖的影響72-74
• 4.2.2.5 D-生物素濃度對(duì)叢生芽增殖的影響74
• 4.2.2.6 蔗糖濃度對(duì)叢生芽增殖的影響74-75
• 4.2.2.7 叢生芽高效增殖優(yōu)化培養(yǎng)基的篩選75-76
• 4.2.3 愈傷組織誘導(dǎo)及分化培養(yǎng)基篩選76-79
• 4.2.3.1 不同培養(yǎng)基和激素配比對(duì)愈傷組織誘導(dǎo)的影響76-77
• 4.2.3.2 不定芽的誘導(dǎo)77-79
• 4.2.3.3 再生植株產(chǎn)量與綠原酸79
• 4.2.4 適宜生根培養(yǎng)基的篩選79-81
• 4.2.4.1 不同生長(zhǎng)素對(duì)組培苗生根的影響79
• 4.2.4.2 IBA濃度對(duì)組培苗生根的影響79-80
• 4.2.4.3 活性炭濃度對(duì)組培苗生根的影響80
• 4.2.4.4 溫度對(duì)組培苗生根的影響80-81
• 4.2.4.5 不同品種對(duì)優(yōu)化生根培養(yǎng)基的反應(yīng)81
• 4.2.5 組培苗移栽技術(shù)體系的建立81-83
• 4.2.5.1 移栽基質(zhì)的選擇81-82
• 4.2.5.2 不同的殺菌劑及浸泡時(shí)間對(duì)組培苗移栽成活率的影響82
• 4.2.5.3 移栽容器對(duì)組培苗移栽成活率的影響82-83
• 4.2.6 降低組培生產(chǎn)成本試驗(yàn)83-84
• 4.2.6.1 白砂糖代替蔗糖配制培養(yǎng)基83
• 4.2.6.2 涼開(kāi)水代替蒸餾水配制培養(yǎng)基試驗(yàn)83-84
• 4.3 小結(jié)與討論84-87
• 5 灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插繁殖的研究87-92
• 5.1 材料與方法87-88
• 5.1.1 試驗(yàn)材料87
• 5.1.2 試驗(yàn)方法87-88
• 5.1.2.1 扦插方法87
• 5.1.2.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)87-88
• 5.1.3 統(tǒng)計(jì)分析方法88
• 5.2 結(jié)果與分析88-91
• 5.2.1 扦插基質(zhì)對(duì)灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插生根的影響88-89
• 5.2.2 扦插時(shí)期對(duì)灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插生根的影響89
• 5.2.3 植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑種類(lèi)對(duì)灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插生根的影響89-90
• 5.2.4 ABT_6溶液濃度對(duì)灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插生根的影響90
• 5.2.5 ABT_6浸泡時(shí)間對(duì)灰氈毛忍冬新品種組培苗扦插生根的影響90-91
• 5.3 小結(jié)與討論91-92
• 6 灰氈毛忍冬新品種組織培養(yǎng)過(guò)程內(nèi)源激素變化的研究92-109
• 6.1 材料與方法92-96
• 6.1.1 試驗(yàn)材料92
• 6.1.2 培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件92
• 6.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)92-93
• 6.1.3.1 組培苗在不同繼代培養(yǎng)周期的內(nèi)源激素含量的變化92-93
• 6.1.3.2 6-BA濃度對(duì)繼代培養(yǎng)組培苗的內(nèi)源激素含量的影響試驗(yàn)93
• 6.1.3.3 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源激素含量的影響試驗(yàn)93
• 6.1.3.4 組培苗生根過(guò)程內(nèi)源激素含量的變化試驗(yàn)93
• 6.1.3.5 愈傷組織誘導(dǎo)過(guò)程內(nèi)源激素含量的變化試驗(yàn)93
• 6.1.3.6 愈傷組織分化不定芽過(guò)程內(nèi)源激素含量的變化試驗(yàn)93
• 6.1.4 內(nèi)源激素的測(cè)定93-96
• 6.1.4.1 內(nèi)源激素測(cè)定的種類(lèi)93
• 6.1.4.2 內(nèi)源激素測(cè)定的方法93-94
• 6.1.4.4 試劑的配制94
• 6.1.4.5 樣品中激素的提取94
• 6.1.4.6 樣品激素含量的測(cè)定94-95
• 6.1.4.7 內(nèi)源激素計(jì)算方法95-96
• 6.1.5 統(tǒng)計(jì)分析方法96
• 6.2 結(jié)果與分析96-106
• 6.2.1 組培苗在不同繼代培養(yǎng)周期的內(nèi)源激素含量的變化96
• 6.2.2 組培苗在不同繼代培養(yǎng)周期的內(nèi)源激素平衡的變化96-97
• 6.2.3 組培苗在一個(gè)繼代培養(yǎng)周期中的內(nèi)源激素含量的變化97-98
• 6.2.4 組培苗在一個(gè)繼代培養(yǎng)周期中的內(nèi)源激素平衡的變化98
• 6.2.5 6-BA濃度對(duì)繼代培養(yǎng)組培苗內(nèi)源激素含量的影響98-100
• 6.2.6 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源激素含量的影響100-104
• 6.2.6.1 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源GA_3含量的影響100-101
• 6.2.6.2 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源IAA含量的影響101
• 6.2.6.3 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源ZR含量的影響101-102
• 6.2.6.4 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源IPA含量的影響102
• 6.2.6.5 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源ABA含量的影響102-103
• 6.2.6.6 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程IAA/ABA值的影響103
• 6.2.6.7 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程(ZR+IPA)/IAA值的影響103-104
• 6.2.6.8 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程ABA/GA_3值的影響104
• 6.2.7 愈傷組織誘導(dǎo)過(guò)程內(nèi)源激素含量的變化104-105
• 6.2.8 誘導(dǎo)愈傷組織分化不定芽過(guò)程內(nèi)源激素含量的變化105-106
• 6.3 小結(jié)與討論106-109
• 7 灰氈毛忍冬新品種組織培養(yǎng)過(guò)程內(nèi)源多胺變化的研究109-117
• 7.1 材料與方法109-111
• 7.1.1 試驗(yàn)材料109
• 7.1.2 培養(yǎng)基與培養(yǎng)條件109
• 7.1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)109-110
• 7.1.3.1 不同繼代培養(yǎng)周期內(nèi)源多胺含量的變化試驗(yàn)109
• 7.1.3.2 6-BA濃度對(duì)繼代培養(yǎng)組培苗內(nèi)源多胺含量的影響試驗(yàn)109-110
• 7.1.3.3 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源多胺含量的影響試驗(yàn)110
• 7.1.3.4 組培苗生根過(guò)程內(nèi)源多胺含量的變化試驗(yàn)110
• 7.1.4 多胺的測(cè)定110-111
• 7.1.4.1 儀器和試劑110
• 7.1.4.2 樣品提取及純化110
• 7.1.4.3 待測(cè)樣品制作110
• 7.1.4.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制作110-111
• 7.1.4.5 色譜分析條件111
• 7.1.5 統(tǒng)計(jì)分析方法111
• 7.2 結(jié)果與分析111-115
• 7.2.1 組培苗在不同繼代培養(yǎng)周期內(nèi)源多胺含量及多胺平衡的變化111-112
• 7.2.2 組培苗在一個(gè)繼代培養(yǎng)周期中內(nèi)源多胺含量及多胺平衡的變化112
• 7.2.3 6-BA濃度對(duì)繼代組培苗內(nèi)源多胺含量的影響112-113
• 7.2.4 IBA濃度對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源多胺含量的影響113-114
• 7.2.4.1 IBA對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源腐胺含量的影響113-114
• 7.2.4.2 IBA對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源亞精胺含量的影響114
• 7.2.4.3 IBA對(duì)組培苗生根過(guò)程內(nèi)源精胺含量的影響114
• 7.2.5 組培苗生根過(guò)程中內(nèi)源多胺平衡的變化114-115
• 7.3 小結(jié)與討論115-117
• 8 結(jié)論與創(chuàng)新117-120
• 8.1 結(jié)論117-118
• 8.2 創(chuàng)新點(diǎn)118-119
• 8.3 展望119-120
• 參考文獻(xiàn)120-136
• 附錄A136-138
• 附錄B138-141
• 致謝141

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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2 李紅;李永文;張義奇;寇鳳仙;周彥珍;溫秀榮;;金銀花組培工廠化生產(chǎn)與栽培管理技術(shù)[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2007年20期

3 梁小敏;羅贛豐;吳淼生;;金銀花快繁技術(shù)比較研究[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2008年32期

4 王文靜;張寶獻(xiàn);王鵬;;紅金銀花不同外植體組織培養(yǎng)直接成苗培養(yǎng)基篩選[J];北方園藝;2010年13期

5 陳明霞;張曉麗;龔玉佳;劉文英;趙喜亭;李明軍;;“金豐一號(hào)”金銀花組織培養(yǎng)技術(shù)研究[J];北方園藝;2010年23期

6 霍俊偉,睢薇,阮瑞雪;黑龍江省野生藍(lán)靛果忍冬染色體的觀察[J];中國(guó)林副特產(chǎn);2004年04期

7 張立榮,徐大慶,劉大群;SSR和ISSR分子標(biāo)記及其在植物遺傳育種研究中的應(yīng)用[J];河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2002年01期

8 詹亞光,楊傳平,金貞福,王玉成;白樺插穗生根的內(nèi)源激素和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[J];東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2001年04期

9 楊傳平,魏利,姜靜,劉桂豐,趙光儀;應(yīng)用ISSR-PCR對(duì)西伯利亞紅松19個(gè)種源的遺傳多樣性分析[J];東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年01期

10 高紅兵;王朋飛;刁紹啟;曹麗娟;;6-BA對(duì)酸櫻桃組培苗4種內(nèi)源激素質(zhì)量分?jǐn)?shù)動(dòng)態(tài)變化的影響[J];東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào);2007年07期

  本文關(guān)鍵詞：灰氈毛忍冬新品種ISSR分子標(biāo)記及組織培養(yǎng)的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：391632