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寄主miRNAs調(diào)控小麥與條銹菌互作的分子機(jī)理

發(fā)布時(shí)間:2024-01-31 00:32
  由條形柄銹菌(Puccinia striiformis f. sp. tritici)引起的小麥條銹病是世界范圍內(nèi)的一類重要?dú)鈧髡婢『。國?nèi)外研究表明,選育并合理利用抗銹品種是控制小麥條銹病最經(jīng)濟(jì)、安全、有效的措施。但是由于條銹菌毒性不斷變異,導(dǎo)致小麥品種抗性很快喪失。因此,研究小麥與病原菌互作分子機(jī)理對于開發(fā)新的持久防治病害策略具有重要意義。 小麥對條銹病的抗性分為全生育期抗性(苗期抗性)和成株期抗性。與全生育期抗性相比,成株抗性表現(xiàn)出更穩(wěn)定,更持久的特征。成株期抗性是指在遺傳背景沒有變化的情況下,植株由苗期感病轉(zhuǎn)變?yōu)槌芍昶诳共。前期轉(zhuǎn)錄組分析表明,苗期的親和互作以及成株期的非親和互作中,差異表達(dá)基因的種類及數(shù)量沒有明顯差別,只是表達(dá)強(qiáng)度和持續(xù)時(shí)間的差異導(dǎo)致了抗病性的變化,因而轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控可能在成株期抗性中發(fā)揮重要作用。miRNAs是近年來發(fā)現(xiàn)的一類在轉(zhuǎn)錄后水平通過調(diào)控靶標(biāo)基因參與植物生長發(fā)育以及抗逆脅迫等多個(gè)生理生化過程的小分子調(diào)控因子。為了明確miRNAs是否參與調(diào)控小麥成株抗條銹性,本論文首先通過深度測序,明確了具有成株期抗性小麥品種興資9104兩個(gè)生長時(shí)期(苗期和成株期...

【文章頁數(shù)】:241 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

圖1-2降解組測序原理

圖1-2降解組測序原理

年來出現(xiàn)了一種新的驗(yàn)證miRNAs祀標(biāo)基因的方法,稱之為降解組測序(DegradomeSequencing)。降解組測序的原理(圖1-2)是植物體內(nèi)絕大多數(shù)miRNAs利用剪切作用調(diào)控靴標(biāo)基因。祀標(biāo)基因經(jīng)剪切分為兩部分,5’和3’片段。其中3’剪切片段包含有自由的5’單磷酸和3....


圖2-1smallRNA在PAGE膠板上的位置

圖2-1smallRNA在PAGE膠板上的位置

圖2-1smallRNA在PAGE膠板上的位置Fig.2-1ThepositionofsmallRNAonPAGE(16)添加三倍樣品體積的預(yù)冷無水乙醇,置于-2(rc中沉淀過夜。(17) 4°C13000rpm離心15min,離心沉淀小分子RNAs。(....


圖2-7PC-442的前體結(jié)構(gòu)

圖2-7PC-442的前體結(jié)構(gòu)

中的miRNA匹配上。我們分別對不同時(shí)期數(shù)據(jù)庫中的序列進(jìn)行了進(jìn)一步的分析。在沒有核苷酸錯(cuò)配的情況下,我們將測序結(jié)果分別與小麥已知基因組數(shù)據(jù)庫(ftp://ftp.plantgdb.org/download/Genomes/TaGDB/TAbacl75.bz2)進(jìn)行了比對。在....


圖2-10利用microarray鑒定參與成株期興資應(yīng)答條繡菌反應(yīng)的miRNAsFig.2-10IdentificationofnovelmiRNAsinadultXingzi9104responsetoPstbymicroarrayA:control;B:test

圖2-10利用microarray鑒定參與成株期興資應(yīng)答條繡菌反應(yīng)的miRNAsFig.2-10IdentificationofnovelmiRNAsinadultXingzi9104responsetoPstbymicroarrayA:control;B:test

為了進(jìn)一步驗(yàn)證參與成株期抗性的miRNAs,我們利用microarray技術(shù),分析了420個(gè)小麥特異的miRNA在成株期對照和接種24小時(shí)后的表達(dá)情況。如圖2-10所示,夕卜參基因(MC1-3)表達(dá)穩(wěn)定,說明該系統(tǒng)可以用于分析miRNAs的表達(dá)。另外,大部分探針未雜交產(chǎn)生信號,....



本文編號:3890638

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