大豆是世界上重要經(jīng)濟(jì)農(nóng)作物,大豆疫霉（Phytophthora sojae）侵染大豆而引起幼苗猝死和成株的根腐病是世界大豆生產(chǎn)上的主要病害之一,每年給世界的大豆產(chǎn)業(yè)帶來巨額經(jīng)濟(jì)損失。大豆疫霉通過感受性激素、外界溫度、濕度及條件的變化而進(jìn)入不同的生活周期,在侵染寄主的過程中通過感知寄主而分泌大量的降解酶、壞死蛋白、蛋白酶抑制劑等效應(yīng)因子以達(dá)到成功侵染寄主的目的,因此研究大豆疫霉如何感受外界的信息及信號傳導(dǎo)機(jī)制、效應(yīng)因子的分泌機(jī)制可以為防止病害的發(fā)生和擴(kuò)展提供理論依據(jù)。但由于傳統(tǒng)的、在其他生物中運(yùn)用成熟的基因敲除等分子遺傳操作技術(shù)不能運(yùn)用在大豆疫霉中,因此對大豆疫霉的生長發(fā)育規(guī)律及致病性機(jī)理了解的相對較少。隨著大豆疫霉全基因組數(shù)據(jù)、轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)的不斷公布及完善,開發(fā)一種快捷、易操作、高通量的基因功能研究技術(shù)平臺就顯得尤為重要。大豆疫霉中利用雙鏈RNA（dsRNA）介導(dǎo)的基因沉默。dsRNA介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄后基因沉默在真核生物中是普遍存在并且非常保守的一種降解靶標(biāo)基因的機(jī)制。本研究將體外合成的dsRNA通過PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)轉(zhuǎn)化方法轉(zhuǎn)入大豆疫霉中從而介導(dǎo)目的基因的瞬時(shí)沉默,該技術(shù)不僅能利用單個(gè)dsR... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：170 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

圖I-3真菌GPGR的分類及結(jié)合的配基(XueeYal.,2008)

論文大豆疫霉GPCR一PIPKs基因家族及PsYKT6的功能分析類受體;類cAMP受體;微生物視蛋白類受體(表1一1、圖1一3)。但這同樣不能包括所有真菌中的GPCR，比如稻瘟病菌中的Pthll及其同源基因只存在于子囊菌門盤菌亞門中，在子囊菌的其它亞門及擔(dān)子菌中均沒有發(fā)現(xiàn)Pthll同源基因 (Xueetal.，2008)。伴隨著更多真菌中GPCR的發(fā)現(xiàn)及功能的研究，真菌中的GPCR研究將更深入更全面。表1一l真菌中GPeR被分為六類 (xueetal.，2005)Tablel一 1SixelassesofGPCRsinfungi(Xueetal.，2008).Spec，es 5teZ一lik侖Phe泊rno能「eCePTO「Ste34紐k侖phemnlone「ee侖ptorCa由公n勺millop吐a五Ve八吐內(nèi)母爪仁AMpa仁 jdreeepto「reee瞇or「既e琳。r4ike劫iero匕i。宋opsin及￡c。戶腸亡e獷e￡忿日二C六日芯冊丫家6忍C侖倫丫二g舀日g搶23槍3Gpr了sc扮獷20冬己‘c六am介乃尹c(diǎn)e忍po個(gè)。 eMamZCa斤口‘口云a矛口獷己日介忍SteZ少吵藝tej箕:幾局印eT心公‘奈口公a汽‘Gp法Gp「日二爭e號彬邵紹冊考日翔￡Gp「CGprDGprE聲爪」7ao落eOOSC尺GO

萄糖和蔗糖結(jié)合到GPrl上 (Lemaireetal.，2004)。當(dāng)葡萄糖或蔗糖結(jié)合并活化GPrl后，激活Ga亞基御a2，GpaZ進(jìn)一步激活腺普酸環(huán)化酶，生成的cAMP后作用PKA，調(diào)控酵母細(xì)胞的營養(yǎng)生長 (Xueetal.， 1998;Kraa拓 nanetal.， 1999:Lorenzetal.，2000)(圖1一5)。在GPrl介導(dǎo)的信號傳遞途徑中，G御亞基并沒有發(fā)現(xiàn)參與某種實(shí)際的信號傳導(dǎo)。酵母作為很好的遺傳研究材料，且在GPCR及信號傳導(dǎo)途徑中的深入研究，已經(jīng)廣泛用于人類及其它物種候選GPCR的研究及其相應(yīng)配體的篩選 (Pausch，1997)。


本文編號：3360423