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青蒿腺毛發(fā)育及青蒿素生物合成相關(guān)基因TAR1的克隆與功能研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-18 18:47
  青蒿素是著名藥用植物黃花蒿(Artemisia annua L.,以下稱“青蒿”)的主要藥效物質(zhì)成分,以青蒿素為基礎(chǔ)的聯(lián)合用藥(Artemisinin-based combinationtherapies, ACTs)是治療瘧疾的特效藥。青蒿分泌型腺毛是青蒿素在原植物中合成、分泌、積累及儲(chǔ)存的場所,因此腺毛的正常發(fā)育直接關(guān)系到青蒿素的產(chǎn)量。本研究從青蒿中克隆出一個(gè)參與腺毛發(fā)育和青蒿素生物合成的關(guān)鍵基因TAR1 (TRICHOME AND ARTEMISININ REGULATOR1),并對(duì)其進(jìn)行生物信息學(xué)分析及一系列生物學(xué)功能研究,最終建立基于過表達(dá)該基因的代謝工程策略,并證明TAR1基因通過直接調(diào)控青蒿素生物合成關(guān)鍵酶ADS和CYP71AV1影響青蒿素生物合成的分子機(jī)制。進(jìn)化樹及基因序列分析顯示,TAR1為AP2/ERF類的轉(zhuǎn)錄因子,其同源基因多與蠟質(zhì)合成相關(guān)。TAR1-GFP融合蛋白的亞細(xì)胞定位結(jié)果證實(shí)TAR1定位在細(xì)胞核;凝膠阻滯電泳(EMSA)實(shí)驗(yàn)證實(shí),TAR1具有ERF亞家族所特有的功能,能夠與GCC-box結(jié)合。這些結(jié)果證明TAR1確實(shí)是一個(gè)AP2/ERF家族轉(zhuǎn)錄因子。時(shí)空... 

【文章來源】:中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學(xué)上海市 211工程院校

【文章頁數(shù)】:123 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

青蒿腺毛發(fā)育及青蒿素生物合成相關(guān)基因TAR1的克隆與功能研究


圖1-1-1?TAR/基因意圖

氨基酸序列,同源基因,物種,蛋白


SMARTdwaim;S■AP2?f-設(shè)如?’強(qiáng)削■??MGQKi?^祐?VRQftHWGSVWSE?巧?HPLLKRRVWLGTFETAEEAAKAYDEAAILMSGRNACNFPLNKKSETSPWST??TATnCTSALSTML?化化。KCCKSPSPS?打?CLRLOTESSHIGVWQKRAGIH?泌?SNWVVnVELGKNKANNEKlEGVTA?巧??G?DCSRRSSDEEDK?lALQ?W?陸?LLNTN??圖^1-2?L4K7的結(jié)構(gòu)域和氨基酸序列??(2)TAR1基因編碼的蛋白質(zhì)大小為20.22KD,蛋白等電點(diǎn)為9.1,蛋白pH值???5.1;??(3)mega3.0軟件分析結(jié)果表明,說基因在許多物種都有同源基因,包括擬??芥、玉米、水稻、克萊口袖、甜撥、當(dāng)麻、香瓜等物種,其中巧如S/fflVEj??因?yàn)轱L(fēng)欠/基因在模式植物擬南芥中的直系同源基因。劇欠7基因的進(jìn)化樹分析如???1-1-3?所7K;???3j-之?mNPOO?1148685??*

青蒿腺毛發(fā)育及青蒿素生物合成相關(guān)基因TAR1的克隆與功能研究


圖1-1-5?TA艮1蛋白H級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Computational Identification of Sweet Wormwood (Artemisia annua) microRNA and Their mRNA Targets[J]. Alok Pani,Rajani Kanta Mahapatra,Niranjan Behera,Pradeep Kumar Naik.  Genomics, Proteomics & Bioinformatics. 2011(06)
[2]我國黃花蒿中青蒿素含量的氣候適宜性等級(jí)劃分[J]. 張小波,郭蘭萍,黃璐琦.  藥學(xué)學(xué)報(bào). 2011(04)

碩士論文
[1]基于改造茉莉酸甲酯生物合成途徑的丹參次生代謝工程新策略[D]. 谷曉策.第二軍醫(yī)大學(xué) 2011
[2]利用基因工程技術(shù)提高青蒿中青蒿素含量的研究[D]. 景福遠(yuǎn).上海交通大學(xué) 2008



本文編號(hào):3350431

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