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3D打印絲素蛋白-膠原支架與ADSCs構(gòu)建組織工程脂肪的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-07-27 07:25
  目的:對(duì)3D打印法制備的絲素蛋白-膠原支架的孔徑、孔隙率、吸水溶脹率、力學(xué)性能、生物相容性、降解性進(jìn)行表征,對(duì)比3D打印與冷凍干燥法制備的支架的區(qū)別;觀察3D打印支架與ADSCs在體內(nèi)能否成功構(gòu)建組織工程脂肪。方法:1.3D打印與冷凍干燥法(FD)制備絲素蛋白-膠原支架,其絲素蛋白濃度為3.9%,膠原濃度為1.95%,二者混合比例為2:1。2.大體觀察由絲素蛋白-膠原制備的3D打印支架(實(shí)驗(yàn)組)和FD支架(對(duì)照組)的外觀,分別測(cè)量兩組支架的孔隙率、吸水溶脹率、孔徑、力學(xué)性能;分離提取脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs),將第3代ADSCs分別接種在兩種支架材料上體外培養(yǎng),使用CCK-8試劑檢測(cè)細(xì)胞在450nm波長處OD值,即支架對(duì)細(xì)胞的毒性及與細(xì)胞的生物相容性,并在培養(yǎng)14天后,對(duì)細(xì)胞-支架復(fù)合物進(jìn)行固定制樣,掃描電鏡觀察細(xì)胞在兩組支架材料上的黏附及伸展?fàn)顟B(tài)及細(xì)胞是否分泌基質(zhì)。3.將兩組ADSCs-支架復(fù)合物培養(yǎng)后植入大鼠皮下,于植入后2w、4w、6w觀察支架變化,了解兩組支架降解情況。并取植入材料做HE染色、Masson染色、免疫組織化學(xué)染色,了解炎癥反應(yīng)、纖維化程度及成脂情況。結(jié)果:1.... 

【文章來源】:蘭州大學(xué)甘肅省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:48 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

3D打印絲素蛋白-膠原支架與ADSCs構(gòu)建組織工程脂肪的實(shí)驗(yàn)研究


脂肪組織碎塊

膠原酶,脂肪組織,碎塊,后下


加入膠原酶消化離心后下層

顯微鏡下,支架,掃描電鏡觀察,支架材料


顯微鏡下 ADSCs 形態(tài)學(xué)觀察(×100)A:原代 ADSCs;B:3 天 ADSCs;C:7 天 ADSCsD:第 3 代 ADSCs Observation ofADSCs morphology by microscope(×100)A:The primaryADSCs;B:T3rd dayADSCs;C:The 7th dayADSCs;D :The 3rd generation ADSCs3D 支架材料 A:干燥支架大體外觀;B:單純支架掃描電鏡觀察 (×50);C:ADSCs-支架共培養(yǎng)后掃描電鏡觀察 (×2000)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]組織工程多孔支架的構(gòu)建方法[J]. 信更新,劉毅.  中國美容整形外科雜志. 2018(08)
[2]脂肪組織工程中生物支架材料的研究進(jìn)展[J]. 張仔昂,魯峰.  中國美容整形外科雜志. 2018(04)
[3]組織工程真皮支架材料的研究進(jìn)展[J]. 李小兵,蔣婷,彭海濤.  組織工程與重建外科雜志. 2017(02)
[4]膝關(guān)節(jié)韌帶組織工程的研究進(jìn)展[J]. 李豫皖,金瑛,熊華章,劉毅.  中國運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)雜志. 2017(03)
[5]組織工程學(xué)在泌尿外科應(yīng)用中的研究與進(jìn)展[J]. 孫恒,趙戰(zhàn)魁,孟琳,于紅蓮,孔慶勝.  中國組織工程研究. 2017(08)
[6]3D打印絲素蛋白/膠原蛋白支架的制備及性能[J]. 孫凱,李瑞欣,范猛,李軼津,董寶康,李暉.  中國組織工程研究. 2017(02)
[7]脂肪干細(xì)胞成脂分化的研究進(jìn)展[J]. 陳猶白,陳聰慧,Qixu Zhang,韓巖.  中國美容醫(yī)學(xué). 2016(04)
[8]3D打印生物材料的研究進(jìn)展[J]. 毛旭艷,侯士峰.  濟(jì)寧醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2016(01)
[9]3D打印技術(shù)及在組織工程領(lǐng)域的研究進(jìn)展[J]. 田冶,曾慶慧,胡相華,任雅清,何曉帆.  中國醫(yī)療器械信息. 2015(08)
[10]人脂肪干細(xì)胞的提取和鑒定[J]. 吳尉,梁芳,宋小琴,胡平安,劉敏.  中國組織工程研究. 2015(28)



本文編號(hào):3305368

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