本文針對當(dāng)前法醫(yī)昆蟲學(xué)中尸食性蠅類的幼期不易鑒別,以及可用于死后間隔時間推斷的日齡指標(biāo)較為缺乏之現(xiàn)狀,就尸食性蠅類幼期種類的分子鑒別與其生長發(fā)育過程中蛋白質(zhì)、糖類和脂類以及貯藏蛋白等生化特征的變化進(jìn)行了系統(tǒng)測定,進(jìn)而分析這些變化規(guī)律用于蠅類日齡推斷的可行性,獲得下列結(jié)果: 1.杭州地區(qū)常見尸食性蠅類的序列分析 通過DNA的序列測定,對杭州地區(qū)常見的六種尸食性蠅類——巨尾阿麗蠅Aldrichina grahami（Aldrich）、大頭金蠅Chrysomya megacephala（Fabricius）、絲光綠蠅Lucilia sericata（Meigen）、棕尾別麻蠅Boettchereisca peregrina（Robineau-Desvoidy）、肥須亞麻蠅Parasarcophaga crassipalpis（Macquart）、家蠅Musca domestica Linnaeus進(jìn)行分子鑒定,在六個種類間成功的擴(kuò)增到了mt DNA COⅡ基因的部分序列。DNA測序結(jié)果表明不同種類間的序列差異達(dá)到10%,而同一種類不同個體之間幾乎沒有差異,差異在1%以下。 2.雙向凝膠電泳圖... 

【文章來源】：浙江大學(xué)浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：160 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

種尸食性蠅類初孵幼蟲蛋白質(zhì)組雙向電泳圖譜

圖.224種尸食性蠅類初孵幼蟲蛋白質(zhì)組雙向電泳點的分布比較A:肥須亞麻蠅:B:巨尾阿麗蠅;C:大頭金蠅;O:棕尾別麻蠅Fig2.2ComParisonofsPotsdisrtibutionoftwo一dimensionalgelelectrophoresisfingeringmaPofrofursPeeiesofcarrion一breedingfliesneonatelvarae:A尸口尸‘心acrPoh口gaCr口，sPiarlsi;B:Adrlcihnia歲ahma幾C:Chysro陰ylame字尤Pehaal:D:OBeCttherisea尸eerg了ina

豬肉的蛆蟲體內(nèi)檢測到，而喂食了麥數(shù)的蛆蟲體內(nèi)則檢測不到相應(yīng)的目的片段。擴(kuò)增到的片純化后經(jīng)測序后，與GneBnak上相應(yīng)的序列進(jìn)行了比對，序列相似性達(dá)到97%。cytb基因不僅能在嗦囊中檢測到也能從整個蟲體中檢測到(圖3.2)。當(dāng)然圖32也表明，前者的PCR產(chǎn)物比后者的PCR產(chǎn)物更明顯。因此，在下面的試驗中我們采用嗦囊作為我們研究的對象。.22離食期后PCR檢測概率隨時間的變化非線性回歸曲線表明，隨著巨尾阿麗蠅幼蟲消化時間的延長cytb基因可檢測到的概率隨之下降(圖3.3)。在這里改進(jìn)的logistie曲線方程為:廠exp(a+b*x)/(1+exp(+ab*x))。。圖3.3表明，幾乎所有的樣品在幼蟲進(jìn)入離食期12h內(nèi)都能檢測到。而且在恒溫下，其最長可檢測的時間范圍從32℃的24h增加到16℃的42h(見圖34)。3討論昆蟲學(xué)證據(jù)不僅可以用來推斷死亡間隔時間，本文的結(jié)果表明還可以用來鑒定蠅蛆體內(nèi)的脊椎動物。Campbosos等(2005)亦認(rèn)為蛆蟲體內(nèi)的DNA檢測是適合用于檢測其食物來源的。序列測定的結(jié)果也顯示了嗦囊或者蛆蟲的PCR擴(kuò)增與宿主DNA的PCR擴(kuò)增結(jié)果是一致的，Wesll等(2001)的序列測定也與人類DNA相關(guān)靶標(biāo)序列相符。然而圖.32的結(jié)果卻告訴我們


本文編號：3023201