本文關(guān)鍵詞：Wnt基因與生物發(fā)育和腫瘤發(fā)生，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《浙江省動物學(xué)會第十二屆會員代表大會暨學(xué)術(shù)討論會論文摘要集》2013年

Dmrt5通過影響Wnt信號通路調(diào)控?zé)釒ё概咛ヮ^部的發(fā)育

趙軍芳  李政  陸怡  黃曉  

【摘要】：相似的體軸形態(tài)是脊椎動物的一個共同特征,頭尾軸建立是脊椎動物早期胚胎發(fā)育過程中體軸形態(tài)建成的一個關(guān)鍵步驟。頭尾軸的建立涉及多個環(huán)節(jié)及其復(fù)雜的分子細(xì)胞信號調(diào)控網(wǎng)絡(luò),其中Wnt信號通路在此過程中扮演重要角色。在對脊椎動物早期胚胎發(fā)育的研究中,我們發(fā)現(xiàn)Dmrt基因家族的一個成員Dmrt5可能在熱帶爪蟾胚胎頭部發(fā)育過程中發(fā)揮重要的功能。同時,基因芯片數(shù)據(jù)分析表明Dmrt5可以上調(diào)經(jīng)典WNT信號的抑制因子Cxxc4的表達。因此,我們認(rèn)為Dmrt5可能通過調(diào)控Cxxc4的表達來影響經(jīng)典WNT從而參與熱帶爪蟾早期胚胎頭部的發(fā)育。為了驗證我們的推測,我們借助生物信息學(xué)分析、基因芯片結(jié)果驗證、基因功能研究等手段對Dmrt5、Cxxc4、與經(jīng)典WNT信號通路在調(diào)控胚胎頭部發(fā)育中的關(guān)系進行了研究,具體結(jié)果如下:1.通過Morpholino反義寡核苷酸介導(dǎo)的基因功能敲落實驗發(fā)現(xiàn)Dmrt5敲落能夠引起早期胚胎頭部發(fā)育的缺陷,而這種缺陷能被Dmrt5自身所挽救,這說明上述頭部缺陷表型是由敲落Dmrt5特異引起的,因此Dmrt5可能在頭部的發(fā)育中發(fā)揮著重要作用。2.通過雙體軸試驗,我們發(fā)現(xiàn)了Dmrt5對β-catenin過表達引起胚胎的雙體軸具有明顯的抑制作用,說明Dmrt5可以抑制經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路。3.通過動物帽半定量RT-PCR檢測、表達模式分析、Cxxc4能對Dmrt5敲落引起的頭部缺失表型進行挽救,證明Dmrt5能調(diào)控經(jīng)典Wnt/β-catenin信號通路的抑制因子Cxxc4在頭部的表達從而影響胚胎頭部的發(fā)育。4.通過生物信息學(xué)分析,發(fā)現(xiàn)Cxxc4啟動子中含有Dmrt5蛋白的潛在結(jié)合基序。同時,借助啟動子活性分析、雙熒光報告等實驗驗證證明了Dmrt5能夠上調(diào)Cxxc4啟動子的活性,暗示Dmrt5可能直接調(diào)控Cxxc4的表達。綜上所述,本研究發(fā)現(xiàn)Dmrt5可能是通過直接調(diào)控Cxxc4的表達從而抑制Wnt/β-catenin信號來影響熱帶爪蟾早期胚胎頭部的發(fā)育,這為進一步認(rèn)識脊椎動物頭部發(fā)育的分子細(xì)胞機理和參與頭部發(fā)育的信號調(diào)控網(wǎng)絡(luò)提供了有價值的信息。

【作者單位】：
【分類號】：Q954
【正文快照】：

Dmrt5通過影響Wnt信號通路調(diào)控?zé)釒ё概咛ヮ^部的發(fā)育@趙軍芳$浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞與發(fā)育生物學(xué)研究所!杭州,310058 @李政$浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞與發(fā)育生物學(xué)研究所!杭州,310058 @陸怡$浙江大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院細(xì)胞與發(fā)育生物學(xué)研究所!杭州,310058 @黃曉$浙江大

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