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發(fā)酵過(guò)程中環(huán)境因素對(duì)菌體生長(zhǎng)的影響

發(fā)布時(shí)間:2015-03-29 07:25
        
    在發(fā)酵過(guò)程中,影響菌體生長(zhǎng)(注意是生長(zhǎng),不是產(chǎn)酸,關(guān)于產(chǎn)酸以后在整理發(fā)上來(lái))因素不外乎溫度、滲透壓、PH值,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)(主要是糖液質(zhì)量,本篇尚未論述),通氧量,準(zhǔn)確的說(shuō)是溶氧(DO)及無(wú)機(jī)鹽。實(shí)際上找到的這篇文章不僅僅是從發(fā)酵角度來(lái)講的,而是從整個(gè)微生物生長(zhǎng)的角度來(lái)講的,所以這個(gè)文章名字起的有點(diǎn)大哈,嘿嘿,不過(guò)干發(fā)酵的,了解一下還是不錯(cuò)的。先申明一下,不是我原創(chuàng)的。

    關(guān)鍵詞:發(fā)酵過(guò)程,環(huán)境因素,菌體生長(zhǎng)影響,微生物生長(zhǎng)條件論文
 
    影響微生物生長(zhǎng)的外界因素很多,其一是前面討論過(guò)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),其二是許多物理、化學(xué)因素。當(dāng)環(huán)境條件的改變,在一定限度內(nèi),可引起微生物形態(tài)、生理、生長(zhǎng)、繁殖等特征的改變;當(dāng)環(huán)境條件的變化超過(guò)一定極限時(shí),則導(dǎo)致微生物的死亡。研究環(huán)境條件與微生物之間的相互關(guān)系,有助于了解微生物在自然界的分布與作用,也可指導(dǎo)人們?cè)谑称芳庸ぶ杏行У乜刂莆⑸锏纳顒?dòng),保證食品的安全性,延長(zhǎng)食品的貨架期。
    本節(jié)將涉及各種物理、化學(xué)因素對(duì)微生物生長(zhǎng)的抑制和致死的影響,以及在食品工業(yè)中的應(yīng)用。下面將介紹幾個(gè)有關(guān)的術(shù)語(yǔ)。
    防腐(Antisepsis):是一種抑菌措施。利用一些理化因素使物體內(nèi)外的微生物暫時(shí)處于不生長(zhǎng)繁殖但又未死亡的狀態(tài)。食品工業(yè)中常利用防腐劑防止食品變質(zhì),如面包、蛋糕和月餅的防霉劑,酸性食品用苯甲酸鈉、山梨酸鉀、山梨酸鈉防腐、或利用低溫、干燥、鹽腌和糖漬、高酸度等。
    消毒(Disinfection):是指殺死所有病原微生物的措施,可達(dá)到防止傳染病的目的。例如將物體在100℃煮沸10分鐘或60-70℃加熱30分鐘,就可達(dá)到殺死病原菌的營(yíng)養(yǎng)體,但芽孢殺不死。食品加工廠的廠房和加工工具都要進(jìn)行定期的消毒,嚴(yán)格的操作人員的手也要進(jìn)行消毒。具有消毒作用的物質(zhì)稱為消毒劑。
    滅菌(Sterilization):是指用物理或化學(xué)因子,使存在于物體中的所有生活微生物,永久性地喪失其生活力,包括耐熱的細(xì)菌芽孢。這是一種徹底的殺菌方法。
    商業(yè)滅菌(Commercialsterilization):這是從商品角度對(duì)某些食品所提出的滅菌方法。就是指食品經(jīng)過(guò)殺菌處理后,按照所規(guī)定的微生物檢驗(yàn)方法,在所檢食品中無(wú)活的微生物檢出,或者僅能檢出極少數(shù)的非病原微生物,并且它們?cè)谑称繁2剡^(guò)程中,是不可能進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖的,這種滅菌方法,就叫做商業(yè)滅菌。
    在食品工業(yè)中,常用“殺菌”這個(gè)名詞,它包括上述所稱的滅菌和消毒,如牛奶的殺菌是指消毒;罐藏食品的殺菌,是指商業(yè)滅菌。
    無(wú)菌(Asepsis:即沒(méi)有活的微生物存在的意思。例如,發(fā)酵工業(yè)中菌種制備的無(wú)菌操作技術(shù)、食品加工中的無(wú)菌罐裝技術(shù)等。
    死亡(dead):是指微生物不可逆的喪失了生長(zhǎng)繁殖的能力,即使再放到合適的環(huán)境中也不再繁殖。
    由于不同微生物的生物學(xué)特性不同,因此,對(duì)各種理化因子的敏感性不同;同一因素不同劑量對(duì)微生物的效應(yīng)也不同,或者起滅菌作用,或者起防腐作用。在了解和應(yīng)用任何一種理化因素對(duì)微生物的抑制或致死作用時(shí),還應(yīng)考慮多種因素的綜合效應(yīng)。
    1、溫度
    溫度是影響微生物生長(zhǎng)繁殖最重要的因素之一。在一定溫度范圍內(nèi),機(jī)體的代謝活動(dòng)與生長(zhǎng)繁殖隨著溫度的上升而增加,當(dāng)溫度上升到一定程度,開始對(duì)機(jī)體產(chǎn)生不利的影響,如再繼續(xù)升高,則細(xì)胞功能急劇下降以至死亡。
    與其他生物一樣,任何微生物的生長(zhǎng)溫度盡管有高有低,但總有最低生長(zhǎng)溫度、最適生長(zhǎng)溫度和最高生長(zhǎng)溫度這三個(gè)重要指標(biāo),這就是生長(zhǎng)溫度的三個(gè)基本點(diǎn)。如果將微生物作為一個(gè)整體來(lái)看,它的溫度三基點(diǎn)是極其寬的,由以下可看出:
    最低生長(zhǎng)溫度(一般為–5~–10℃,極端為–30℃)
    嗜冷菌
    生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)最適生長(zhǎng)溫度中溫菌
    嗜熱菌
    最高生長(zhǎng)溫度(一般為80~95℃,極端為105~300℃)
    就總體而言,微生物生長(zhǎng)的溫度范圍較廣,已知的微生物在零下12~100℃均可生長(zhǎng)。而每一種微生物只能在一定的溫度范圍內(nèi)生長(zhǎng)。
    最低生長(zhǎng)溫度是指微生物能進(jìn)行繁殖的最低溫度界限。處于這種溫度條件下的微生物生長(zhǎng)速率很低,如果低于此溫度則生長(zhǎng)完全停止。不同微生物的最低生長(zhǎng)溫度不一樣,這與它們的原生質(zhì)物理狀態(tài)和化學(xué)組成有關(guān)系,也可隨環(huán)境條件而變化。
    最適生長(zhǎng)溫度是指某菌分裂代時(shí)最短或生長(zhǎng)速率最高時(shí)的培養(yǎng)溫度。但是,同一微生物,不同的生理生化過(guò)程有著不同的最適溫度,也就是說(shuō),最適生長(zhǎng)溫度并不等于生長(zhǎng)量最高時(shí)的培養(yǎng)溫度,也不等于發(fā)酵速度最高時(shí)的培養(yǎng)溫度或累積代謝產(chǎn)物量最高時(shí)的培養(yǎng)溫度,更不等于累積某一代謝產(chǎn)物量最高時(shí)的培養(yǎng)溫度。因此,生產(chǎn)上要根據(jù)微生物不同生理代謝過(guò)程溫度的特點(diǎn),采用分段式變溫培養(yǎng)或發(fā)酵。例如,嗜熱鏈球菌的最適生長(zhǎng)溫度為37℃,最適發(fā)酵溫度為47℃,累積產(chǎn)物的最適溫度為37℃。
    最高生長(zhǎng)溫度是指微生物生長(zhǎng)繁殖的最高溫度界限。在此溫度下,微生物細(xì)胞易于衰老和死亡。微生物所能適應(yīng)的最高生長(zhǎng)溫度與其細(xì)胞內(nèi)酶的性質(zhì)有關(guān)。例如細(xì)胞色素氧化酶以及各種脫氫酶的最低破壞溫度常與該菌的最高生長(zhǎng)溫度有關(guān)。見表4-3
    表4-3細(xì)胞色素氧化酶以及各種脫氫酶的最低破壞溫度與該菌最高生長(zhǎng)溫度的關(guān)系
    細(xì)菌最高生長(zhǎng)溫度(℃)最低破壞溫度(℃)
    細(xì)胞色素氧化酶過(guò)氧化氫酶琥酸珀脫氫酶
    蕈狀芽孢桿菌40414140
    單純芽孢桿菌
    43555240
    蠟狀芽孢桿菌
    45484650
    巨大芽孢桿菌
    46485047
    枯草芽孢桿菌
    54605651
    嗜熱芽孢桿菌
    67656759
    致死溫度最高生長(zhǎng)溫度如進(jìn)一步升高,便可殺死微生物。這種致死微生物的最低溫度界限即為致死溫度。致死溫度與處理時(shí)間有關(guān)。在一定的溫度下處理時(shí)間越長(zhǎng),死亡率越高。嚴(yán)格地說(shuō),一般應(yīng)以10分鐘為標(biāo)準(zhǔn)時(shí)間。細(xì)菌在10分鐘被完全殺死的最低溫度稱為致死溫度。測(cè)定微生物的致死溫度一般在生理鹽水中進(jìn)行,以減少有機(jī)物質(zhì)的干擾。
    微生物按其生長(zhǎng)溫度范圍可分為低溫微生物、中溫微生物和高溫微生物三類(表4-4)
    表4-4不同溫型微生物的生長(zhǎng)溫度范圍
    微生物類型生長(zhǎng)溫度范圍(℃)分布的主要處所
    最低最適最高
    低溫型專性嗜冷–125—1515—20兩極地區(qū)
    兼性嗜冷–5—010—2025—30海水及冷藏食品上
    中溫型室溫10—2020—3535—4040—45腐生菌
    體溫寄生菌
    高溫型25—4550—6070—95溫泉、堆肥、土壤表層等
    1.1、低溫型的微生物
    又稱嗜冷微生物,可在較低的溫度下生長(zhǎng)。它們常分布在地球兩極地區(qū)的水域和土壤中,即使在其微小的液態(tài)水間歇中也有微生物的存在。常見的產(chǎn)堿桿菌屬、假單胞菌屬、黃桿菌屬、微球菌屬等常使冷藏食品腐敗變質(zhì)。有些肉類上的霉菌在零下10℃仍能生長(zhǎng),如芽枝霉;熒光極毛菌可在零下4℃生長(zhǎng),并造成冷凍食品變質(zhì)腐敗。
    低溫也能抑制微生物的生長(zhǎng)。在0℃以下,菌體內(nèi)的水分凍結(jié),生化反應(yīng)無(wú)法進(jìn)行而停止生長(zhǎng)。有些微生物在冰點(diǎn)下就會(huì)死亡,主要原因是細(xì)胞內(nèi)水分變成了冰晶,造成細(xì)胞脫水或細(xì)胞膜的物理?yè)p傷。因此,生產(chǎn)上常用低溫保藏食品,各種食品的保藏溫度不同,分為寒冷溫度、冷藏溫度和凍藏溫度。
    1.2、中溫型的微生物
    絕大多數(shù)微生物屬于這一類。最適生長(zhǎng)溫度在20~40℃之間,最低生長(zhǎng)溫度10~20℃,最高生長(zhǎng)溫度40~45℃。它們又可分為嗜室溫和嗜體溫性微生物。嗜體溫性微生物多為人及溫血?jiǎng)游锏牟≡,它們生長(zhǎng)的極限溫度范圍在10~45℃,最適生長(zhǎng)溫度與其宿主體溫相近,在35~40℃之間,人體寄生菌為37℃左右。引起人和動(dòng)物疾病的病原微生物、發(fā)酵工業(yè)應(yīng)用的微生物菌種以及導(dǎo)致食品原料和成品腐敗變質(zhì)的微生物,都屬于這一類群的微生物。因此,它與食品工業(yè)的關(guān)系密切。
    1.3、高溫型微生物
    它們適于在45~50℃以上的溫度中生長(zhǎng),在自然界中的分布僅局限于某些地區(qū),如溫泉、日照充足的土壤表層、堆肥、發(fā)酵飼料等腐爛有機(jī)物中,如堆肥中溫度可達(dá)60~70℃。能在55~70℃中生長(zhǎng)的微生物有芽孢桿菌屬(Bacillus)、梭狀芽孢桿菌(Clostridium)、嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bac.stearothermophilus)高溫放線菌屬(Thermoactinomyces)、甲烷桿菌屬(Methanobacterium)等;溫泉中的細(xì)菌;其次是鏈球菌屬和乳桿菌屬。有的可在近于100℃的高溫中生長(zhǎng)。這類高溫型的微生物,給罐頭工業(yè)、發(fā)酵工業(yè)等帶來(lái)了一定難度。
    高溫型的微生物耐熱機(jī)理可能是菌體內(nèi)的蛋白質(zhì)和酶比中溫型的微生物更能抗熱,尤其蛋白質(zhì)對(duì)熱更穩(wěn)定;同時(shí)高溫型微生物的蛋白質(zhì)合成機(jī)構(gòu)——核糖體和其他成分對(duì)高溫抗性也較大;細(xì)胞膜中飽和脂肪酸含量高,它比不飽和脂肪酸可以形成更強(qiáng)的疏水鍵,因此可保持在高溫下的穩(wěn)定性并具正常功能。
    1.4、熱對(duì)微生物的致死作用
    如果超過(guò)了最高生長(zhǎng)溫度導(dǎo)致微生物死亡。高溫致死的機(jī)理是微生物蛋白質(zhì)和核酸不可逆的變性,或者破壞了細(xì)胞的其他成分,如細(xì)胞膜被熱溶解形成了極小的孔,使細(xì)胞內(nèi)含物泄漏引起死亡。高溫致死微生物的作用,廣泛用于醫(yī)藥衛(wèi)生、食品工業(yè)及日常生活中。在食品工業(yè)中微生物耐熱性常用以下幾個(gè)數(shù)值表示:
    (1)熱(力致)死時(shí)間(ThermalDeathTimeTDT)是指在特定的條件和特定的溫度下,殺死一定數(shù)量微生物所需要的時(shí)間,稱熱力致死時(shí)間。
    (2)D值(Decimalreductiontime)在一定溫度下加熱,活菌數(shù)減少一個(gè)對(duì)數(shù)周期(即90%的活菌被殺死)時(shí),所需要的時(shí)間(分),即為D值。測(cè)定D值時(shí)的加熱溫度,即在D的右下角表明。例如:含菌數(shù)為105/毫升的菌懸液,在100℃的水浴溫度中,活菌數(shù)降低至104/毫升時(shí),所需時(shí)間為10分,該菌的D值即為10分,即D100=10分。如果加熱的溫度為121.1℃(250℉),其D常用Dr表示。見圖4-4。
    (3)Z值如果在加熱致死曲線中,時(shí)間降低一個(gè)對(duì)數(shù)周期(即縮短90%的加熱時(shí)間)
    所需要升高的溫度(℃),這所需要升高的溫度數(shù),即為Z值。見圖4-5。
    (4)F值在一定的基質(zhì)中,其溫度為121.1℃,加熱殺死一定數(shù)量微生物所需要的時(shí)間(分),即為F值。
    1.5、影響微生物對(duì)熱抵抗力的因素
    ⑴菌種不同微生物由于細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生物學(xué)特性不同,對(duì)熱的抵抗力也不同。一般的規(guī)律是嗜熱菌的抗熱力大于嗜溫菌和嗜冷菌,芽孢大于非芽孢菌,球菌大于非芽孢桿菌,革蘭氏陽(yáng)性菌大于革蘭氏陰性菌,霉菌大于酵母菌,霉菌和酵母的孢子大于其菌絲體。細(xì)菌的芽孢和霉菌的菌核抗熱力特別大。
    ⑵菌齡同樣的條件下,對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌體抗熱力較差,而穩(wěn)定期的老齡細(xì)胞較大,老齡的細(xì)菌芽孢較幼齡的細(xì)菌芽孢抗熱力強(qiáng)。
    ⑶菌體數(shù)量菌數(shù)愈多,抗熱力愈強(qiáng),因加熱殺死最后一個(gè)微生物所需的時(shí)間也長(zhǎng);另外,微生物群集在一起時(shí),受熱致死不是時(shí)間而是有先有后,同時(shí)菌體能分泌一些有保護(hù)作用的蛋白質(zhì)物質(zhì),菌多分泌的保護(hù)物質(zhì)也多,抗熱性也就強(qiáng)。
    ⑷基質(zhì)的因素微生物的抗熱力隨含水量減少而增大,同一種微生物在干熱環(huán)境中比在濕熱環(huán)境中抗熱力大;基質(zhì)中的脂肪、糖、蛋白質(zhì)等物質(zhì)對(duì)微生物有保護(hù)作用,微生物的抗熱力隨這類物質(zhì)的增多而增大;微生物在pH值范圍是7左右,抗熱力最強(qiáng),pH值升高或下降都可以減少微生物的抗熱力。特別是酸性環(huán)境微生物的抗熱力減弱更明顯。
    ⑸加熱的溫度和時(shí)間加熱的溫度越高,微生物的抗熱力越弱,越容易死亡,加熱的時(shí)間越長(zhǎng),熱致死作用越大。在一定高溫范圍內(nèi),溫度越高殺死所需時(shí)間越短。另外,其他因素如鹽類等,在基質(zhì)中有降低水分活性作用,從而增強(qiáng)抗熱力;而另一類鹽類如鈣鹽、鎂鹽可減弱微生物對(duì)熱的抵抗力。
    食品工業(yè)中常用的滅菌方法較多,大的分類為干熱滅菌法和濕熱滅菌法,濕熱滅菌法主要是通過(guò)熱蒸汽殺死微生物,由于熱蒸汽的穿透力較熱空氣強(qiáng),故無(wú)論是對(duì)芽孢桿菌或無(wú)芽孢桿菌在同一溫度下效果都比干熱法好。
    1.6、熱滅菌法
    ⑴干熱滅菌法
    ①火焰滅菌法其特點(diǎn)是滅菌快速、徹底。常用于接種工具和污染物品,如微生物接種時(shí)使用的接種環(huán),就是用火焰滅菌法。使用范圍受限。
    ②干熱滅菌法(dryheatsterilization)主要在干燥箱中利用熱空氣進(jìn)行滅菌。通常160℃處理1~2小時(shí)可達(dá)到滅菌的目的。適用于玻璃器皿、金屬用具等耐熱物品的滅菌。
    ⑵濕熱滅菌(moistheatsterilization)
    ①煮沸消毒法物品在水中100℃煮沸15分鐘以上,可殺死細(xì)菌的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和部分芽孢,如在水中加入1%碳酸鈉或2%~5%石炭酸,則效果更好。這種方法適用于注射器、解剖用具等的消毒。
    ②巴氏滅菌(pasteurization)滅菌的溫度一般在60~85℃處理15~30分鐘,可以殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞,但不能達(dá)到完全滅菌的目的,用于不適于高溫滅菌的食品,如牛乳、醬腌菜類、果汁、啤酒、果酒和蜂蜜等,其主要目的是殺死其中無(wú)芽孢的病原菌(如牛奶中的結(jié)核桿菌或沙門氏桿菌),而又不影響它們的風(fēng)味。
    ③超高溫瞬時(shí)滅菌法Ultrahightemperatureshorttime,UHT)滅菌的溫度在135~137℃3~5秒,可殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞和耐熱性強(qiáng)的芽孢細(xì)菌,但污染嚴(yán)重的鮮乳在142℃以上殺菌效果才好。超高溫瞬時(shí)滅菌法現(xiàn)廣泛用于各種果汁、牛乳、花生乳、醬油等液態(tài)食品的殺菌。
    ④高壓蒸汽滅菌法(normalautoclaving)高壓蒸汽滅菌法是實(shí)驗(yàn)室和罐頭工業(yè)中常用的滅菌方法。高壓蒸汽滅菌是在高壓蒸汽鍋內(nèi)進(jìn)行的,鍋有立式和臥式兩種,原理相同,鍋內(nèi)蒸汽壓力升高時(shí),溫度升高。一般采用9.8×104Pa的壓力,121.1℃處理15~30分鐘,也有采用較低溫度(115℃)下維持30分鐘左右,可達(dá)殺菌目的。罐頭工業(yè)中要根據(jù)食品的種類和殺菌的對(duì)象、罐裝量的多少等決定殺菌式。實(shí)驗(yàn)室常用于培養(yǎng)基、各種緩沖液、玻璃器皿及工作服等滅菌。
    ⑤間歇滅菌法(fractionalsterilization或tyndallization)是用流通蒸汽反復(fù)滅菌的方法,常常溫度不超過(guò)100℃,每日一次,加熱時(shí)間為30分鐘,連續(xù)三次滅菌,殺死微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞。每次滅菌后,將滅菌的物品在(28~37℃)培養(yǎng),促使芽孢發(fā)育成為繁殖體,以便在連續(xù)滅菌中將其殺死。
    2、干燥
    水分對(duì)維持微生物的正常生命活動(dòng)是必不可少的。干燥會(huì)造成微生物失水代謝停止以至死亡。不同的微生物對(duì)干燥的抵抗力是不一樣的,以細(xì)菌的芽孢抵抗力最強(qiáng),霉菌和酵母菌的孢子也具較強(qiáng)的抵抗力,依次為革蘭氏陽(yáng)性球菌、酵母的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞、霉菌的菌絲。影響微生物對(duì)干燥抵抗力的因素較多,干燥時(shí)溫度升高,微生物容易死亡,微生物在低溫下干燥時(shí),抵抗力強(qiáng),所以,干燥后存活的微生物若處于低溫下,可用于保藏菌種;干燥的速度快,微生物抵抗力強(qiáng),緩慢干燥時(shí),微生物死亡多;微生物在真空干燥時(shí),在加保護(hù)劑(血清、血漿、肉湯、蛋白胨、脫脂牛乳)于菌懸液中,分裝在安瓿內(nèi),低溫下可保持長(zhǎng)達(dá)數(shù)年甚至10年的生命力。食品工業(yè)中常用干燥方法保藏食品。
    3、滲透壓
    大多數(shù)微生物適于在等滲的環(huán)境生長(zhǎng),若置于高滲溶液(如20%NaCl)中,水將通過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞周圍的溶液中,造成細(xì)胞脫水而引起質(zhì)壁分離,使細(xì)胞不能生長(zhǎng)甚至死亡;若將微生物置于低滲溶液(如0.01%NaCl)或水中,外環(huán)境中的水從溶液進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)引起細(xì)胞膨脹,甚至破裂致死。
    一般微生物不能耐受高滲透壓,因此,食品工業(yè)中利用高濃度的鹽或糖保存食品,如腌漬蔬菜、肉類及果脯蜜餞等,糖的濃度通常在50%~70%,鹽的濃度為5%~15%,由于鹽的分子量小,并能電離,在二者百分濃度相等的情況下,鹽的保存效果優(yōu)于糖。
    有些微生物耐高滲透壓的能力較強(qiáng),如發(fā)酵工業(yè)中魯氏酵母,另外嗜鹽微生物(如生活在含鹽量高的海水、死海中)可在15%~30%的鹽溶液中生長(zhǎng)。
    4、輻射
    電磁輻射包括可見光、紅外線、紫外線、X射線和γ射線等均具有殺菌作用。在輻射能中無(wú)線電波最長(zhǎng),對(duì)生物效應(yīng)最弱;紅外輻射波長(zhǎng)在800~1000納米,可被光合細(xì)菌作為能源;可見光部分的波長(zhǎng)為380~760納米,是藍(lán)細(xì)菌等藻類進(jìn)行光合作用的主要能源;紫外輻射的波長(zhǎng)為136~400納米,有殺菌作用。可見光、紅外輻射和紫外輻射的最強(qiáng)來(lái)源是太陽(yáng),由于大氣層的吸收,紫外輻射與紅外輻射不能全部達(dá)到地面;而波長(zhǎng)更短的X射線、γ射線、β射線和α射線(由放射性物質(zhì)產(chǎn)生),往往引起水與其他物質(zhì)的電離,對(duì)微生物起有害作用,故被作為一種滅菌措施。
    紫外線波長(zhǎng)以265~266納米的殺菌力最強(qiáng),其殺菌機(jī)理是復(fù)雜的,細(xì)胞原生質(zhì)中的核酸及其堿基對(duì)紫外線吸收能力強(qiáng),吸收峰為260納米,而蛋白質(zhì)的吸收峰為280納米,當(dāng)這些輻射能作用于核酸時(shí),便能引起核酸的變化,破壞分子結(jié)構(gòu),主要是對(duì)DNA的作用,最明顯的是形成胸腺嘧啶二聚體,妨礙蛋白質(zhì)和酶的合成,引起細(xì)胞死亡。
    紫外線的殺菌效果,因菌種及生理狀態(tài)而異,照射時(shí)間、距離和劑量的大小也有影響,由于紫外線的穿透能力差,不易透過(guò)不透明的物質(zhì),即使一薄層玻璃也會(huì)被濾掉大部分,在食品工業(yè)中適于廠房?jī)?nèi)空氣及物體表面消毒,也有用于飲用水消毒的。
    適量的紫外線照射,可引起微生物的核酸物質(zhì)DNA結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,培育新性狀的菌種。因此,紫外線常常作為誘變劑用于育種工作中。
    5、pH
    微生物生長(zhǎng)的pH值范圍極廣,一般在pH2~8之間,有少數(shù)種類還可超出這一范圍,事實(shí)上,絕大多數(shù)種類都生長(zhǎng)在pH5~9之間。
    不同的微生物都有其最適生長(zhǎng)pH值和一定的pH范圍,即最高、最適與最低三個(gè)數(shù)值,在最適pH范圍內(nèi)微生物生長(zhǎng)繁殖速度快,在最低或最高pH值的環(huán)境中,微生物雖然能生存和生長(zhǎng),但生長(zhǎng)非常緩慢而且容易死亡。一般霉菌能適應(yīng)pH值范圍最大,酵母菌適應(yīng)的范圍較小,細(xì)菌最小。霉菌和酵母菌生長(zhǎng)最適pH值都在5~6,而細(xì)菌的生長(zhǎng)最適pH值在7左右。一些最適生長(zhǎng)pH值偏于堿性范圍內(nèi)微生物,有的是嗜堿性,稱嗜堿性微生物(basophile),如硝化菌、尿素分解菌、根瘤菌和放線菌等;有的不一定要在堿性條件下生活,但能耐較堿的條件,稱耐堿微生物(basotolerantmicroorganism),如若干鏈霉菌等。生長(zhǎng)pH值偏于酸性范圍內(nèi)的微生物也有兩類,一類是嗜酸微生物(acidophile),如硫桿菌屬等,另一類是耐酸微生物(acidotolerantmicroorganism),如乳酸桿菌、醋酸桿菌、許多腸桿菌和假單胞菌等。見表4—5:
    不同的微生物有其最適的生長(zhǎng)pH值范圍,同一微生物在其不同的生長(zhǎng)階段和不同的生理、生化過(guò)程中,也要求不同的最適pH值,這對(duì)發(fā)酵工業(yè)中pH值的控制、積累代謝產(chǎn)物特別重要。例如,黑曲霉最適生長(zhǎng)pH值為5.0~6.0,在pH2.0~2.5范圍有利于產(chǎn)擰檬酸,在pH7.0左右時(shí),則以合成草酸為主。又如丙酮丁醇梭菌的最適生長(zhǎng)繁殖的pH值為5.5~7.0范圍內(nèi),在pH值4.3~5.3范圍內(nèi)發(fā)酵生產(chǎn)丙酮丁醇,抗生素生產(chǎn)菌也是最適生長(zhǎng)的pH值與最適發(fā)酵的pH值不一致。
    表4—5不同微生物生長(zhǎng)的pH范圍
    微生物PH
    最低最適最高
    乳桿菌4.86.27.0
    嗜酸乳桿菌4.0~4.65.8~6.66.8
    金黃色葡萄球菌4.27.0~7.59.3
    大腸桿菌4.36.0~8.09.5
    傷寒沙門氏菌4.06.8~7.29.6
    放線菌5.07.0~8.01.0
    一般酵母菌3.05.0~6.08.0
    黑曲霉1.55.0~6.09.0
    大豆根瘤菌4.26.8~7.011.0
    微生物在其代謝過(guò)程中,細(xì)胞內(nèi)的pH值相當(dāng)穩(wěn)定,一般都接近中性,保護(hù)了核酸不被破壞和酶的活性;但微生物會(huì)改變環(huán)境的酸堿度,即是使培養(yǎng)基的原始pH值變化,發(fā)生的原因1)糖類和脂肪代謝產(chǎn)酸,2)蛋白質(zhì)代謝產(chǎn)堿,以及其他物質(zhì)代謝產(chǎn)生酸堿。一般隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),培養(yǎng)基會(huì)變得較酸,當(dāng)碳氮比例高的培養(yǎng)基,如培養(yǎng)真菌的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后其pH值常會(huì)明顯下降,而碳氮比例低的培養(yǎng)基,如培養(yǎng)一般細(xì)菌的培養(yǎng)基,經(jīng)培養(yǎng)后,其pH值常會(huì)明顯上升。
    在發(fā)酵工業(yè)中,及時(shí)地調(diào)整發(fā)酵液的pH值,有利于積累代謝產(chǎn)物是生產(chǎn)中一項(xiàng)重要措施,方法如下:
    加適當(dāng)?shù)矗喝缒蛩、硝酸鈉、NH4OH或蛋白質(zhì)
    “治本”加適當(dāng)碳源:糖、乳酸、油脂等
    pH調(diào)節(jié)措施
    過(guò)酸時(shí):加氫氧化鈉、碳酸鈉等堿中和
    “治標(biāo)”
    過(guò)堿時(shí):加硫酸、鹽酸等酸中和
    強(qiáng)酸強(qiáng)堿都具有殺菌力。1)強(qiáng)酸如硫酸、鹽酸殺菌力強(qiáng),但腐蝕性大,因此,生產(chǎn)上不宜作消毒劑。食品中應(yīng)用的酸類防腐劑常常是有機(jī)酸或有機(jī)酸鹽類,要求對(duì)人體是無(wú)毒,并且不影響食品應(yīng)有的風(fēng)味,加入的量應(yīng)嚴(yán)格按國(guó)標(biāo)執(zhí)行。2)強(qiáng)堿濃度越高殺菌力越強(qiáng),食品工業(yè)中常用石灰水、氫氧化鈉、碳酸鈉等作為環(huán)境、加工設(shè)備、冷藏庫(kù)以及包裝材料如啤酒玻瓶等的滅菌。
    食品工業(yè)中常用的酸類防腐劑有苯甲酸或苯甲酸鈉、山梨酸或山梨酸鉀鹽(山梨酸鈉鹽)、丙酸及其鈣鹽或鈉鹽、脫氫醋酸及其鈉鹽和乳酸等。
    6、氧氣
    氧氣對(duì)微生物的生命活動(dòng)有著重要影響。按照微生物與氧氣的關(guān)系,可把它們分成好氧菌(aerobe)和厭氧菌(anaerobe)兩大類。好氧菌中又分為專性好氧、兼性厭氧和微好氧菌;厭氧菌分為專性厭氧菌、耐氧菌。
    6.1專性好氧菌(strictaerobe)
    要求必須在有分子氧的條件下才能生長(zhǎng),有完整的呼吸鏈,以分子氧作為最終氫受體,細(xì)胞有超氧化物歧化酶(SOD,superoxidedismutase)和過(guò)氧化氫酶,絕大多數(shù)真菌和許多細(xì)菌都是專性好氧菌,如米曲霉、醋酸桿菌、熒光假單胞菌、枯草芽孢桿菌和蕈狀芽孢桿菌等。
    6.2兼性厭氧菌(facultativeaerobe)
    在有氧或無(wú)氧條件下都能生長(zhǎng),但有氧的情況下生長(zhǎng)得更好;有氧時(shí)進(jìn)行呼吸產(chǎn)能,無(wú)氧時(shí)進(jìn)行發(fā)酵或無(wú)氧呼吸產(chǎn)能;細(xì)胞含SOD和過(guò)氧化氫酶。許多酵母菌和許多細(xì)菌都是兼性厭氧菌。例如釀酒酵母、大腸桿菌和普通變形桿菌等。
    6.3微好氧菌(microaerophilicbacteria)
    只能在較低的養(yǎng)分壓(0.01~0.03巴,正常大氣壓為0.2巴)下才能正常生長(zhǎng)的微生物。也通過(guò)呼吸鏈以氧為最終氫受體而產(chǎn)能。例如霍亂弧菌、一些氫單胞菌、擬桿菌屬和發(fā)酵單胞菌屬。
    6.4耐氧性厭氧菌(aerotolerantanaerobe)
    一類可在分子氧存在時(shí)進(jìn)行厭氧呼吸的厭氧菌,即它們的生長(zhǎng)不需要氧,但分子氧存在對(duì)它也無(wú)毒害。它們不具有呼吸鏈,僅依靠專性發(fā)酵獲得能量。細(xì)胞內(nèi)存在SOD和過(guò)氧化物酶,但沒(méi)有過(guò)氧化氫酶。一般乳酸菌多數(shù)是耐氧菌,如乳鏈球菌、乳酸乳桿菌、腸膜明串珠菌和糞鏈球菌等,乳酸菌以外的耐氧菌如雷氏丁酸桿菌。
    6.5厭氧菌(anaerobe)
    厭氧菌的特征是:分子氧存在對(duì)它們有毒,即使是短期接觸空氣,也會(huì)抑制其生長(zhǎng)甚至死亡;在空氣或含10%CO2的空氣中,它們?cè)诠腆w或半固體培養(yǎng)基的表面上不能生長(zhǎng),只能在深層無(wú)氧或低氧化還原勢(shì)的環(huán)境下才能生長(zhǎng);其生命活動(dòng)所需能量是通過(guò)發(fā)酵、無(wú)氧呼吸、循環(huán)光合磷酸化或甲烷發(fā)酵等提供;細(xì)胞內(nèi)缺乏SOD和細(xì)胞色素氧化酶,大多數(shù)還缺乏過(guò)氧化氫酶。常見的厭氧菌有罐頭工業(yè)的腐敗菌如肉毒梭狀芽孢桿菌、嗜熱梭狀芽孢桿菌、擬桿菌屬、雙歧桿菌屬以及各種光和細(xì)菌和產(chǎn)甲烷菌等。見圖4—6。
    一般絕大多數(shù)微生物都是好氧菌或兼性厭氧菌。厭氧菌的種類相對(duì)較少,但近年來(lái)已發(fā)現(xiàn)越來(lái)越多的厭氧菌。
    關(guān)于厭氧菌的氧毒害機(jī)理曾有學(xué)者提出過(guò),直到1971年在提出SOD的學(xué)說(shuō)后,有了進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。他們認(rèn)為,厭氧菌缺乏SOD,因此易被生物體內(nèi)產(chǎn)生的超氧物陰離子自由基毒害致死。
    7、超聲波
    超聲波(頻率在20000赫茲以上)具有強(qiáng)烈的生物學(xué)作用。超聲波使微生物致死的機(jī)理是引起微生物細(xì)胞破裂,內(nèi)含物溢出而死。超聲波作用的效果與頻率、處理時(shí)間、微生物種類、細(xì)胞大小、形狀及數(shù)量等有關(guān)系,一般頻率高比頻率低殺菌效果好,病毒和細(xì)菌芽孢具有較強(qiáng)的抗性,特別是芽孢。
    8、化學(xué)消毒劑
    8.1重金屬鹽類
    重金屬鹽類對(duì)微生物都有毒害作用,其機(jī)理是金屬離子容易和微生物的蛋白質(zhì)結(jié)合而發(fā)生變性或沉淀。汞、銀、砷的離子對(duì)微生物的親和力較大,能與微生物酶蛋白的-SH基結(jié)合,影響其正常代謝。汞化合物是常用的殺菌劑,殺菌效果好,用于醫(yī)藥業(yè)中。重金屬鹽類雖然殺菌效果、。好,但對(duì)人有毒害作用,所以嚴(yán)禁用于食品工業(yè)中防腐或消毒。
    8.2有機(jī)化合物
    對(duì)微生物有殺菌作用的有機(jī)化合物種類很多,其中酚、醇、醛等能使蛋白質(zhì)變性,是常用的殺菌劑。
    ⑴酚及其衍生物
    酚又稱石炭酸,殺菌作用是使微生物蛋白質(zhì)變性,并具有表面活性劑作用,破壞細(xì)胞膜的通透性,使細(xì)胞內(nèi)含物外溢致死。酚濃度低時(shí)有抑菌作用,濃度高時(shí)有殺菌作用,2%~5%酚溶液能在短時(shí)間內(nèi)殺死細(xì)菌的繁殖體,殺死芽孢則需要數(shù)小時(shí)或更長(zhǎng)的時(shí)間。許多病毒和真菌孢子對(duì)酚有抵抗力。適用于醫(yī)院的環(huán)境消毒,不適于食品加工用具以及食品生產(chǎn)場(chǎng)所的消毒。
    ⑵醇類
    是脫水劑、蛋白質(zhì)變性劑,也是脂溶劑,可使蛋白質(zhì)脫水、變性,損害細(xì)胞膜而具殺菌能力。70%的乙醇?xì)⒕Ч詈,超過(guò)70%濃度的乙醇?xì)⒕Ч^差,其原因是高濃度的乙醇與菌體接觸后迅速脫水,表面蛋白質(zhì)凝固,形成了保護(hù)膜,阻止了乙醇分子進(jìn)一步滲入。
    乙醇常常用于皮膚表面消毒,實(shí)驗(yàn)室用于玻棒、玻片等用具的消毒。
    醇類物質(zhì)的殺菌力是隨著分子量的增大而增強(qiáng),但分子量大的醇類水溶性比乙醇差,因此,醇類中常常用乙醇作消毒劑。
    ⑶甲醛
    甲醛是一種常用的殺細(xì)菌與殺真菌劑,殺菌機(jī)理是與蛋白質(zhì)的氨基結(jié)合而使蛋白質(zhì)變性致死。市售的福爾馬林溶液就是37%~40%的甲醛水溶液。0.1%~0.2%的甲醛溶液可殺死細(xì)菌的繁殖體,5%的濃度可殺死細(xì)菌的芽孢。甲醛溶液可作為熏蒸消毒劑,對(duì)空氣和物體表面有消毒效果,但不適宜于食品生產(chǎn)場(chǎng)所的消毒。
    8.3氧化劑
    氧化劑殺菌的效果與作用的時(shí)間和濃度成正比關(guān)系,殺菌的機(jī)理是氧化劑放出游離氧作用于微生物蛋白質(zhì)的活性基團(tuán)(氨基、羥基和其它化學(xué)基團(tuán)),造成代謝障礙而死亡。
    ⑴臭氧(O3)
    三氧滅菌技術(shù)近年在純凈水生產(chǎn)中應(yīng)用較廣,滅菌的效果與濃度有一定的關(guān)系,但濃度大了使水產(chǎn)生異味。
    ⑵氯
    氯具有較強(qiáng)的殺菌作用,其機(jī)理是使蛋白質(zhì)變性。氯在水中能產(chǎn)生新生態(tài)的氧,如下式:
    Cl2+H2OHCl+HOCl2HCl+[O]
    氯氣常常用于城市生活用水的消毒,飲料工業(yè)用于水處理工藝中殺菌。
    ⑶漂白粉(CaOCl2)
    漂白粉中有效氯為28%~35%。當(dāng)濃度為0.5%~1%時(shí),5分鐘可殺死大多數(shù)細(xì)菌,5%的濃度時(shí)在1小時(shí)可殺死細(xì)菌芽孢。漂白粉常用于飲水消毒,也可用于蔬菜和水果的消毒。
    ⑷過(guò)氧乙酸(CH3COOOH)
    過(guò)氧乙酸是一種高效廣譜殺菌劑,它能快速地殺死細(xì)菌、酵母、霉菌和病毒。據(jù)報(bào)道,0.001%的過(guò)氧乙酸水溶液能在10分鐘內(nèi)殺死大腸桿菌,0.005%的過(guò)氧乙酸水溶液只需5分鐘,如殺金黃色葡萄球菌需要60分鐘,但提高濃度為0.01%只需2分鐘,0.5%濃度的過(guò)氧乙酸可在1分鐘內(nèi)殺死枯草桿菌,0.04%濃度的過(guò)氧乙酸水溶液,在1分鐘內(nèi)殺死99.99%的蠟狀芽孢桿菌。能夠殺死細(xì)菌繁殖體過(guò)氧乙酸的濃度,足以殺死霉菌和酵母菌;過(guò)氧乙酸對(duì)病毒效果也好,是高效、廣譜和速效的殺菌劑,并且?guī)缀鯚o(wú)毒,使用后即使不去除,也無(wú)殘余毒,其分解產(chǎn)物是醋酸、過(guò)氧化氫、水和氧。適用于一些食品包裝材料(如超高溫滅菌乳、飲料的利樂(lè)包等)的滅菌;也適于食品表面的消毒(如水果、蔬菜和雞蛋);食品加工廠工人的手、地面和墻壁的消毒以及各種塑料、玻璃制品和棉布的消毒。用于手消毒時(shí),只能用低濃度0.5%以下的溶液,才不會(huì)使皮膚有刺激性和腐蝕性。


本文編號(hào):18799

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