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滇池細(xì)菌優(yōu)勢種抑藻物質(zhì)的分離純化及其抑藻機(jī)理

發(fā)布時(shí)間:2016-11-08 09:40

  本文關(guān)鍵詞:銅綠假單胞菌產(chǎn)吩嗪類色素的分離純化及其對赤潮生物生長的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


《云南大學(xué)》 2012年

滇池細(xì)菌優(yōu)勢種抑藻物質(zhì)的分離純化及其抑藻機(jī)理

馮陽  

【摘要】:隨著水體富營養(yǎng)化現(xiàn)象的日趨嚴(yán)重及有害藻類水華的頻繁暴發(fā),急需探索行之有效的藻類水華控制方法。微生物法具有具有廉價(jià)、安全、不破壞水體生態(tài)環(huán)境的特點(diǎn)。利用土著微生物抑制藍(lán)藻水華的方法成為目前生物控藻的研究熱點(diǎn)之一。 本文利用分泌物添加法研究了5株滇池水體土著溶藻細(xì)菌胞外分泌物對銅綠微囊藻的抑藻效應(yīng),發(fā)現(xiàn)編號(hào)為N1、N4、N5、W7和Y3的細(xì)菌胞外分泌物對藻細(xì)胞生長的抑制率分別為79.68%、64.71%、50.80%、37.79%和73.26%。選取其中胞外分泌物抑藻能力最強(qiáng)的N1菌株,從細(xì)菌培養(yǎng)、分泌物中活性物質(zhì)的分離、提純、鑒定及其抑藻機(jī)理這三個(gè)層次開展了系列研究。結(jié)果表明: (1)N1菌株培養(yǎng)條件為72h、pH=7.5時(shí),衰退期的胞外分泌物對銅綠微囊藻的抑制作用較好。 (2)經(jīng)過高溫處理過的N1細(xì)菌胞外分泌物,抑藻活性仍然很高,而細(xì)菌菌體破碎處理后的抑藻活性較低,高溫處理后,對銅綠微囊藻沒有抑制作用。說明主要的抑藻成分在細(xì)菌胞外分泌物中,并表現(xiàn)出熱穩(wěn)定性。 (3)采用液-液萃取法將細(xì)菌N1發(fā)酵后的胞外分泌物初步分離為乙酸乙酯相、正丁醇相和水相三個(gè)部分,其中乙酸乙酯相、正丁醇相組分對銅綠微囊藻的半致死濃度分別為47.6和71.5mg/L。進(jìn)一步經(jīng)柱層析分離、薄層層析(TLC)和高效液相色譜(HPLC)檢測(將相同或相似餾分合并)、活性跟蹤,從Ⅱ和V這2個(gè)活性較強(qiáng)的組分中提純得到兩個(gè)不飽和脂肪酸類化合物(N1-1B和N1-5D),其72h的半致死劑量分別為9.2mg/L和31.0mg/L (4)N1-1B和N1-5D均能降低藻細(xì)胞數(shù)量及葉綠素a含量,N1-1B刺激下單個(gè)銅綠微囊藻的葉綠素含量比對照組的有明顯的增加。推斷是N1-1B可以抑制藻細(xì)胞的分裂,造成細(xì)胞內(nèi)的色素積累。兩種化合物均能抑制超氧化物歧化酶(SOD)的活性,導(dǎo)致脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛(MDA)含量升高。在后期,N1-1B主要導(dǎo)致藻細(xì)胞的過氧化損傷,銅綠微囊藻數(shù)量大大減少。但N1-5D處理下的藻細(xì)胞MDA水平比N1-1B處理下的要低。結(jié)合N1-5D類胡蘿卜素的含量變化不大,分析表明,N1-5D對銅綠微囊藻的類胡蘿卜素含量影響不大,而類胡蘿卜素可以在一定程度上降低活性氧水平。減輕N1-5D對銅綠微囊藻細(xì)胞的損傷。隨著處理時(shí)間的延長,N1-5D對銅綠微囊藻細(xì)胞造成不可逆的損傷。因而,N1-5D對銅綠微囊藻的72h-ECso要遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于N1-1B,抑藻效果沒有N1-1B強(qiáng)。 從滇池細(xì)菌優(yōu)勢種N1菌株的發(fā)酵液中分離純化得到的兩個(gè)脂肪酸抑藻化合物,表現(xiàn)出較好的活性,并表現(xiàn)出對銅綠微囊藻不同的抑藻機(jī)理?梢赃M(jìn)一步研究開發(fā),對今后應(yīng)用這種方法控藻有一定的指導(dǎo)意義。

【關(guān)鍵詞】:
【學(xué)位授予單位】:云南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2012
【分類號(hào)】:X172
【目錄】:

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2 泗陽縣裴圩鎮(zhèn)政府 周道山 張福君;[N];江蘇農(nóng)業(yè)科技報(bào);2009年

3 記者 李高產(chǎn) 實(shí)習(xí)生 胡楠;[N];湖北日報(bào);2009年

4 趙關(guān)良;[N];中國建設(shè)報(bào);2006年

5 趙章元;[N];中國環(huán)境報(bào);2001年

6 本報(bào)記者 張帆;[N];中國經(jīng)濟(jì)時(shí)報(bào);2008年

7 張潔 記者 王春;[N];科技日報(bào);2005年

8 本報(bào)記者  趙關(guān)良;[N];中國環(huán)境報(bào);2005年

9 侯鐵中;[N];科技日報(bào);2007年

10 ;[N];中國化工報(bào);2005年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 雷國元;大型絲狀綠藻去除氮磷和抑制微藻的特性及其作用機(jī)制[D];哈爾濱工業(yè)大學(xué);2009年

2 李海燕;基于水處理的殼聚糖樹脂的制備、表征及功能性研究[D];中國海洋大學(xué);2011年

3 吳曉輝;常見眼子菜科沉水植物對浮游藻類的化感作用研究[D];中國科學(xué)院研究生院(水生生物研究所);2005年

4 張兵之;伊樂藻對銅綠微囊藻的化感作用研究[D];中國科學(xué)院研究生院(水生生物研究所);2007年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 劉智軍;超聲波除藻抑藻及藻渣最終處理系統(tǒng)研究[D];重慶大學(xué);2011年

2 韓景明;澎溪河水環(huán)境及超聲波除(抑)藻技術(shù)研究[D];重慶大學(xué);2011年

3 于靚;一株解淀粉芽孢桿菌的溶藻作用及對其它微生物的影響[D];武漢工業(yè)學(xué)院;2012年

4 徐美珠;海洋微生物在抑藻、檢毒、消污中的應(yīng)用研究[D];廈門大學(xué);2001年

5 胡一越;低功率超聲對藻類生長的影響實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶大學(xué);2013年

6 高偉;高價(jià)銀材料抑制水體藻類生長的試驗(yàn)研究[D];揚(yáng)州大學(xué);2011年

7 蘇建強(qiáng);海洋細(xì)菌調(diào)控赤潮藻生長、產(chǎn)毒作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];廈門大學(xué);2002年

8 安蓁;大型海藻及納米材料對赤潮中肋骨條藻的抑制作用研究[D];中國海洋大學(xué);2008年

9 歐陽妤婧;玉米秸稈對赤潮藻的抑制作用及其機(jī)制的初步研究[D];暨南大學(xué);2006年

10 邵路路;低強(qiáng)度超聲波控藻效果及其機(jī)理研究[D];寧波大學(xué);2012年


  本文關(guān)鍵詞:銅綠假單胞菌產(chǎn)吩嗪類色素的分離純化及其對赤潮生物生長的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號(hào):167668

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