生物3D打印制備SA/Ge凝膠支架探究淫羊藿苷對(duì)軟骨細(xì)胞增殖、分泌的影響
發(fā)布時(shí)間:2022-02-19 01:38
軟骨缺損在運(yùn)動(dòng)損傷中是最常見的,容易導(dǎo)致形成骨性關(guān)節(jié)炎,引發(fā)疼痛、關(guān)節(jié)畸形等癥狀。存在于關(guān)節(jié)中的軟骨細(xì)胞分化完全、成熟度高,致使其非常弱的再生能力,外加在軟骨周圍沒有神經(jīng)、血管及淋巴組織,所以靠自身來(lái)修復(fù)的可能性顯得微乎其微。隨著組織工程技術(shù)的發(fā)展,修復(fù)軟骨損傷這一難題將逐漸得到解決。本論文利用生物3D打印技術(shù),首先考察實(shí)驗(yàn)儀器參數(shù)對(duì)組織支架結(jié)構(gòu)以及孔徑的影響。以2 g海藻酸鈉和6 g明膠作為打印基材,制備出的復(fù)合凝膠呈現(xiàn)透明狀、粘度適中且材料的流體性能良好。通過考察打印氣壓、打印速度、打印針頭直徑和打印間距對(duì)支架形貌的影響,確定出0.30 Mpa、16 mm/s、300μm和0.8 mm是最優(yōu)的制備參數(shù),制備出的支架結(jié)構(gòu)規(guī)整、孔孔貫通性良好。其次,對(duì)制備出的SA/Ge復(fù)合凝膠支架的性能進(jìn)行簡(jiǎn)單的研究。熱穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)表明,復(fù)合支架相比純海藻酸鈉支架具有更好的穩(wěn)定性能;支架溶脹結(jié)果發(fā)現(xiàn),復(fù)合凝膠支架在4 h內(nèi)就達(dá)到其最大溶脹率,為713%;從復(fù)合支架的降解實(shí)驗(yàn)結(jié)果得出,Ca Cl2對(duì)海藻酸鈉交聯(lián)度較低且主要交聯(lián)支架的外部結(jié)構(gòu);對(duì)支架的浸提液做毒性分析,與正常培養(yǎng)基相比沒有顯著性差異,表明制...
【文章來(lái)源】:華僑大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號(hào)對(duì)照表
第1章 緒論
1.1 組織工程原理
1.2 組織工程支架制備方法
1.2.1 靜電紡絲法
1.2.2 相分離技術(shù)
1.2.3 微球燒結(jié)技術(shù)
1.2.4 纖維黏結(jié)
1.3 生物 3D打印
1.4 骨軟骨缺損研究現(xiàn)狀
1.5 本論文研究意義與主要內(nèi)容
第2章 SA/Ge支架制備及優(yōu)化
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 復(fù)合膠體溶液配制及打印前預(yù)處理
2.3.2 打印壓力對(duì)支架精確度的影響
2.3.3 打印速度對(duì)支架精確度的影響
2.3.4 打印針頭直徑對(duì)支架精確度的影響
2.3.5 打印線條間距對(duì)支架精確度的影響
2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.4.1 打印氣壓對(duì)支架的影響
2.4.2 打印速度對(duì)支架的影響
2.4.3 打印針頭直徑對(duì)支架的影響
2.4.4 打印間距對(duì)支架的影響
2.5 小結(jié)
第3章 復(fù)合支架性能研究及毒性測(cè)試
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 復(fù)合支架熱穩(wěn)定性測(cè)試
3.3.2 支架溶脹率測(cè)定
3.3.3 支架降解速率測(cè)定
3.3.4 支架毒性測(cè)定
3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.4.1 熱穩(wěn)定性分析
3.4.2 溶脹率檢測(cè)
3.4.3 降解速率測(cè)定
3.4.4 毒性檢驗(yàn)
3.5 小結(jié)
第4章 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)、性能鑒定及ICA對(duì)其生長(zhǎng)影響
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
4.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 軟骨細(xì)胞形態(tài)觀察
4.3.2 軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
4.3.3 軟骨細(xì)胞組織學(xué)染色
4.3.4 ICA對(duì)平面培養(yǎng)細(xì)胞的增殖影響
4.3.5 ICA對(duì)平面培養(yǎng)細(xì)胞分泌GAG影響
4.3.6 ICA對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡影響
4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.4.1 軟骨細(xì)胞形態(tài)
4.4.2 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
4.4.3 軟骨細(xì)胞組織學(xué)染色
4.4.4 ICA對(duì)軟骨細(xì)胞增殖的影響
4.4.5 ICA對(duì)細(xì)胞分泌GAG的影響
4.4.6 ICA對(duì)細(xì)胞凋亡的觀察
4.5 小結(jié)
第5章 細(xì)胞在支架上生長(zhǎng)狀態(tài)及ICA對(duì)其影響
5.1 引言
5.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
5.3 實(shí)驗(yàn)方法
5.3.1 細(xì)胞在支架上的粘附
5.3.2 細(xì)胞在支架上的分布
5.3.3 細(xì)胞在支架不同層厚的死活
5.3.4 梯度ICA對(duì)細(xì)胞在支架上的增殖作用
5.3.5 梯度ICA對(duì)細(xì)胞在支架分泌GAG測(cè)定
5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5.4.1 細(xì)胞在支架上粘附
5.4.2 細(xì)胞在支架上的分布
5.4.3 細(xì)胞在支架不同層厚上的死活觀察
5.4.4 ICA對(duì)支架上細(xì)胞的促增殖作用
5.4.5 ICA對(duì)支架上細(xì)胞分泌GAG影響
5.5 小結(jié)
第6章 總結(jié)
6.1 實(shí)驗(yàn)總結(jié)
6.2 后續(xù)實(shí)驗(yàn)建議
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]淫羊藿苷促進(jìn)軟骨細(xì)胞體外3-D培養(yǎng)下生成軟骨[J]. 王鵬珍,萬(wàn)超. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2015(10)
[2]大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)去分化時(shí)間的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 丁萬(wàn)軍,劉世清,賀斌,鄧明. 武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(01)
[3]微球在組織工程中的應(yīng)用[J]. 崔代超,范田園. 國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2010(04)
[4]淫羊藿苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨向誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 吳昊,查振剛,姚平,熊高鑫,郇松瑋,束志勇. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(04)
[5]淫羊藿苷元脂質(zhì)體的制備及其對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖分化影響的研究[J]. 賈東升,賈曉斌,施峰,薛璟,孫娥,陳玲玲,張振海. 中國(guó)藥學(xué)雜志. 2010(05)
[6]熱致相分離法制備聚合物微孔膜的研究進(jìn)展[J]. 蘇儀,李永國(guó),陳翠仙,李繼定. 膜科學(xué)與技術(shù). 2007(05)
[7]Icariin promotes expression of PGC-1α,PPARα,and NRF-1 during cardiomyocyte differentiation of murine embryonic stem cells in vitro[J]. Ling DING,Xing-guang LIANG,Dan-yan ZHU,Yi-jia LOU~2Institute of Pharmacology and Toxicology and Biochemical Pharmaceutics,College of Pharmaceutical Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[8]靜電紡絲技術(shù)及其研究進(jìn)展[J]. 楊恩龍,王善元,李妮,趙叢濤. 產(chǎn)業(yè)用紡織品. 2007(08)
[9]葛根素和淫羊藿甙對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)作用的比較研究[J]. 殷曉雪,陳仲?gòu)?qiáng),黨耕町. 中國(guó)骨與關(guān)節(jié)損傷雜志. 2007(03)
[10]淫羊藿甙對(duì)成骨細(xì)胞Smad4 mRNA作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 雪原,王沛,齊清會(huì),倪虹,馬信龍,郭世紱. 中華骨科雜志. 2005(02)
博士論文
[1]仿生組裝淫羊藿苷控釋型骨修復(fù)材料的構(gòu)建與應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D]. 吳濤.南方醫(yī)科大學(xué) 2009
碩士論文
[1]亞臨界二氧化碳燒結(jié)共載細(xì)胞多孔微球組織工程支架及其性能的研究[D]. 馬騰.華僑大學(xué) 2015
[2]淫羊藿甙對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖、分泌及MAPKs通路的影響[D]. 史冰楠.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號(hào):3631950
【文章來(lái)源】:華僑大學(xué)福建省
【文章頁(yè)數(shù)】:74 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
主要符號(hào)對(duì)照表
第1章 緒論
1.1 組織工程原理
1.2 組織工程支架制備方法
1.2.1 靜電紡絲法
1.2.2 相分離技術(shù)
1.2.3 微球燒結(jié)技術(shù)
1.2.4 纖維黏結(jié)
1.3 生物 3D打印
1.4 骨軟骨缺損研究現(xiàn)狀
1.5 本論文研究意義與主要內(nèi)容
第2章 SA/Ge支架制備及優(yōu)化
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
2.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
2.3 實(shí)驗(yàn)方法
2.3.1 復(fù)合膠體溶液配制及打印前預(yù)處理
2.3.2 打印壓力對(duì)支架精確度的影響
2.3.3 打印速度對(duì)支架精確度的影響
2.3.4 打印針頭直徑對(duì)支架精確度的影響
2.3.5 打印線條間距對(duì)支架精確度的影響
2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.4.1 打印氣壓對(duì)支架的影響
2.4.2 打印速度對(duì)支架的影響
2.4.3 打印針頭直徑對(duì)支架的影響
2.4.4 打印間距對(duì)支架的影響
2.5 小結(jié)
第3章 復(fù)合支架性能研究及毒性測(cè)試
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
3.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
3.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
3.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3.1 復(fù)合支架熱穩(wěn)定性測(cè)試
3.3.2 支架溶脹率測(cè)定
3.3.3 支架降解速率測(cè)定
3.3.4 支架毒性測(cè)定
3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.4.1 熱穩(wěn)定性分析
3.4.2 溶脹率檢測(cè)
3.4.3 降解速率測(cè)定
3.4.4 毒性檢驗(yàn)
3.5 小結(jié)
第4章 軟骨細(xì)胞培養(yǎng)、性能鑒定及ICA對(duì)其生長(zhǎng)影響
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
4.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
4.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備
4.3 實(shí)驗(yàn)方法
4.3.1 軟骨細(xì)胞形態(tài)觀察
4.3.2 軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
4.3.3 軟骨細(xì)胞組織學(xué)染色
4.3.4 ICA對(duì)平面培養(yǎng)細(xì)胞的增殖影響
4.3.5 ICA對(duì)平面培養(yǎng)細(xì)胞分泌GAG影響
4.3.6 ICA對(duì)軟骨細(xì)胞凋亡影響
4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.4.1 軟骨細(xì)胞形態(tài)
4.4.2 細(xì)胞生長(zhǎng)曲線
4.4.3 軟骨細(xì)胞組織學(xué)染色
4.4.4 ICA對(duì)軟骨細(xì)胞增殖的影響
4.4.5 ICA對(duì)細(xì)胞分泌GAG的影響
4.4.6 ICA對(duì)細(xì)胞凋亡的觀察
4.5 小結(jié)
第5章 細(xì)胞在支架上生長(zhǎng)狀態(tài)及ICA對(duì)其影響
5.1 引言
5.2 實(shí)驗(yàn)材料和儀器
5.2.1 實(shí)驗(yàn)試劑
5.2.2 實(shí)驗(yàn)儀器
5.3 實(shí)驗(yàn)方法
5.3.1 細(xì)胞在支架上的粘附
5.3.2 細(xì)胞在支架上的分布
5.3.3 細(xì)胞在支架不同層厚的死活
5.3.4 梯度ICA對(duì)細(xì)胞在支架上的增殖作用
5.3.5 梯度ICA對(duì)細(xì)胞在支架分泌GAG測(cè)定
5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5.4.1 細(xì)胞在支架上粘附
5.4.2 細(xì)胞在支架上的分布
5.4.3 細(xì)胞在支架不同層厚上的死活觀察
5.4.4 ICA對(duì)支架上細(xì)胞的促增殖作用
5.4.5 ICA對(duì)支架上細(xì)胞分泌GAG影響
5.5 小結(jié)
第6章 總結(jié)
6.1 實(shí)驗(yàn)總結(jié)
6.2 后續(xù)實(shí)驗(yàn)建議
參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷、在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文與研究成果
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]淫羊藿苷促進(jìn)軟骨細(xì)胞體外3-D培養(yǎng)下生成軟骨[J]. 王鵬珍,萬(wàn)超. 中國(guó)老年學(xué)雜志. 2015(10)
[2]大鼠膝關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞體外培養(yǎng)去分化時(shí)間的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 丁萬(wàn)軍,劉世清,賀斌,鄧明. 武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2012(01)
[3]微球在組織工程中的應(yīng)用[J]. 崔代超,范田園. 國(guó)際藥學(xué)研究雜志. 2010(04)
[4]淫羊藿苷對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨向誘導(dǎo)的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 吳昊,查振剛,姚平,熊高鑫,郇松瑋,束志勇. 中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(04)
[5]淫羊藿苷元脂質(zhì)體的制備及其對(duì)大鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖分化影響的研究[J]. 賈東升,賈曉斌,施峰,薛璟,孫娥,陳玲玲,張振海. 中國(guó)藥學(xué)雜志. 2010(05)
[6]熱致相分離法制備聚合物微孔膜的研究進(jìn)展[J]. 蘇儀,李永國(guó),陳翠仙,李繼定. 膜科學(xué)與技術(shù). 2007(05)
[7]Icariin promotes expression of PGC-1α,PPARα,and NRF-1 during cardiomyocyte differentiation of murine embryonic stem cells in vitro[J]. Ling DING,Xing-guang LIANG,Dan-yan ZHU,Yi-jia LOU~2Institute of Pharmacology and Toxicology and Biochemical Pharmaceutics,College of Pharmaceutical Sciences,Zhejiang University,Hangzhou 310058,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2007(10)
[8]靜電紡絲技術(shù)及其研究進(jìn)展[J]. 楊恩龍,王善元,李妮,趙叢濤. 產(chǎn)業(yè)用紡織品. 2007(08)
[9]葛根素和淫羊藿甙對(duì)成骨細(xì)胞生物學(xué)作用的比較研究[J]. 殷曉雪,陳仲?gòu)?qiáng),黨耕町. 中國(guó)骨與關(guān)節(jié)損傷雜志. 2007(03)
[10]淫羊藿甙對(duì)成骨細(xì)胞Smad4 mRNA作用的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 雪原,王沛,齊清會(huì),倪虹,馬信龍,郭世紱. 中華骨科雜志. 2005(02)
博士論文
[1]仿生組裝淫羊藿苷控釋型骨修復(fù)材料的構(gòu)建與應(yīng)用基礎(chǔ)研究[D]. 吳濤.南方醫(yī)科大學(xué) 2009
碩士論文
[1]亞臨界二氧化碳燒結(jié)共載細(xì)胞多孔微球組織工程支架及其性能的研究[D]. 馬騰.華僑大學(xué) 2015
[2]淫羊藿甙對(duì)關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞增殖、分泌及MAPKs通路的影響[D]. 史冰楠.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號(hào):3631950
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