雙抗體夾心酶聯(lián)免疫方法檢測(cè)丁香假單胞桿菌斑點(diǎn)致病變種病菌
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【摘要】:丁香假單胞桿菌斑點(diǎn)致病變種病菌可以引起十字花科細(xì)菌性黑斑病,是侵染蘿卜、白菜、花椰菜等農(nóng)作物的重要病害之一。以滅活的丁香假單胞桿菌斑點(diǎn)致病變種病菌(NCPPB1820)為免疫原免疫小鼠,通過雜交瘤細(xì)胞技術(shù),篩選最終獲得6株產(chǎn)生特異性單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞。將辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)與抗體偶聯(lián),作為檢測(cè)探針,分別將6種單克隆抗體作為包被抗體,進(jìn)行兩兩配對(duì)篩選。結(jié)果表明,所制備的抗體特異性較好,對(duì)水稻細(xì)菌性谷枯病菌、水稻細(xì)菌性條斑病菌、玉米細(xì)菌性枯萎病菌、丁香假單胞菌丁香致病變種均沒有交叉反應(yīng)。以6號(hào)抗體作為檢測(cè)抗體(6-HRP),以1號(hào)抗體作為包被抗體,建立酶聯(lián)免疫分析法獲得了最佳的敏感度。檢測(cè)丁香假單胞桿菌斑點(diǎn)致病變種的最低檢測(cè)限為1.5×105cfu/m L,定量限為4.12×105cfu/m L;陔p抗體夾心的酶免疫方法特異性好,便捷,可以實(shí)現(xiàn)對(duì)丁香假單胞桿菌斑點(diǎn)致病變種病菌高通量測(cè)定。
【作者單位】: 食品科學(xué)與技術(shù)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室江南大學(xué);
【關(guān)鍵詞】: 酶聯(lián)免疫測(cè)定 單克隆抗體 丁香假單胞桿菌斑點(diǎn)致病變種病菌
【基金】:國(guó)家十二五科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2012BAC01B07)
【分類號(hào)】:S432.4
【正文快照】: 由丁香假單胞桿菌斑點(diǎn)致病變種(Pseudomonassyringae pv.Maculicola)病菌引起的十字花科細(xì)菌性黑斑病是世界上重要的十字花科蔬菜細(xì)菌性病害[1]。該病菌在分類上屬于原核生物細(xì)菌界、變形桿菌門、假單胞菌科[2]。該菌最適培養(yǎng)溫度在25~27℃,主要宿主有白菜、蘿卜、花椰菜等十
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3 張金梅;大豆細(xì)菌性斑點(diǎn)病原物的分離鑒定及其兩個(gè)Ⅲ型效應(yīng)因子的克隆與功能研究[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年
,本文編號(hào):569974
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