本文關(guān)鍵詞：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫方法檢測丁香假單胞桿菌斑點致病變種病菌

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【摘要】：丁香假單胞桿菌斑點致病變種病菌可以引起十字花科細菌性黑斑病,是侵染蘿卜、白菜、花椰菜等農(nóng)作物的重要病害之一。以滅活的丁香假單胞桿菌斑點致病變種病菌(NCPPB1820)為免疫原免疫小鼠,通過雜交瘤細胞技術(shù),篩選最終獲得6株產(chǎn)生特異性單克隆抗體的雜交瘤細胞。將辣根過氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)與抗體偶聯(lián),作為檢測探針,分別將6種單克隆抗體作為包被抗體,進行兩兩配對篩選。結(jié)果表明,所制備的抗體特異性較好,對水稻細菌性谷枯病菌、水稻細菌性條斑病菌、玉米細菌性枯萎病菌、丁香假單胞菌丁香致病變種均沒有交叉反應(yīng)。以6號抗體作為檢測抗體(6-HRP),以1號抗體作為包被抗體,建立酶聯(lián)免疫分析法獲得了最佳的敏感度。檢測丁香假單胞桿菌斑點致病變種的最低檢測限為1.5×105cfu/m L,定量限為4.12×105cfu/m L�；陔p抗體夾心的酶免疫方法特異性好,便捷,可以實現(xiàn)對丁香假單胞桿菌斑點致病變種病菌高通量測定。
【作者單位】： 食品科學與技術(shù)國家重點實驗室江南大學;
【關(guān)鍵詞】： 酶聯(lián)免疫測定 單克隆抗體 丁香假單胞桿菌斑點致病變種病菌
【基金】：國家十二五科技支撐計劃項目(2012BAC01B07)
【分類號】：S432.4
【正文快照】： 由丁香假單胞桿菌斑點致病變種(Pseudomonassyringae pv.Maculicola)病菌引起的十字花科細菌性黑斑病是世界上重要的十字花科蔬菜細菌性病害[1]。該病菌在分類上屬于原核生物細菌界、變形桿菌門、假單胞菌科[2]。該菌最適培養(yǎng)溫度在25~27℃,主要宿主有白菜、蘿卜、花椰菜等十

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本文編號：569974