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丁香疫霉病菌PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)

發(fā)布時(shí)間:2017-07-05 16:14

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【摘要】:為了快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)丁香疫霉病菌(Phytophthora syringae,PSY),根據(jù)Gene Bank中PSY的ITS序列設(shè)計(jì)特異引物Psy1/Psy2和探針P-Psy,建立了常規(guī)PCR和實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法。利用引物Psy1/Psy2擴(kuò)增供試的26株P(guān)SY能得到585 bp的預(yù)期目標(biāo)條帶,但擴(kuò)增其它61個(gè)非PSY供試菌株不能得到預(yù)期產(chǎn)物,檢測(cè)靈敏度為12 pg菌絲DNA;探針P-Psy對(duì)供試26株P(guān)SY表現(xiàn)為陽性擴(kuò)增,而對(duì)其它菌株和空白對(duì)照均表現(xiàn)為陰性擴(kuò)增,檢測(cè)靈敏度可達(dá)120 fg菌絲DNA,比常規(guī)PCR高100倍;引物Psy1/Psy2和探針P-Psy對(duì)5 g土壤中PSY卵孢子的檢測(cè)靈敏度分別為20 000個(gè)和200個(gè)。樣品檢測(cè)試驗(yàn)表明兩種PCR方法可用于口岸植物檢疫中快速、準(zhǔn)確和特異地檢測(cè)丁香疫霉病菌。
【作者單位】: 南京林業(yè)大學(xué);上海出入境檢驗(yàn)檢疫局;
【關(guān)鍵詞】丁香疫霉病菌 檢測(cè) PCR 實(shí)時(shí)熒光PCR
【基金】:上海市科技興農(nóng)重點(diǎn)攻關(guān)項(xiàng)目(滬農(nóng)科攻字2012第2-8號(hào)) 上海檢驗(yàn)檢疫局科研項(xiàng)目(HK065-2014)
【分類號(hào)】:S432.4
【正文快照】: 丁香疫霉病菌(Phytophthora syringae,PSY)是我國(guó)禁止進(jìn)境的植物檢疫性有害生物,主要寄主包括柑桔、蘋果、桃、梨、丁香、橡樹等14個(gè)科29個(gè)屬植物,可引起寄主根、莖、葉、果實(shí)多種病害[1~3]。病菌可侵染柑橘引起果實(shí)褐腐、枝干流膠、根頸部腳腐和根腐,影響果實(shí)產(chǎn)量和品質(zhì),帶來

本文編號(hào):522677

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