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丁香疫霉病菌PCR和實時熒光PCR檢測

發(fā)布時間:2017-07-05 16:14

  本文關(guān)鍵詞:丁香疫霉病菌PCR和實時熒光PCR檢測


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【摘要】:為了快速、準(zhǔn)確地檢測丁香疫霉病菌(Phytophthora syringae,PSY),根據(jù)Gene Bank中PSY的ITS序列設(shè)計特異引物Psy1/Psy2和探針P-Psy,建立了常規(guī)PCR和實時熒光PCR檢測方法。利用引物Psy1/Psy2擴(kuò)增供試的26株P(guān)SY能得到585 bp的預(yù)期目標(biāo)條帶,但擴(kuò)增其它61個非PSY供試菌株不能得到預(yù)期產(chǎn)物,檢測靈敏度為12 pg菌絲DNA;探針P-Psy對供試26株P(guān)SY表現(xiàn)為陽性擴(kuò)增,而對其它菌株和空白對照均表現(xiàn)為陰性擴(kuò)增,檢測靈敏度可達(dá)120 fg菌絲DNA,比常規(guī)PCR高100倍;引物Psy1/Psy2和探針P-Psy對5 g土壤中PSY卵孢子的檢測靈敏度分別為20 000個和200個。樣品檢測試驗表明兩種PCR方法可用于口岸植物檢疫中快速、準(zhǔn)確和特異地檢測丁香疫霉病菌。
【作者單位】: 南京林業(yè)大學(xué);上海出入境檢驗檢疫局;
【關(guān)鍵詞】丁香疫霉病菌 檢測 PCR 實時熒光PCR
【基金】:上海市科技興農(nóng)重點攻關(guān)項目(滬農(nóng)科攻字2012第2-8號) 上海檢驗檢疫局科研項目(HK065-2014)
【分類號】:S432.4
【正文快照】: 丁香疫霉病菌(Phytophthora syringae,PSY)是我國禁止進(jìn)境的植物檢疫性有害生物,主要寄主包括柑桔、蘋果、桃、梨、丁香、橡樹等14個科29個屬植物,可引起寄主根、莖、葉、果實多種病害[1~3]。病菌可侵染柑橘引起果實褐腐、枝干流膠、根頸部腳腐和根腐,影響果實產(chǎn)量和品質(zhì),帶來

本文編號:522677

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