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具有植物促生活性的耐鹽菌的篩選及微生物法改良鹽漬化土壤初探

發(fā)布時間:2017-06-26 17:15

  本文關(guān)鍵詞:具有植物促生活性的耐鹽菌的篩選及微生物法改良鹽漬化土壤初探,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:土壤鹽漬化嚴重影響農(nóng)業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境,它會抑制作物生長、破壞植物光合作用,嚴重時甚至造成絕產(chǎn),鹽漬化土壤的微生物群落結(jié)構(gòu)及酶活性也會受不同程度的影響。鹽漬化土壤改良有很多方法,其中微生物法具有環(huán)境友好等優(yōu)勢,目前微生物法改良鹽漬化土壤的研究并不太多,而且遠遠沒有達到應(yīng)用水平,本文試圖利用相關(guān)微生物為鹽漬化土壤改良作貢獻,為改良和有效利用鹽漬化土壤奠定基礎(chǔ),同時為鹽漬土資源的開發(fā)利用提供了理論依據(jù)。首先篩選得到了具有植物促生活性的耐鹽菌,從上海市浦東新區(qū)合慶鎮(zhèn)友誼村佰臣蔬果專業(yè)合作社田間植物的根際土壤中,共分離篩選得到6株耐鹽菌株。其中一株Bacillus sp.耐鹽菌株YL4,它不僅有ACC脫氨酶活性,并且能夠溶解難溶性無機磷,同時它也有固氮能力和產(chǎn)鐵載體的能力,這使得它具有促生能力,這對下一步的實驗十分重要,根據(jù)序列比對和系統(tǒng)發(fā)育樹的結(jié)果發(fā)現(xiàn),耐鹽菌YL4同芽孢桿菌屬(Bacillus)的sp.進化關(guān)系最為接近,置信水平達到100。浦東新區(qū)佰臣地區(qū)的鹽漬化土壤情況的研究表明B-1土壤鹽漬化程度最為嚴重,B-1土壤最初全鹽含量為9.4g/kg,屬于鹽漬化土壤,幾乎達到鹽土的標準,因此將B-1作為后續(xù)改良實驗的地點。B-1土壤在接種了芽孢桿菌YL4后,最終土壤全鹽含量下降至1.54g/kg,接近正常土壤的標準,另外,YL4和S3-1聯(lián)合接種后,土壤全鹽含量下降至2.21g/kg,雖然不如單獨單獨接種YL4效果顯著,但對鹽漬化土壤的改良扔具有良好的顯著作用。YL4與S3-1聯(lián)合接種時,小青菜全株鮮重、土壤細菌數(shù)量、脲酶和蔗糖酶活性均維持在較高的水平。綜上,我們可以看出,YL4與S3-1聯(lián)合接種能夠顯著改善鹽漬化土壤中植物生長并且降低土壤全鹽含量。為了使鹽漬土改良有更多的選擇,我們研究了酵母菌突變體(該突變體能將細胞外的Na+吸收到細胞內(nèi))對水環(huán)境中Na+的吸收能力。首先根據(jù)8株酵母菌細胞在四個不同NaCl濃度下Na+吸收能力的實驗,選取其中三株酵母菌突變體(O6、B5和YBR290w)進行后續(xù)實驗,從72小時后,不同的酵母細胞在5%、7%和9%的NaCl溶液中的死亡情況可知,在三種鹽濃度梯度下,野生型酵母菌的死亡率都在90%以上,三種野生型的死亡率是不同的,整體趨勢是隨著鹽濃度的升高,細胞死亡率下降。三株野生型菌株都能夠吸收Na+,這可能是由于同高濃度鹽溶液(9%)相比,在低濃度鹽溶液(5%)下,野生型酵母菌吸收Na+更高效,隨著Na+的吸收,酵母細胞內(nèi)滲透壓力逐漸升高,細胞最終吸水脹破死亡,突變型酵母菌細胞中均有白色的充盈部分,我們推測是液泡,而且隨著鹽濃度的升高,該部分的邊緣越來越破碎,越來越不整齊。上述實驗雖然能夠說明一定的問題,但是酵母菌突變體吸收Na+的具體機制仍需進一步的實驗進行驗證。
【關(guān)鍵詞】:鹽漬化土壤 植物根際促生菌 耐鹽菌 酵母菌 生物改良
【學位授予單位】:上海師范大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:S156.4
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-11
  • 第一章 緒論11-19
  • 1.1 鹽漬化土壤的形成原因及危害11-13
  • 1.1.1 鹽漬化土壤形成原因11-12
  • 1.1.2 鹽漬化土壤危害12-13
  • 1.2 鹽漬化土壤改良研究進展13-18
  • 1.2.1 傳統(tǒng)方法改良鹽漬化土壤13-14
  • 1.2.2 微生物法改良鹽漬化土壤14-18
  • 1.3 本研究的目的及意義18-19
  • 第二章 具有植物促生活性的耐鹽菌的篩選19-33
  • 2.1 材料19-22
  • 2.1.1 土壤樣品19
  • 2.1.2 儀器和設(shè)備19-20
  • 2.1.3 培養(yǎng)基20-21
  • 2.1.4 主要試劑21-22
  • 2.2 方法22-27
  • 2.2.1 耐鹽菌株的富集和馴化22
  • 2.2.2 耐鹽菌株的分離純化22-23
  • 2.2.3 菌株的保藏與活化23
  • 2.2.4 菌種鑒定23-25
  • 2.2.5 具有植物促生活性的耐鹽菌的篩選25-26
  • 2.2.6 YL4對小青菜的促生作用26-27
  • 2.2.7 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建[54]27
  • 2.2.8 數(shù)據(jù)處理與分析27
  • 2.3 結(jié)果與分析27-31
  • 2.3.1 耐鹽菌株的分離、篩選和鑒定27-28
  • 2.3.2 具有植物促生活性的耐鹽菌的篩選28-29
  • 2.3.3 YL4溶磷能力定量測定29-30
  • 2.3.4 YL4對小青菜的促生作用30-31
  • 2.3.5 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建31
  • 2.4 小結(jié)31-33
  • 第三章 芽孢桿菌YL4改良鹽漬化土壤的初步研究33-50
  • 3.1 材料34-35
  • 3.1.1 供試菌株34
  • 3.1.2 供試植物34
  • 3.1.3 栽培土34
  • 3.1.4 田間實驗地點34
  • 3.1.5 培養(yǎng)基和試劑34-35
  • 3.1.6 儀器和設(shè)備35
  • 3.2 方法35-37
  • 3.2.1 改良鹽漬化土壤盆栽實驗35-36
  • 3.2.2 改良鹽漬化土壤田間實驗36-37
  • 3.3 結(jié)果與分析37-49
  • 3.3.1 改良鹽漬化土壤盆栽實驗37-40
  • 3.3.2 改良鹽漬化土壤田間實驗40-49
  • 3.4 小結(jié)49-50
  • 第四章 酵母菌突變體對Na+的吸收研究50-57
  • 4.1 材料50-51
  • 4.1.1 供試菌株50-51
  • 4.1.2 培養(yǎng)基和試劑51
  • 4.1.3 儀器和設(shè)備51
  • 4.2 方法51-53
  • 4.2.1 四種濃度Na+溶液中酵母菌吸收能力51-52
  • 4.2.2 三種濃度Na+溶液中酵母菌吸收能力52
  • 4.2.3 酵母細胞吸收Na+溶液后死亡情況52-53
  • 4.3 結(jié)果與分析53-56
  • 4.3.1 四種濃度Na+溶液中酵母菌吸收能力53-54
  • 4.3.2 三種濃度Na+溶液中酵母菌吸收能力54
  • 4.3.3 酵母細胞吸收鹽溶液后死亡情況實驗54-56
  • 4.4 小結(jié)56-57
  • 總結(jié)57-59
  • 致謝59-60
  • 參考文獻60-64
  • 主要科研成果64

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 F.Makeschin;Agroforestry and its Application in Amelioration of Saline Soils in Eastern China Coastal Region  [J];Forestry Studies in China;2004年02期


  本文關(guān)鍵詞:具有植物促生活性的耐鹽菌的篩選及微生物法改良鹽漬化土壤初探,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:486947

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