磷脂脂肪酸（Phospholipid fatty acids, PLFA）是活體生物細胞膜磷脂的重要成分,由于不同類群微生物能通過相應(yīng)生化途徑形成特定的PLFA,使部分PLFA總是出現(xiàn)在同一類群的微生物中。因此PLFA具有較高的結(jié)構(gòu)多樣性和生物學(xué)特異性,可作為區(qū)分活體微生物群落生物標(biāo)記的基礎(chǔ),也成為微生物分類的主要依據(jù)。 本文以磷脂脂肪酸（PLFA）技術(shù)作為切入點,以Sherlock MIS系統(tǒng)的功能拓展和譜圖數(shù)據(jù)分析為主線,探討了PLFA的提取方法、分析方法及數(shù)據(jù)處理模型,比較了土壤和凋落物中微生物群落結(jié)構(gòu)間的作用關(guān)系,得到以下結(jié)果： （1）建立并優(yōu)化了超聲提取土壤中PLFA的方法,與傳統(tǒng)振蕩提取法對比,發(fā)現(xiàn)利用超聲提取可大幅提高PLFA方法的提取效率,解決了大批量樣品分析PLFA的前處理問題。 （2）選取超聲溫度、超聲時間、提取劑量作為PLFA提取的主要影響因素,以PLFA的提取率為響應(yīng)值,結(jié)合響應(yīng)面法進一步優(yōu)化PLFA的提取工藝。 （3）采用四川茂縣森林土壤和凋落物為研究對象,以PLFA作為特定微生物指示劑進行微生物群落的劃分,利用主成分分析檢測土壤和凋落... 

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 磷脂脂肪酸簡介
    1.2 磷脂脂肪酸分析方法的原理
    1.3 PLFA生物標(biāo)記法的優(yōu)點
    1.4 常用從土壤中提取和檢測PLFA分子的方法
        1.4.1 常用提取PLFA方法
        1.4.2 常用的PLFA檢測手段
        1.4.3 常用的實驗數(shù)據(jù)處理方法
    1.5 PLFA分子生物標(biāo)記的主要應(yīng)用領(lǐng)域
        1.5.1 土壤及凋落物領(lǐng)域的相關(guān)應(yīng)用
        1.5.2 環(huán)境微生物學(xué)領(lǐng)域的相關(guān)應(yīng)用
        1.5.3 食品工程領(lǐng)域的相關(guān)應(yīng)用
        1.5.4 水污染檢測及處理領(lǐng)域的相關(guān)應(yīng)用
        1.5.5 其它領(lǐng)域的相關(guān)應(yīng)用
    1.6 以PLFA分子標(biāo)記的局限性
        1.6.1 標(biāo)記變動易導(dǎo)致群落估算偏差
        1.6.2 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析工作繁重
        1.6.3 對原位土壤微生物群落中特定菌種指征有時不夠明確
        1.6.4 相關(guān)研究中出現(xiàn)的問題還有待探討
    1.7 選題能夠解決的具體科研問題及意義
    1.8 課題的主要研究內(nèi)容及技術(shù)路線
        1.8.1 主要研究內(nèi)容
        1.8.2 本課題研究的技術(shù)路線圖
第2章 響應(yīng)面法優(yōu)化PLFA提取方法
    2.1 材料與方法
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 實驗方法
    2.2 實驗結(jié)果
        2.2.1 土壤的基本理化性質(zhì)分析
        2.2.2 不同土壤量中PLFA含量的分析
        2.2.3 不同提取劑量對土壤中PLFA含量分析
        2.2.4 超聲與振蕩兩小時提取土壤中PLFA含量分析比較
        2.2.5 溫度對PLFA提取效率的影響
        2.2.6 響應(yīng)面分析實驗結(jié)果與數(shù)據(jù)分析
    2.3 驗證實驗
    2.4 本章小結(jié)
第3章 土壤及凋落物中微生物群落結(jié)構(gòu)分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 實驗方法
    3.2 實驗結(jié)果
        3.2.1 不同量的凋落物中PLFA含量分析
        3.2.2 凋落物及土壤中微生物群落的分析
        3.2.3 超聲溫度對土壤中微生物群落結(jié)構(gòu)的影響
        3.2.4 超聲時間對微生物群落結(jié)構(gòu)的影響
        3.2.5 主成分分析檢測超聲提取對微生物群落之間的相互影響
    3.3 本章小結(jié)
第4章 PLFA鑒定系統(tǒng)及數(shù)據(jù)處理的研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 實驗方法
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 不同內(nèi)標(biāo)進樣量對數(shù)據(jù)結(jié)果的影響
        4.2.2 不同數(shù)據(jù)處理方法數(shù)據(jù)處理結(jié)果分析
        4.2.3 指示不同微生物類別的PLFA數(shù)據(jù)分析結(jié)果
        4.2.4 PLFA數(shù)據(jù)處理軟件編寫
    4.3 本章小結(jié)
結(jié)論與展望
致謝
參考文獻
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文及科研成果


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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本文編號：3727303