有益微生物對(duì)于改善環(huán)境、糧食增產(chǎn)具有重要作用,豐富的微生物資源為農(nóng)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展提供了支持。本研究以松遼平原玉米為研究對(duì)象,采用培養(yǎng)和非培養(yǎng)方法進(jìn)行了內(nèi)生固氮菌多樣性研究。對(duì)玉米內(nèi)生固氮菌進(jìn)行了分離、鑒定,篩選出一批具有高固氮酶活性、產(chǎn)ACC脫氨酶、產(chǎn)鐵載體和溶磷能力的菌株,并對(duì)這些菌株的促生能力進(jìn)行了試驗(yàn)驗(yàn)證。主要結(jié)果如下:（1）采用4種培養(yǎng)基從7個(gè)玉米品種（樣品編號(hào)為569、570、571、572、573、574、575）的根、莖、葉分離到762株內(nèi)生固氮菌分離物。16S rDNA序列鑒定,發(fā)現(xiàn)這些菌株在分類學(xué)地位上屬于4門、7綱、10目、13科、29屬、107種。具體為Actinobacteria、Bacteroidetes、Firmicutes和Proteobacteria四個(gè)門,內(nèi)生固氮菌主要為Proteobacteria,占到總分離到內(nèi)生固氮菌的91.2%。Klebsiella、Enterobacter、Pseudomonas為優(yōu)勢(shì)屬,分別占到分離菌株的32%、22%和16%,合計(jì)70%。（2）以16S rDNA V5-V7區(qū)和nifH基因作為分子標(biāo)記,采用Illumina... 

【文章來源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
    1.1 玉米的生產(chǎn)地位及生產(chǎn)現(xiàn)狀
    1.2 生物固氮研究進(jìn)展
        1.2.1 生物固氮的意義
        1.2.2 生物固氮類型
        1.2.3 nifH基因研究進(jìn)展
        1.2.4 內(nèi)生聯(lián)合固氮
    1.3 微生物多樣性研究方法和進(jìn)展
    1.4 促生菌研究進(jìn)展
    1.5 研究目的和意義
    1.6 技術(shù)路線
第二章 玉米內(nèi)生固氮菌的分離與鑒定
    2.1 材料與方法
        2.1.1 樣品信息
        2.1.2 培養(yǎng)基、試劑及引物
        2.1.3 玉米內(nèi)生固氮菌的分離鑒定
        2.1.4 玉米內(nèi)生固氮菌nifH基因檢測(cè)
    2.2 結(jié)果與分析
        2.2.1 分類學(xué)地位多樣性分析
        2.2.2 不同玉米品種內(nèi)生固氮菌多樣性比較
        2.2.3 玉米植株不同部位內(nèi)生固氮菌多樣性比較
        2.2.4 玉米內(nèi)生固氮菌nifH基因檢測(cè)結(jié)果統(tǒng)計(jì)
    2.3 討論
第三章 不同品種玉米內(nèi)生固氮菌多樣性分析
    3.1 材料與方法
        3.1.1 樣品信息
        3.1.2 玉米樣品前處理
        3.1.3 玉米內(nèi)生細(xì)菌基因組DNA提取
        3.1.4 內(nèi)生細(xì)菌16SrDNAV5-V7區(qū)擴(kuò)增
        3.1.5 內(nèi)生固氮菌nifH基因擴(kuò)增
        3.1.6 數(shù)據(jù)處理方法
    3.2 結(jié)果與分析
        3.2.1 玉米內(nèi)生細(xì)菌多樣性分析
        3.2.2 玉米內(nèi)生固氮菌多樣性分析
    3.3 討論
第四章 玉米內(nèi)生固氮菌促生特性研究
    4.1 材料與方法
        4.1.1 供試菌株
        4.1.2 培養(yǎng)基與試劑
        4.1.3 菌株固氮酶活性測(cè)定
        4.1.4 菌株ACC脫氨酶活性測(cè)定
        4.1.5 菌株產(chǎn)鐵載體檢測(cè)
        4.1.6 菌株溶磷性檢測(cè)
    4.2 結(jié)果與分析
        4.2.1 內(nèi)生固氮菌固氮酶活性
        4.2.2 內(nèi)生固氮菌ACC脫氨酶活性測(cè)定
        4.2.3 內(nèi)生固氮菌產(chǎn)體載體檢測(cè)
        4.2.4 內(nèi)生固氮菌溶磷能力測(cè)定
    4.3 討論
第五章 玉米內(nèi)生固氮菌促進(jìn)玉米苗期生長(zhǎng)試驗(yàn)
    5.1 材料與方法
        5.1.1 玉米品種
        5.1.2 試驗(yàn)菌株
        5.1.3 基質(zhì)及其他材料
        5.1.4 促生菌株接種效果試驗(yàn)
    5.2 結(jié)果與分析
    5.3 討論
第六章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]野生稻內(nèi)生固氮菌多樣性研究進(jìn)展[J]. 劉麗輝,蔣慧敏,王佩旋,唐小鈺,彭桂香,譚志遠(yuǎn).  生物技術(shù)進(jìn)展. 2017(06)
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博士論文
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碩士論文
[1]玉米根際及不同部位內(nèi)生固氮菌分離及其多樣性研究[D]. 呂翻洋.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
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[3]鐵載體高產(chǎn)菌的篩選及鐵載體的分離純化[D]. 門晉名.青島科技大學(xué) 2013
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[6]應(yīng)用高通量測(cè)序分析母嬰皮膚細(xì)菌群落多樣性[D]. 曾丹寧.復(fù)旦大學(xué) 2012
[7]高通量篩選和鑒定具ACC脫氨酶的細(xì)菌[D]. 李鄭義.浙江大學(xué) 2011
[8]應(yīng)用454測(cè)序技術(shù)分析菌群結(jié)構(gòu)的方法學(xué)研究[D]. 華蔚穎.上海交通大學(xué) 2010
[9]甘蔗內(nèi)生固氮菌的分離鑒定及16SrRNA基因克隆和序列分析[D]. 周發(fā)俊.福建師范大學(xué) 2009
[10]甘蔗內(nèi)生固氮菌的分離與鑒定[D]. 蘇俊波.廣西大學(xué) 2006



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