本學(xué)位論文以桔小實(shí)蠅Bactrocera dorsalis （Hendel）為研究對(duì)象,綜合運(yùn)用殺蟲(chóng)劑生物測(cè)定、抗性選育、生化分析及分子生物學(xué)等相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù),在室內(nèi)對(duì)桔小實(shí)蠅進(jìn)行馬拉硫磷抗性選育的基礎(chǔ)上,進(jìn)行了代謝抗性相關(guān)生理生化機(jī)制的研究,旨在延長(zhǎng)有機(jī)磷類(lèi)殺蟲(chóng)劑的使用時(shí)間,同時(shí)為田間監(jiān)測(cè)和治理桔小實(shí)蠅抗藥性提供策略。此外,結(jié)合qPCR技術(shù)明確了桔小實(shí)蠅3種代謝酶共11個(gè)基因在不同發(fā)育階段和不同組織的表達(dá)模式,初步解析了桔小實(shí)蠅對(duì)馬拉硫磷產(chǎn)生代謝抗性的分子機(jī)制。主要的研究結(jié)果如下：1桔小實(shí)蠅室內(nèi)馬拉硫磷抗性品系選育對(duì)桔小實(shí)蠅室內(nèi)種群進(jìn)行了馬拉硫磷抗性選育。其中,未逐代連續(xù)用藥狀態(tài)下篩選25代,其抗性倍數(shù)僅增長(zhǎng)了8.89倍；此后進(jìn)行逐代連續(xù)用藥篩選,13代后,抗性增長(zhǎng)至21.10倍,達(dá)中抗水平；交互抗性測(cè)定結(jié)果顯示,桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性品系對(duì)辛硫磷、毒死蜱、高效氯氰菊酯、阿維菌素和氟蟲(chóng)腈等藥劑產(chǎn)生了不同程度的交互抗性,其中對(duì)辛硫磷、毒死蜱和高效氯氰菊酯的抗性倍數(shù)分別達(dá)15.80、14.14和4.14倍。2桔小實(shí)蠅對(duì)馬拉硫磷代謝抗性的生化機(jī)制研究2.1桔小實(shí)蠅不同發(fā)育階段3種代謝酶活性比較... 

【文章來(lái)源】：西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：81 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1 桔小實(shí)蠅的發(fā)生及危害
    2 桔小實(shí)蠅抗藥性研究概況
        2.1 桔小實(shí)蠅抗藥性的發(fā)展
        2.2 桔小實(shí)蠅抗性機(jī)制的研究
    3 有機(jī)磷類(lèi)殺蟲(chóng)劑的特點(diǎn)及作用機(jī)理
        3.1 有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑作用特點(diǎn)
        3.2 有機(jī)磷殺蟲(chóng)劑作用機(jī)理
    4 昆蟲(chóng)對(duì)有機(jī)磷類(lèi)殺蟲(chóng)劑的代謝抗性機(jī)制
        4.1 羧酸酯酶介導(dǎo)的有機(jī)磷類(lèi)殺蟲(chóng)劑的抗性機(jī)制
        4.2 GSTs介導(dǎo)的有機(jī)磷類(lèi)殺蟲(chóng)劑的抗性機(jī)制
        4.3 細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的有機(jī)磷類(lèi)殺蟲(chóng)劑的抗性機(jī)制
    5 馬拉硫磷作用機(jī)理及抗性研究
引言
第二章 桔小實(shí)蠅抗馬拉硫磷品系的選育
    1 材料與方法
        1.1 供試蟲(chóng)源
        1.2 主要試劑
        1.3 主要儀器
        1.4 室內(nèi)毒力測(cè)定
        1.5 抗性篩選
    2 結(jié)果與分析
        2.1 桔小實(shí)蠅對(duì)馬拉硫磷的抗性篩選
        2.2 交互抗性的測(cè)定
    3 討論
第三章 桔小實(shí)蠅對(duì)馬拉硫磷代謝抗性的生化機(jī)制研究
    第一節(jié) 桔小實(shí)蠅不同發(fā)育階段3種代謝酶活性測(cè)定
        1 材料與方法
            1.1 供試蟲(chóng)源
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 樣品制備
            1.5 蛋白含量測(cè)定
            1.6 CarEs活性測(cè)定
            1.7 GSTs活性測(cè)定
            1.8 P450s活性測(cè)定
        2 結(jié)果與分析
            2.1 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系不同發(fā)育階段CarEs的活性
            2.2 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系不同發(fā)育階段GSTs的活性
            2.3 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系不同發(fā)育階段P450s的活性
        3 討論
    第二節(jié) 桔小實(shí)蠅成蟲(chóng)不同組織3種代謝酶活性測(cè)定
        1 材料與方法
            1.1 供試蟲(chóng)源
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 桔小實(shí)蠅成蟲(chóng)組織的解剖
            1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果與分析
            2.1 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系成蟲(chóng)不同組織CarEs的活性
            2.2 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系成蟲(chóng)不同組織GSTs的活性
            2.3 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系成蟲(chóng)不同組織P450s的活性
        3 討論
    第三節(jié) 桔小實(shí)蠅幼蟲(chóng)不同組織3種代謝酶活性測(cè)定
        1 材料與方法
            1.1 供試蟲(chóng)源
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 桔小實(shí)蠅幼蟲(chóng)組織的解剖
            1.5 實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果與分析
            2.1 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系幼蟲(chóng)不同組織CarEs的活性
            2.2 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系幼蟲(chóng)不同組織GSTs的活性
            2.3 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系幼蟲(chóng)不同組織P450s的活性
        3 討論
第四章 桔小實(shí)蠅解毒代謝酶基因的表達(dá)模式解析
    第一節(jié) 桔小實(shí)蠅不同發(fā)育階段3種解毒代謝酶基因表達(dá)模式解析
        1 材料與方法
            1.1 供試蟲(chóng)源
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 引物設(shè)計(jì)
            1.5 桔小實(shí)蠅不同發(fā)育階段RNA提取及第一鏈cDNA合成
            1.6 定量PCR的引物擴(kuò)增效率和熔解曲線(xiàn)分析
            1.7 定量PCR
            1.8 數(shù)據(jù)分析方法
        2 結(jié)果與分析
            2.1 定量引物擴(kuò)增效率及其擴(kuò)增產(chǎn)物的熔解曲線(xiàn)
            2.2 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系2個(gè)CarEs基因在不同發(fā)育階段的表達(dá)模式
            2.3 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系4個(gè)GSTs基因在不同發(fā)育階段的表達(dá)模式
            2.4 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系5個(gè)P450s基因在不同發(fā)育階段的表達(dá)模式
        3 討論
    第二節(jié) 桔小實(shí)蠅不同組織3種解毒代謝酶基因表達(dá)模式解析
        1 材料與方法
            1.1 供試蟲(chóng)源
            1.2 主要試劑
            1.3 主要儀器
            1.4 桔小實(shí)蠅成蟲(chóng)組織(馬氏管、中腸和脂肪體)的解剖
            1.5 桔小實(shí)蠅不同組織RNA提取
            1.6 實(shí)驗(yàn)方法
        2 結(jié)果與分析
            2.1 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系2個(gè)CarEs基因在不同組織的表達(dá)模式
            2.2 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系4個(gè)GSTs基因在不同組織的表達(dá)模式
            2.3 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性和敏感品系5個(gè)P450s基因在不同組織的表達(dá)模式
        3 討論
第五章 主要結(jié)果、結(jié)論與研究展望
    1 主要結(jié)果與結(jié)論
        1.1 桔小實(shí)蠅抗性品系選育及交互抗性
        1.2 桔小實(shí)蠅馬拉硫磷代謝抗性的生化機(jī)制研究
        1.3 桔小實(shí)蠅解毒代謝酶基因表達(dá)模式解析
    2 研究展望
        2.1 繼續(xù)選育馬拉硫磷抗性品系,提高抗性倍數(shù)
        2.2 開(kāi)展桔小實(shí)蠅馬拉硫磷抗性品系生態(tài)適合度的研究
        2.3 補(bǔ)充代謝抗性機(jī)制研究數(shù)據(jù)
        2.4 靶標(biāo)抗性機(jī)制的研究
參考文獻(xiàn)
在讀期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]桔小實(shí)蠅對(duì)多殺霉素的抗藥性風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J]. 李培征,陸永躍,梁廣文,曾玲.  環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2012(04)
[2]桔小實(shí)蠅電壓門(mén)控鈉離子通道基因cDNA克隆及其生物信息學(xué)分析[J]. 蔣玄趙,魏丹丹,申光茂,豆威,王進(jìn)軍.  中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2012(19)
[3]5種引誘劑對(duì)桔小實(shí)蠅的引誘效果[J]. 梁關(guān)生,程?hào)|美.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(13)
[4]桔小實(shí)蠅CYP4D46的克隆及其組織特異性表達(dá)研究[J]. 黃勇,申光茂,劉麗,熊賽,蔣紅波,王進(jìn)軍.  環(huán)境昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2010(02)
[5]桔小實(shí)蠅的綜合治理[J]. 鄭重祿.  中國(guó)南方果樹(shù). 2009(03)
[6]棉鈴蟲(chóng)羧酸酯酶基因的克隆、序列分析及組織表達(dá)[J]. 王東,李兵,管京敏,趙華強(qiáng),陳玉華,沈衛(wèi)德.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2008(09)
[7]桔小實(shí)蠅實(shí)驗(yàn)種群對(duì)敵百蟲(chóng)、高效氯氰菊酯和阿維菌素的抗性增長(zhǎng)規(guī)律[J]. 潘志萍,陸永躍,曾玲,曾鑫年.  昆蟲(chóng)學(xué)報(bào). 2008(06)
[8]廣州地區(qū)桔小實(shí)蠅的發(fā)生與綜合防治關(guān)鍵措施[J]. 梁帆,梁廣勤,趙菊鵬,周慶賢,胡學(xué)難,劉志斌,歐陽(yáng)漢泉,梁振宇.  廣東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2008(03)
[9]家蠶谷胱甘肽硫-轉(zhuǎn)移酶的組織分布及發(fā)育期變化規(guī)律[J]. 侯成香,桂仲爭(zhēng).  蠶業(yè)科學(xué). 2007(03)
[10]華南地區(qū)桔小實(shí)蠅抗藥性動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)[J]. 章玉蘋(píng),曾玲,陸永躍,梁廣文.  華南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2007(03)

博士論文
[1]桔小實(shí)蠅消化和解毒代謝相關(guān)基因鑒定及其對(duì)藥劑脅迫的應(yīng)激反應(yīng)[D]. 申光茂.西南大學(xué) 2013
[2]桔小實(shí)蠅GSTs生化及分子毒理學(xué)特性研究[D]. 胡飛.西南大學(xué) 2012
[3]3種書(shū)虱酯酶基因的克隆及其mRNA表達(dá)水平研究[D]. 唐培安.西南大學(xué) 2009

碩士論文
[1]桔小實(shí)蠅對(duì)常用殺蟲(chóng)劑的敏感性及其3種解毒酶酶學(xué)特性研究[D]. 王京京.西南大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3432375