草莓重茬病原菌的分離及其拮抗菌的篩選與應(yīng)用
發(fā)布時間:2021-07-02 12:34
為節(jié)省生產(chǎn)成本,利用大棚設(shè)施連年栽培草莓在一些地方很普遍,相應(yīng)地也產(chǎn)生了較嚴(yán)重的草莓重茬病。本文通過對山東省臨沂市典型草莓種植大棚進(jìn)行取樣分析,旨在明確草莓根腐病病原菌的種類及其生物學(xué)特性,為生物防控草莓根腐病提供科學(xué)依據(jù)。采用的研究方法是:以草莓根腐病病原菌為靶標(biāo)病原菌,采用生物防治的方法進(jìn)行拮抗菌的篩選,并對篩選的拮抗菌進(jìn)行鑒定及生物學(xué)特性研究,將拮抗菌應(yīng)用于盆栽試驗(yàn)和大田試驗(yàn)中,對拮抗菌的抗病促生效果進(jìn)行了初步評價。先將主要研究結(jié)果如下:1)在發(fā)病草莓大棚采集大量發(fā)病植株,采用組織分離法獲得菌株ZH-G01,純化后通過形態(tài)學(xué)特征結(jié)合r DNA-ITS序列分析,對菌株ZH-G01進(jìn)行鑒定,結(jié)果表明:菌株ZH-G01平皿菌落正面呈白色絲絨狀,未產(chǎn)生色素,背面略微發(fā)黃,分生孢子4隔5個細(xì)胞,紡錘狀,中心3個褐色異色胞,頂部具有3根或4根附屬絲,尾部1根附屬絲;菌株ZH-G01的ITS序列與Gen Bank中新棒狀擬盤多毛孢Neopestalotiopsis clavispora的相似性達(dá)99%以上,結(jié)合形態(tài)學(xué)與分子生物學(xué)特征將病原菌鑒定為新棒狀擬盤多毛孢,Gen Bank登錄號為MN5...
【文章來源】:長江大學(xué)湖北省
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
接菌植株與未接菌植株根系對比
結(jié)果分析224.1.3菌株ZH-G01的致病性草莓植株根部活體接病原菌7d后,葉片出現(xiàn)褐斑、卷曲,生長受阻;接菌15d后,葉片逐漸卷曲萎蔫,褐斑區(qū)域增加;接菌22d后,老葉基本枯萎,新葉未受影響;接菌30d后,地上部全部萎蔫,根部中柱部分表面發(fā)黑,切開內(nèi)部中心呈褐色,2/3不定根發(fā)黑腐爛;對照組草莓植株健康無病癥。將對照組與試驗(yàn)組草莓植株連根拔出,帶回實(shí)驗(yàn)室采用組織分離法分離培養(yǎng)對照組和試驗(yàn)組的不定根和中柱部分,發(fā)現(xiàn)對照處理的根部組織中只有細(xì)菌和其它真菌,試驗(yàn)組平皿上菌落呈白色絲絨狀,平皿形態(tài)與新棒狀擬盤多毛孢Neopestalotiopsisclavispora極為相似,鏡檢其分生孢子,與新棒狀擬盤多毛孢Neopestalotiopsisclavispora分生孢子的形態(tài)完全一致。通過柯赫氏法則證明菌株ZH-G01是引起草莓根腐病的病原菌。將對照處理中的健康植株和試驗(yàn)處理中的發(fā)病植株的葉片切開,置于顯微鏡(10×4)下觀測,對照組葉肉組織完整,表現(xiàn)為綠色;試驗(yàn)組發(fā)病植株的葉肉組織受到破壞,表現(xiàn)為黃色或褐色,周圍可觀察到有病原菌的分生孢子(圖4-4)。a:未接菌植株根系;b:接菌植株根系。a:Rootoftheuninoculatedplant;b:Rootoftheinoculatedplant.圖4-3接菌植株與未接菌植株根系對比Fig.4-3Comparisonofrootsystembetweeninoculatedanduninoculatedplantsaba:未接菌植株葉片;b:接菌植株葉片。a:Leafoftheuninoculatedplant;b:Leafoftheinoculatedplant.圖4-4接菌植株與未接菌植株葉片對比Fig.4-4Comparisonofleafbetweeninoculatedanduninoculatedplants
結(jié)果分析284.3拮抗菌的篩選及鑒定4.3.1拮抗菌的篩選結(jié)果經(jīng)純化的72株拮抗菌(編號0#-70#、Y1-7)與靶標(biāo)病原菌Neopestalotiopsisclavispora進(jìn)行重復(fù)多次的平皿對峙試驗(yàn),最終篩選出拮抗效果好且拮抗效果穩(wěn)定的3株菌,編號分別為17#、27#和Y1-7。平皿對峙效果如圖4-7。由圖4-8可以看出拮抗菌導(dǎo)致病原菌菌絲畸形,菌絲分支增多,菌絲彎曲、畸形,生長停滯。初步判定供試生防菌對目標(biāo)病原菌有抑制作用。圖4-7草莓根腐病病原菌與拮抗菌平皿對峙圖Fig.4-7Antagonisticactivitiesbetweenco-cultureNeopestalotiopsisclavisporaandantagonisticstrains.圖4-8病原菌絲形態(tài)鏡檢圖Fig.4-8Microscopicexaminationofpathogenichypha
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]復(fù)合促生菌對小麥苗期生長和土壤酶活的影響[J]. 王夢園,杜延全,朱建強(qiáng). 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報. 2019(10)
[2]芽孢桿菌BS-6基于全基因組數(shù)據(jù)的分類鑒定及拮抗能力分析[J]. 戚家明,孫杉杉,張東旭,徐志文,徐延平. 生物技術(shù)通報. 2019(10)
[3]九種殺菌劑對新擬盤多毛孢病菌的室內(nèi)毒力作用[J]. 溫浩,魏佳爽,張桂軍,畢揚(yáng),閆哲. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2019(04)
[4]復(fù)合微生物菌劑對大棚草莓生長和品質(zhì)的影響[J]. 周艷孔,倪秀紅,王紅彬. 安徽農(nóng)學(xué)通報. 2019(10)
[5]貝萊斯芽孢桿菌3A3-15生防和促生機(jī)制[J]. 劉雪嬌,李紅亞,李術(shù)娜,朱寶成,高同國. 河北大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2019(03)
[6]藍(lán)莓葉斑病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性[J]. 薛德勝,李保華,練森,梁文星,王彩霞. 植物保護(hù)學(xué)報. 2019(02)
[7]防治藍(lán)莓棒狀擬盤多毛孢菌化學(xué)藥劑的室內(nèi)篩選[J]. 薛德勝,邵兆浩,李保華,王彩霞. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(09)
[8]落羽杉赤枯病病原菌的分離鑒定及生物學(xué)特性分析[J]. 張凡,馮婷,韓正敏,殷云龍,華建峰,於朝廣. 植物保護(hù)學(xué)報. 2018(04)
[9]防治草莓炭疽病的芽胞桿菌組合的篩選[J]. 陳哲,黃靜,趙佳,梁宏. 中國生物防治學(xué)報. 2018(04)
[10]一株辣椒內(nèi)生拮抗細(xì)菌的篩選及初步鑒定[J]. 蔡長平,黃軍,曾艷,畢世宇,黃彬彬,郭照輝,劉清術(shù). 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(07)
博士論文
[1]解淀粉芽孢桿菌SQRT3防控番茄土傳青枯病及其機(jī)理研究[D]. 李春雨.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]抗甜瓜枯萎病生防菌及其生物有機(jī)肥的生防機(jī)理研究[D]. 趙青云.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]榆陽區(qū)岔河則鄉(xiāng)土地開發(fā)項(xiàng)目設(shè)計與管理研究[D]. 盛曉磊.西安理工大學(xué) 2017
[2]菜豆樹葉斑病病原學(xué)及藥劑敏感性研究[D]. 王玉.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]越西縣古二鄉(xiāng)土地整理規(guī)劃及效益分析[D]. 劉碩.成都理工大學(xué) 2016
[4]葡萄有益內(nèi)生芽孢桿菌的篩選及其作用機(jī)制研究[D]. 王艷霞.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[5]對作物具有促生和防病作用的細(xì)菌組合的篩選[D]. 王素英.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
本文編號:3260474
【文章來源】:長江大學(xué)湖北省
【文章頁數(shù)】:75 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
接菌植株與未接菌植株根系對比
結(jié)果分析224.1.3菌株ZH-G01的致病性草莓植株根部活體接病原菌7d后,葉片出現(xiàn)褐斑、卷曲,生長受阻;接菌15d后,葉片逐漸卷曲萎蔫,褐斑區(qū)域增加;接菌22d后,老葉基本枯萎,新葉未受影響;接菌30d后,地上部全部萎蔫,根部中柱部分表面發(fā)黑,切開內(nèi)部中心呈褐色,2/3不定根發(fā)黑腐爛;對照組草莓植株健康無病癥。將對照組與試驗(yàn)組草莓植株連根拔出,帶回實(shí)驗(yàn)室采用組織分離法分離培養(yǎng)對照組和試驗(yàn)組的不定根和中柱部分,發(fā)現(xiàn)對照處理的根部組織中只有細(xì)菌和其它真菌,試驗(yàn)組平皿上菌落呈白色絲絨狀,平皿形態(tài)與新棒狀擬盤多毛孢Neopestalotiopsisclavispora極為相似,鏡檢其分生孢子,與新棒狀擬盤多毛孢Neopestalotiopsisclavispora分生孢子的形態(tài)完全一致。通過柯赫氏法則證明菌株ZH-G01是引起草莓根腐病的病原菌。將對照處理中的健康植株和試驗(yàn)處理中的發(fā)病植株的葉片切開,置于顯微鏡(10×4)下觀測,對照組葉肉組織完整,表現(xiàn)為綠色;試驗(yàn)組發(fā)病植株的葉肉組織受到破壞,表現(xiàn)為黃色或褐色,周圍可觀察到有病原菌的分生孢子(圖4-4)。a:未接菌植株根系;b:接菌植株根系。a:Rootoftheuninoculatedplant;b:Rootoftheinoculatedplant.圖4-3接菌植株與未接菌植株根系對比Fig.4-3Comparisonofrootsystembetweeninoculatedanduninoculatedplantsaba:未接菌植株葉片;b:接菌植株葉片。a:Leafoftheuninoculatedplant;b:Leafoftheinoculatedplant.圖4-4接菌植株與未接菌植株葉片對比Fig.4-4Comparisonofleafbetweeninoculatedanduninoculatedplants
結(jié)果分析284.3拮抗菌的篩選及鑒定4.3.1拮抗菌的篩選結(jié)果經(jīng)純化的72株拮抗菌(編號0#-70#、Y1-7)與靶標(biāo)病原菌Neopestalotiopsisclavispora進(jìn)行重復(fù)多次的平皿對峙試驗(yàn),最終篩選出拮抗效果好且拮抗效果穩(wěn)定的3株菌,編號分別為17#、27#和Y1-7。平皿對峙效果如圖4-7。由圖4-8可以看出拮抗菌導(dǎo)致病原菌菌絲畸形,菌絲分支增多,菌絲彎曲、畸形,生長停滯。初步判定供試生防菌對目標(biāo)病原菌有抑制作用。圖4-7草莓根腐病病原菌與拮抗菌平皿對峙圖Fig.4-7Antagonisticactivitiesbetweenco-cultureNeopestalotiopsisclavisporaandantagonisticstrains.圖4-8病原菌絲形態(tài)鏡檢圖Fig.4-8Microscopicexaminationofpathogenichypha
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]復(fù)合促生菌對小麥苗期生長和土壤酶活的影響[J]. 王夢園,杜延全,朱建強(qiáng). 中國農(nóng)業(yè)科技導(dǎo)報. 2019(10)
[2]芽孢桿菌BS-6基于全基因組數(shù)據(jù)的分類鑒定及拮抗能力分析[J]. 戚家明,孫杉杉,張東旭,徐志文,徐延平. 生物技術(shù)通報. 2019(10)
[3]九種殺菌劑對新擬盤多毛孢病菌的室內(nèi)毒力作用[J]. 溫浩,魏佳爽,張桂軍,畢揚(yáng),閆哲. 農(nóng)藥學(xué)學(xué)報. 2019(04)
[4]復(fù)合微生物菌劑對大棚草莓生長和品質(zhì)的影響[J]. 周艷孔,倪秀紅,王紅彬. 安徽農(nóng)學(xué)通報. 2019(10)
[5]貝萊斯芽孢桿菌3A3-15生防和促生機(jī)制[J]. 劉雪嬌,李紅亞,李術(shù)娜,朱寶成,高同國. 河北大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2019(03)
[6]藍(lán)莓葉斑病病原菌鑒定及其生物學(xué)特性[J]. 薛德勝,李保華,練森,梁文星,王彩霞. 植物保護(hù)學(xué)報. 2019(02)
[7]防治藍(lán)莓棒狀擬盤多毛孢菌化學(xué)藥劑的室內(nèi)篩選[J]. 薛德勝,邵兆浩,李保華,王彩霞. 山東農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(09)
[8]落羽杉赤枯病病原菌的分離鑒定及生物學(xué)特性分析[J]. 張凡,馮婷,韓正敏,殷云龍,華建峰,於朝廣. 植物保護(hù)學(xué)報. 2018(04)
[9]防治草莓炭疽病的芽胞桿菌組合的篩選[J]. 陳哲,黃靜,趙佳,梁宏. 中國生物防治學(xué)報. 2018(04)
[10]一株辣椒內(nèi)生拮抗細(xì)菌的篩選及初步鑒定[J]. 蔡長平,黃軍,曾艷,畢世宇,黃彬彬,郭照輝,劉清術(shù). 湖南農(nóng)業(yè)科學(xué). 2018(07)
博士論文
[1]解淀粉芽孢桿菌SQRT3防控番茄土傳青枯病及其機(jī)理研究[D]. 李春雨.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]抗甜瓜枯萎病生防菌及其生物有機(jī)肥的生防機(jī)理研究[D]. 趙青云.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
碩士論文
[1]榆陽區(qū)岔河則鄉(xiāng)土地開發(fā)項(xiàng)目設(shè)計與管理研究[D]. 盛曉磊.西安理工大學(xué) 2017
[2]菜豆樹葉斑病病原學(xué)及藥劑敏感性研究[D]. 王玉.吉林農(nóng)業(yè)大學(xué) 2017
[3]越西縣古二鄉(xiāng)土地整理規(guī)劃及效益分析[D]. 劉碩.成都理工大學(xué) 2016
[4]葡萄有益內(nèi)生芽孢桿菌的篩選及其作用機(jī)制研究[D]. 王艷霞.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
[5]對作物具有促生和防病作用的細(xì)菌組合的篩選[D]. 王素英.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2003
本文編號:3260474
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