桔小實(shí)蠅Bactrocera dorsalis（Hendel）是一種世界性檢疫害蟲(chóng),具有寄主范圍廣、擴(kuò)散速度快、適應(yīng)力強(qiáng)等特點(diǎn),對(duì)我國(guó)水果和蔬菜等重要經(jīng)濟(jì)作物構(gòu)成嚴(yán)重威脅。輻照不育技術(shù)能夠一定程度上控制桔小實(shí)蠅種群,但經(jīng)輻射的昆蟲(chóng)存在穩(wěn)定性差、交配競(jìng)爭(zhēng)力低、生活史短等缺點(diǎn)。轉(zhuǎn)基因不育技術(shù)是近幾年提出的防控害蟲(chóng)的新思路,結(jié)合piggyBac的轉(zhuǎn)座功能和四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng),通過(guò)驅(qū)動(dòng)載體（driver）中的胚胎早期表達(dá)基因的啟動(dòng)子調(diào)控效應(yīng)載體（effector）中細(xì)胞凋亡基因的表達(dá),在不存在四環(huán)素時(shí)可以啟動(dòng)昆蟲(chóng)胚胎期“死亡開(kāi)關(guān)”,使其在胚胎期死亡,從而達(dá)到“不育”目的。在果蠅上首次獲得了胚胎條件致死品系后,該系統(tǒng)已被成功轉(zhuǎn)移到實(shí)蠅科的地中海實(shí)蠅和加勒比按實(shí)蠅上,這說(shuō)明在桔小實(shí)蠅上建立轉(zhuǎn)基因不育技術(shù)體系具有可行性。本研究首次克隆得到了構(gòu)建桔小實(shí)蠅胚胎條件致死品系所需的基本分子元件：與胚胎期囊胚細(xì)胞化相關(guān)的serendipity alpha （srya）基因的cDNA全長(zhǎng)及其5’端上游序列和與細(xì)胞凋亡相關(guān)的頭部退化缺陷基因（head involution defective, hid）,并利用得到的... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

四環(huán)素可抑制的雙元件致死系統(tǒng)及單元件致死系統(tǒng)(GongeZfl/.，2005)

Schetelig et a/.(2009)以piggyBac為轉(zhuǎn)座子利用地中海實(shí)繩的srya基因與hid基因分別構(gòu)建了驅(qū)動(dòng)載體與效應(yīng)載體(圖1.2)。5

產(chǎn)生tTA蛋白，該蛋白可結(jié)合TRE引發(fā)下游致死基因的表達(dá)，使子代昆蟲(chóng)在胚胎期死亡。但是，在有四環(huán)素的情況下，tTA蛋白無(wú)法作用于TRE,致死基因的表達(dá)被抑制(圖1.3)。目前在實(shí)驗(yàn)室，依靠向昆蟲(chóng)詞料中添加四環(huán)素來(lái)維持轉(zhuǎn)基因品系。無(wú)四環(huán)素條件下_ “[‘ V [一 ?參胚胎時(shí)—異 子 ITA四環(huán)素四環(huán)素條件下 i[^ il H ‘ ^ ? [ >胚胎時(shí)期特、一tTA ..圖1.3基于四環(huán)素可抑制的雙元件系統(tǒng)的胚胎條件致死Fig. 1.3 Embryonic conditional lethality based on tetracycline-repressible two-component system值得一提的是，在果繩中，若將交配前的驅(qū)動(dòng)品系與效應(yīng)品系成蟲(chóng)用含四環(huán)素的飼料喂養(yǎng)，由于母體傳遞效應(yīng)，交配后產(chǎn)生的子代受殘余四環(huán)素影響關(guān)閉了胚胎致死系統(tǒng)，卵期沒(méi)有致死效果。但是在地中海實(shí)繩中，母體的殘余四環(huán)素對(duì)子代胚胎致死系統(tǒng)的關(guān)閉不起作用，依然能達(dá)到胚胎致死的效果(Schetelig and Handler, 2012a)。這就為害蟲(chóng)的野外釋放試驗(yàn)提出了新的要求，艮口釋放前最后一代成蟲(chóng)是否需要在四環(huán)素培養(yǎng)基上飼養(yǎng)，或者需要用多大濃度的四環(huán)素飼養(yǎng)取決于不同的昆蟲(chóng)，甚至同種昆蟲(chóng)的不同品系也有區(qū)別。目前該系統(tǒng)的致死效應(yīng)已在果繩及實(shí)幡屬的兩種昆蟲(chóng)上驗(yàn)證

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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