沙漠土壤擬諾卡氏菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究
發(fā)布時(shí)間:2021-06-02 21:25
本論文以采自新疆塔克拉瑪干沙漠南麓的土壤稀有放線菌擬諾卡氏菌為研究對(duì)象,采用大孔吸附樹(shù)脂和高效液相色譜,建立了空白培養(yǎng)基與菌株發(fā)酵次級(jí)代謝產(chǎn)物指紋圖譜,以此為基礎(chǔ),開(kāi)展了以下三方面的研究:一、對(duì)6株分離自我國(guó)新疆特殊生境具有抗金黃色葡萄球菌活性的擬諾卡式菌進(jìn)行平行發(fā)酵,通過(guò)相同的處理方法,建立了空白培養(yǎng)基與次級(jí)代謝產(chǎn)物對(duì)比以及各菌株間對(duì)比的指紋圖譜,為后續(xù)新抗生素發(fā)現(xiàn)奠定了基礎(chǔ)。二、通過(guò)建立指紋圖譜,發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生Amicoumacin的目標(biāo)菌株R2A14A-1。對(duì)菌株進(jìn)行發(fā)酵,從發(fā)酵產(chǎn)物中分離純化得到具有抗金黃色葡萄球菌活性的二氫異香豆素類化合物FFF-13,經(jīng)過(guò)現(xiàn)代波譜分析結(jié)合文獻(xiàn)比對(duì),確定該化合物為Amicoumacin B,結(jié)構(gòu)如圖1所示。通過(guò)文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)此化合物確實(shí)是首次在擬諾卡氏菌中得到報(bào)道。圖1Amicoumacin B的化學(xué)結(jié)構(gòu)式三、由于本文是首次從擬諾卡氏菌中分離得到Amicoumacin類化合物,為了驗(yàn)證該結(jié)論的可靠性,我們對(duì)菌株R2A14A-1進(jìn)行了形態(tài)特征,培養(yǎng)特征,最適生長(zhǎng)鹽濃度,最適生長(zhǎng)溫度,生理生化特征,16S rRNA序列分析等多方面的研究。研究結(jié)果表明:其各...
【文章來(lái)源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略表一覽
綜述
1、吡喃酮類
2、聚酮類大環(huán)內(nèi)酯化合物
3、肽類化合物
4、吡喃萘醌類化合物
5、其他抗生素類型
總結(jié)與展望
中文摘要
Abstract
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
2.1 主要儀器
2.2 主要試劑
2.3 菌株及培養(yǎng)基
2.3.1 6株具有抗金黃色葡萄球菌擬諾卡氏菌株
2.3.2 沙漠土壤放線菌R2A14A-1
2.3.3 放線菌保存發(fā)酵培養(yǎng)基
2.3.4 檢定菌(金黃色葡萄球菌)培養(yǎng)基
2.3.5 形態(tài)特征觀察培養(yǎng)基
2.3.6 鑒定菌
3 具有抗金黃色葡萄球菌活性的擬諾卡氏菌指紋圖譜的建立.
3.1 鑒定菌平皿的制備
3.2 實(shí)驗(yàn)用擬諾卡氏菌株的活化
3.3 擬諾卡氏菌株的發(fā)酵
3.4 大孔吸附樹(shù)脂的處理
3.5 發(fā)酵液的處理
3.6 空白培養(yǎng)基以及發(fā)酵產(chǎn)物不同洗脫部分指紋圖譜的建立
4 化合物FFF-13的分離鑒定
4.1 對(duì)選取的菌株R2A14A-1進(jìn)行個(gè)洗脫部分指紋圖譜的再鑒定
4.2 化合物FFF-13的分離純化
4.3 化合物FFF-13的結(jié)構(gòu)鑒定
5 菌株R2A14A-1的鑒別
5.1 形態(tài)特征
5.2 培養(yǎng)特征
5.3 鹽濃度及溫度耐受實(shí)驗(yàn)
5.4 (G+C)mol%含量測(cè)定
5.5 菌株R2A14A-1的分子分類
6 指紋圖譜結(jié)果
6.1 各個(gè)菌株的指紋圖譜
7 菌株R2A14A-1代謝產(chǎn)物
7.1 菌株R2A14A-1代謝產(chǎn)物指紋圖譜及活性追蹤
7.2 化合物FFF-13的分離純化
7.3 化合物FFF-13純度測(cè)定
7.4 化合物FFF-13的結(jié)構(gòu)鑒定
8 菌株R2A14A-1的分類鑒定
8.1 形態(tài)特征
8.2 培養(yǎng)特征及耐受實(shí)驗(yàn)
8.3 菌株系統(tǒng)發(fā)育分析
8.4 (G+C)mol%含量
討論
參考文獻(xiàn)
碩士期間參與發(fā)表的文章以及申請(qǐng)的專利
致謝
附表及附圖
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]稀有放線菌產(chǎn)生抗菌藥物的多樣性[J]. 李子強(qiáng),賈云宏,楊殿深. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2013(12)
[2]Amicoumacin類抗生素的研究進(jìn)展[J]. 韓曉艷,劉少偉,王飛飛,劉佳萌,陳川,胡辛欣,蔣忠科,游雪甫,尚廣東,張玉彬,孫承航. 國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè)). 2013(03)
[3]塔克拉瑪干沙漠南麓土壤放線菌資源勘探及抗菌活性篩選[J]. 董艷萍,郭琳,旭格拉·哈布丁,劉佳萌,陳川,蔣忠科,李昕,朱霞琳,曹存巍,張玉彬,孫承航. 中國(guó)抗生素雜志. 2013(04)
[4]羅布泊來(lái)源脹果甘草根際枯草芽孢桿菌GA21次生代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)與活性初步研究[J]. 靳婧,旭格拉·哈布丁,劉少偉,郭琳,蔣忠科,欒迎春,李展先,潘臻,孫承航. 中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù). 2012(01)
[5]塔克拉瑪干沙漠腹地胡楊林土壤細(xì)菌多樣性分析[J]. 包慧芳,王煒,王寧,房世杰,詹發(fā)強(qiáng). 微生物學(xué)報(bào). 2011(01)
[6]Chelex-100快速提取放線菌DNA作為PCR擴(kuò)增模板[J]. 周雙清,黃小龍,黃東益,胡新文,陳吉良. 生物技術(shù)通報(bào). 2010(02)
[7]塔克拉瑪干沙漠腹地梭梭(Haloxylon ammodendron)蒸騰耗水規(guī)律[J]. 許浩,張希明,閆海龍,孫紅葉,單立山. 生態(tài)學(xué)報(bào). 2008(08)
[8]稀有放線菌產(chǎn)生的抗生素[J]. 李一青,李艷瓊,李銘剛,李勤,趙江源,崔曉龍,彭謙,文孟良. 中國(guó)抗生素雜志. 2008(04)
[9]擬諾卡氏菌16S rRNA,gyrB,sod和rpoB基因的系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 楊玲玲,職曉陽(yáng),李文均. 微生物學(xué)報(bào). 2007(06)
[10]滄州高鹽環(huán)境嗜鹽放線菌多樣性研究[J]. 呂志堂,張利平,李艷華,石楠,李麗. 河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2006(01)
本文編號(hào):3210779
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【文章頁(yè)數(shù)】:68 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略表一覽
綜述
1、吡喃酮類
2、聚酮類大環(huán)內(nèi)酯化合物
3、肽類化合物
4、吡喃萘醌類化合物
5、其他抗生素類型
總結(jié)與展望
中文摘要
Abstract
1 前言
2 實(shí)驗(yàn)材料
2.1 主要儀器
2.2 主要試劑
2.3 菌株及培養(yǎng)基
2.3.1 6株具有抗金黃色葡萄球菌擬諾卡氏菌株
2.3.2 沙漠土壤放線菌R2A14A-1
2.3.3 放線菌保存發(fā)酵培養(yǎng)基
2.3.4 檢定菌(金黃色葡萄球菌)培養(yǎng)基
2.3.5 形態(tài)特征觀察培養(yǎng)基
2.3.6 鑒定菌
3 具有抗金黃色葡萄球菌活性的擬諾卡氏菌指紋圖譜的建立.
3.1 鑒定菌平皿的制備
3.2 實(shí)驗(yàn)用擬諾卡氏菌株的活化
3.3 擬諾卡氏菌株的發(fā)酵
3.4 大孔吸附樹(shù)脂的處理
3.5 發(fā)酵液的處理
3.6 空白培養(yǎng)基以及發(fā)酵產(chǎn)物不同洗脫部分指紋圖譜的建立
4 化合物FFF-13的分離鑒定
4.1 對(duì)選取的菌株R2A14A-1進(jìn)行個(gè)洗脫部分指紋圖譜的再鑒定
4.2 化合物FFF-13的分離純化
4.3 化合物FFF-13的結(jié)構(gòu)鑒定
5 菌株R2A14A-1的鑒別
5.1 形態(tài)特征
5.2 培養(yǎng)特征
5.3 鹽濃度及溫度耐受實(shí)驗(yàn)
5.4 (G+C)mol%含量測(cè)定
5.5 菌株R2A14A-1的分子分類
6 指紋圖譜結(jié)果
6.1 各個(gè)菌株的指紋圖譜
7 菌株R2A14A-1代謝產(chǎn)物
7.1 菌株R2A14A-1代謝產(chǎn)物指紋圖譜及活性追蹤
7.2 化合物FFF-13的分離純化
7.3 化合物FFF-13純度測(cè)定
7.4 化合物FFF-13的結(jié)構(gòu)鑒定
8 菌株R2A14A-1的分類鑒定
8.1 形態(tài)特征
8.2 培養(yǎng)特征及耐受實(shí)驗(yàn)
8.3 菌株系統(tǒng)發(fā)育分析
8.4 (G+C)mol%含量
討論
參考文獻(xiàn)
碩士期間參與發(fā)表的文章以及申請(qǐng)的專利
致謝
附表及附圖
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]稀有放線菌產(chǎn)生抗菌藥物的多樣性[J]. 李子強(qiáng),賈云宏,楊殿深. 中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2013(12)
[2]Amicoumacin類抗生素的研究進(jìn)展[J]. 韓曉艷,劉少偉,王飛飛,劉佳萌,陳川,胡辛欣,蔣忠科,游雪甫,尚廣東,張玉彬,孫承航. 國(guó)外醫(yī)藥(抗生素分冊(cè)). 2013(03)
[3]塔克拉瑪干沙漠南麓土壤放線菌資源勘探及抗菌活性篩選[J]. 董艷萍,郭琳,旭格拉·哈布丁,劉佳萌,陳川,蔣忠科,李昕,朱霞琳,曹存巍,張玉彬,孫承航. 中國(guó)抗生素雜志. 2013(04)
[4]羅布泊來(lái)源脹果甘草根際枯草芽孢桿菌GA21次生代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)與活性初步研究[J]. 靳婧,旭格拉·哈布丁,劉少偉,郭琳,蔣忠科,欒迎春,李展先,潘臻,孫承航. 中國(guó)醫(yī)藥生物技術(shù). 2012(01)
[5]塔克拉瑪干沙漠腹地胡楊林土壤細(xì)菌多樣性分析[J]. 包慧芳,王煒,王寧,房世杰,詹發(fā)強(qiáng). 微生物學(xué)報(bào). 2011(01)
[6]Chelex-100快速提取放線菌DNA作為PCR擴(kuò)增模板[J]. 周雙清,黃小龍,黃東益,胡新文,陳吉良. 生物技術(shù)通報(bào). 2010(02)
[7]塔克拉瑪干沙漠腹地梭梭(Haloxylon ammodendron)蒸騰耗水規(guī)律[J]. 許浩,張希明,閆海龍,孫紅葉,單立山. 生態(tài)學(xué)報(bào). 2008(08)
[8]稀有放線菌產(chǎn)生的抗生素[J]. 李一青,李艷瓊,李銘剛,李勤,趙江源,崔曉龍,彭謙,文孟良. 中國(guó)抗生素雜志. 2008(04)
[9]擬諾卡氏菌16S rRNA,gyrB,sod和rpoB基因的系統(tǒng)發(fā)育分析[J]. 楊玲玲,職曉陽(yáng),李文均. 微生物學(xué)報(bào). 2007(06)
[10]滄州高鹽環(huán)境嗜鹽放線菌多樣性研究[J]. 呂志堂,張利平,李艷華,石楠,李麗. 河北大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版). 2006(01)
本文編號(hào):3210779
本文鏈接:http://sikaile.net/kejilunwen/nykj/3210779.html
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