桃蚜報警信息素結合蛋白的鑒定及功能分析
發(fā)布時間:2021-04-27 16:52
桃蚜(Myzus persicae)是一種具有嚴重破壞性的多食性害蟲。除直接取食為害外,可以傳播100多種植物病毒病,包括馬鈴薯卷葉病毒,黃瓜花葉病毒。目前防治蚜蟲主要利用廣譜性的殺蟲劑,主要是有機磷酸酯,擬除蟲菊酯和新煙堿類殺蟲劑。殺蟲劑的過度使用不僅會使桃蚜產生抗藥性,而且會造成環(huán)境污染。因此,需要開發(fā)一種新型的蚜蟲防控技術。昆蟲利用它們靈敏的嗅覺器官,主要是觸角來感知世界。同其他昆蟲一樣,蚜蟲利用植物揮發(fā)物和物種間的特異性化學信號來定位寄主植物,交配和躲避天敵。如當蚜蟲受到外界攻擊時會釋放報警信息素來通知周圍其他的蚜蟲進行有效躲避,甚至攻擊捕食者。在嗅覺識別過程中,氣味結合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)和化學感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)扮演著重要角色。因此,我們可以通過挖掘桃蚜的嗅覺基因,闡明蚜蟲的嗅覺機制,從而阻斷蚜蟲的化學通訊達到害蟲防治的目的。本研究首先開發(fā)了桃蚜的人工飼料,并能成功飼養(yǎng)10代,這為開展后續(xù)試驗提供了統(tǒng)一化的標準試蟲。通過桃蚜的基因組和轉錄組分析,鑒定到OBPs和CSPs基因各9個。通過...
【文章來源】:中國農業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
1.1 昆蟲人工飼料的研究概況
1.2 昆蟲觸角感受氣味分子的機制
1.3 昆蟲氣味結合蛋白的研究進展
1.3.1 氣味結合蛋白的鑒定
1.3.2 氣味結合蛋白的結構和分布
1.3.3 氣味結合蛋白的功能研究
1.4 昆蟲化學感受蛋白的研究進展
1.4.1 化學感受蛋白的鑒定
1.4.2 化學感受蛋白的結構和分布
1.4.3 化學感受蛋白的功能研究
1.5 研究目的和意義
1.6 研究內容
第二章 桃蚜人工飼料的開發(fā)
2.1 實驗材料
2.1.1 供試昆蟲
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設備
2.2 試驗方法
2.2.1 飼料配方
2.2.2 飼蚜裝置
2.2.3 人工飼料和煙草飼養(yǎng)的桃蚜對EBF的行為學測定
2.2.4 人工飼料和煙草飼養(yǎng)的桃蚜對EBF的觸角EAG電生理反應測定
2.3 結果與分析
2.3.1 桃蚜人工飼料飼養(yǎng)效果評價
2.3.2 行為學測定結果
2.3.3 EAG電生理反應測定結果
2.4 討論
第三章 桃蚜OBPs和CSPs基因的鑒定及比較分析
3.1 實驗材料
3.1.1 供試昆蟲
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要儀器設備
3.2 實驗方法
3.2.1 桃蚜OBPs和CSPs基因在轉錄組中的鑒定
3.2.1.1 樣品的收集
3.2.1.2 總RNA提取
3.2.1.3 CDNA文庫的構建和測序
3.2.1.4 生物信息學分析
3.2.1.5 桃蚜OBPS和CSPS基因在轉錄組和基因組中的鑒定
3.2.1.6 桃蚜OBPS和CSPS基因的克隆驗證
3.2.2 序列和進化分析
3.2.3 桃蚜OBPs和CSPs基因在不同組織的表達分析
3.2.4 桃蚜OBPs和CSPs的基因結構分析
3.2.5 Motif分析
3.3 結果與分析
3.3.1 轉錄組測序及功能注釋
3.3.2 桃蚜OBPs和CSPs基因在轉錄組和基因組中的鑒定
3.3.3 序列和進化分析
3.3.4 桃蚜OBPs和CSPs基因在不同組織中的表達分析
3.3.5 桃蚜OBPs和CSPs的基因結構分析
3.3.6 Motif分析
3.4 討論
第四章 桃蚜氣味結合蛋白MperOBPs的克隆、表達及結合特性分析
4.1 實驗材料
4.1.1 供試昆蟲
4.1.2 主要試劑
4.1.3 主要儀器設備
4.2 實驗方法
4.2.1 cDNA模板的制備
4.2.2 目的基因的克隆和表達
4.2.3 蛋白純化
4.2.4 熒光競爭結合實驗
4.3 結果與分析
4.3.1 桃蚜氣味結合蛋白MperOBPs的克隆、表達和純化
4.3.2 桃蚜氣味結合蛋白MperOBPs結合特性分析
4.4 討論
第五章 全文結論
參考文獻
致謝
作者簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國蚜蟲類昆蟲物種多樣性與分布特點(半翅目,蚜總科)[J]. 劉征,黃曉磊,姜立云,喬格俠. 動物分類學報. 2009(02)
[2]蚜蟲寄主植物與取食部位的多樣性[J]. 方燕,喬格俠,張廣學. 動物分類學報. 2006(01)
[3]昆蟲觸角氣味結合蛋白的研究進展[J]. 王桂榮,郭予元,吳孔明. 昆蟲學報. 2002(01)
[4]麥長管蚜全純人工飼料的研究[J]. 陳巨蓮,倪漢祥,丁紅建,孫京瑞. 中國農業(yè)科學. 2000(03)
[5]以化學純飼料飼養(yǎng)北京的桃蚜[J]. 柯禮道,欽俊德. 昆蟲學報. 1983(01)
[6]昆蟲的人工飼料[J]. 忻介六. 昆蟲知識. 1976(02)
碩士論文
[1]苜蓿盲蝽嗅覺相關基因的發(fā)掘及功能分析[D]. 谷少華.中國農業(yè)科學院 2010
本文編號:3163822
【文章來源】:中國農業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:83 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
英文縮略表
第一章 引言
1.1 昆蟲人工飼料的研究概況
1.2 昆蟲觸角感受氣味分子的機制
1.3 昆蟲氣味結合蛋白的研究進展
1.3.1 氣味結合蛋白的鑒定
1.3.2 氣味結合蛋白的結構和分布
1.3.3 氣味結合蛋白的功能研究
1.4 昆蟲化學感受蛋白的研究進展
1.4.1 化學感受蛋白的鑒定
1.4.2 化學感受蛋白的結構和分布
1.4.3 化學感受蛋白的功能研究
1.5 研究目的和意義
1.6 研究內容
第二章 桃蚜人工飼料的開發(fā)
2.1 實驗材料
2.1.1 供試昆蟲
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要儀器設備
2.2 試驗方法
2.2.1 飼料配方
2.2.2 飼蚜裝置
2.2.3 人工飼料和煙草飼養(yǎng)的桃蚜對EBF的行為學測定
2.2.4 人工飼料和煙草飼養(yǎng)的桃蚜對EBF的觸角EAG電生理反應測定
2.3 結果與分析
2.3.1 桃蚜人工飼料飼養(yǎng)效果評價
2.3.2 行為學測定結果
2.3.3 EAG電生理反應測定結果
2.4 討論
第三章 桃蚜OBPs和CSPs基因的鑒定及比較分析
3.1 實驗材料
3.1.1 供試昆蟲
3.1.2 主要試劑
3.1.3 主要儀器設備
3.2 實驗方法
3.2.1 桃蚜OBPs和CSPs基因在轉錄組中的鑒定
3.2.1.1 樣品的收集
3.2.1.2 總RNA提取
3.2.1.3 CDNA文庫的構建和測序
3.2.1.4 生物信息學分析
3.2.1.5 桃蚜OBPS和CSPS基因在轉錄組和基因組中的鑒定
3.2.1.6 桃蚜OBPS和CSPS基因的克隆驗證
3.2.2 序列和進化分析
3.2.3 桃蚜OBPs和CSPs基因在不同組織的表達分析
3.2.4 桃蚜OBPs和CSPs的基因結構分析
3.2.5 Motif分析
3.3 結果與分析
3.3.1 轉錄組測序及功能注釋
3.3.2 桃蚜OBPs和CSPs基因在轉錄組和基因組中的鑒定
3.3.3 序列和進化分析
3.3.4 桃蚜OBPs和CSPs基因在不同組織中的表達分析
3.3.5 桃蚜OBPs和CSPs的基因結構分析
3.3.6 Motif分析
3.4 討論
第四章 桃蚜氣味結合蛋白MperOBPs的克隆、表達及結合特性分析
4.1 實驗材料
4.1.1 供試昆蟲
4.1.2 主要試劑
4.1.3 主要儀器設備
4.2 實驗方法
4.2.1 cDNA模板的制備
4.2.2 目的基因的克隆和表達
4.2.3 蛋白純化
4.2.4 熒光競爭結合實驗
4.3 結果與分析
4.3.1 桃蚜氣味結合蛋白MperOBPs的克隆、表達和純化
4.3.2 桃蚜氣味結合蛋白MperOBPs結合特性分析
4.4 討論
第五章 全文結論
參考文獻
致謝
作者簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]中國蚜蟲類昆蟲物種多樣性與分布特點(半翅目,蚜總科)[J]. 劉征,黃曉磊,姜立云,喬格俠. 動物分類學報. 2009(02)
[2]蚜蟲寄主植物與取食部位的多樣性[J]. 方燕,喬格俠,張廣學. 動物分類學報. 2006(01)
[3]昆蟲觸角氣味結合蛋白的研究進展[J]. 王桂榮,郭予元,吳孔明. 昆蟲學報. 2002(01)
[4]麥長管蚜全純人工飼料的研究[J]. 陳巨蓮,倪漢祥,丁紅建,孫京瑞. 中國農業(yè)科學. 2000(03)
[5]以化學純飼料飼養(yǎng)北京的桃蚜[J]. 柯禮道,欽俊德. 昆蟲學報. 1983(01)
[6]昆蟲的人工飼料[J]. 忻介六. 昆蟲知識. 1976(02)
碩士論文
[1]苜蓿盲蝽嗅覺相關基因的發(fā)掘及功能分析[D]. 谷少華.中國農業(yè)科學院 2010
本文編號:3163822
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