本實驗室從人參內(nèi)生菌中分離得到一株甲基營養(yǎng)型芽孢桿菌NJ13（Bacillus methylotrophicus）,研究發(fā)現(xiàn)其發(fā)酵液在20%飽和度硫酸銨沉淀下的粗蛋白對于人參銹腐菌（Cylindrocarpon destructans）抑制作用顯著。經(jīng)Sephadex G-25脫鹽,分離出2個抗菌活性峰,選擇2F進行后續(xù)實驗。穩(wěn)定性研究發(fā)現(xiàn)抗菌粗蛋白2F對紫外穩(wěn)定,但用氯仿和蛋白酶K處理后活性完全損失。在pH 12條件下抗菌活性損失一半,100℃和121℃條件下完全損失抗菌活性。再經(jīng)DEAE-Sepharose Fast Flow弱陰離子交換層析,Superdex75 10/300 GL凝膠過濾層析,得到純度較高的抗菌蛋白2-1-1F,濃縮并稀釋后測得抗菌蛋白濃度為0.1026mg/mL,SDS-PAGE結果顯示在29KDa左右有單一條帶。經(jīng)質(zhì)譜鑒定,抗菌蛋白氨基酸序列與貝萊斯芽孢桿菌（Bacillus velezensis）UCMB5033鞭毛蛋白FlgG（登錄號:CDG29557.1）氨基酸序列覆蓋度達到了76%,等電點為4.97,分子量為27KDa,與凝膠中表觀分子量幾乎一致,初... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

粗蛋白經(jīng)SephadexG-25脫鹽結果

14圖 1.2 洗脫峰抗菌效果Fig.1.2 Antifungal effect of eluting peak性蛋白的穩(wěn)定性研究結果：2F峰進行穩(wěn)定性研究，結果表明，2F抗菌蛋全損失抗菌活性（圖 1.3）。2F 抗菌蛋白能耐下活性損失較大（圖 1.4）。不耐有機溶劑和紫外照射條件下穩(wěn)定（圖 1.5）。

圖 1.3 抗菌粗蛋白 2F 的溫度穩(wěn)定性Fig.1.3 Temperature stability of antifungal crude protein 2F圖 1.4 抗菌粗蛋白 2F 的酸堿穩(wěn)定性Fig.1.4 Acid-base stability of antifungal crude protein 2F


本文編號：2934591