桃樹(shù)連作障礙在國(guó)內(nèi)外普遍發(fā)生,是一個(gè)世界性難題,大量的研究表明生氰糖苷的降解與連作障礙有著緊密的聯(lián)系,土壤中的生氰糖苷會(huì)在微生物的作用下產(chǎn)生苯甲醛、氫氰酸等有害物質(zhì),影響桃樹(shù)的生長(zhǎng)。據(jù)報(bào)道扁桃苷是生氰糖苷在桃樹(shù)體內(nèi)的主要存在形式之一。本研究從華中農(nóng)業(yè)大學(xué)果樹(shù)試驗(yàn)基地十年生桃樹(shù)根際土壤中篩選出可以降解扁桃苷的微生物,對(duì)其進(jìn)行鑒定,并比較了降解菌的生長(zhǎng)和降解能力;隨后以萵苣種子為實(shí)驗(yàn)材料,檢測(cè)了扁桃苷降解產(chǎn)物的毒性;還測(cè)定了扁桃苷降解過(guò)程中CN~-濃度的變化,并對(duì)WHA-4的最適生長(zhǎng)和降解條件進(jìn)行了篩選;最后探究了WHA-4降解扁桃苷的產(chǎn)物對(duì)桃苗生長(zhǎng)的影響。主要結(jié)果如下:1.從桃樹(shù)根際土壤中分離得到五種扁桃苷降解菌,對(duì)其進(jìn)行外觀形態(tài)觀察并結(jié)合16Sr RNA基因測(cè)序比對(duì)結(jié)果,初步鑒定出五種扁桃苷降解菌WHA-1、WHA-2、WHA-3、WHA-4和WHA-5分別是嗜麥芽窄食單胞菌、枸櫞酸桿菌、銅綠假單胞菌、嗜煙堿節(jié)桿菌和根癌農(nóng)桿菌。2.WHA-4的生長(zhǎng)與降解能力最強(qiáng)。與對(duì)照相比,WHA-1的72 h降解產(chǎn)物處理的萵苣幼苗株高顯著降低;WHA-4的24 h降解產(chǎn)物處理的萵苣幼苗在鮮重、株高上均顯著降低,且其36 h降解產(chǎn)物處理的萵苣幼苗株高也顯著降低;WHA-5的24 h降解產(chǎn)物處理的萵苣種子在發(fā)芽指數(shù)、發(fā)芽速度指數(shù)及幼苗株高方面均顯著降低。3.在降解扁桃苷的過(guò)程中,WHA-4在24 h內(nèi)產(chǎn)生的CN~-最多,之后CN~-的濃度又逐漸下降,最后被完全消耗;當(dāng)向培養(yǎng)基中加入100 mg/L蛋白胨后,產(chǎn)生的CN~-濃度最大值減小,但后期CN~-的消耗速率加快。WHA-4在不同的外界條件下,其生長(zhǎng)和降解能力表現(xiàn)出很大的差異,結(jié)果表明,WHA-4在溫度為25℃,扁桃苷濃度為400 mg/L時(shí)生長(zhǎng)和降解能力最佳,WHA-4生長(zhǎng)的最適pH為5-5.5,降解扁桃苷的最適pH為5-6。向培養(yǎng)基中添加葡萄糖、葡萄糖+硫酸銨、蛋白胨或酵母均會(huì)對(duì)WHA-4的生長(zhǎng)及降解起促進(jìn)作用,而硫酸銨的加入?yún)s有抑制作用。4.WHA-4的24 h降解產(chǎn)物對(duì)桃樹(shù)幼苗的生長(zhǎng)表現(xiàn)出抑制作用,與對(duì)照相比,其株高、干徑、莖干重和根干重均顯著降低。
【學(xué)位單位】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類(lèi)】：S662.9;S154.3
【部分圖文】：

圖 1 五種扁桃苷降解菌的菌落形態(tài)及掃描電鏡圖 WHA-1，D-F 為 WHA-2，G-I 為 WHA-3，J-L 為 WHA-4 和 M-O 為 W為平板劃線、單個(gè)菌落形態(tài)和掃描電鏡圖olony morphology and scanning electron micrographin-degrading bacterial strainsny morphology of WHA-1(A-C), WHA-2 (D-F), WHA-3 (G-I), WHA-4 (J-Lt, middle and right panels were representative morphology of plate streaking, g electron micrographs

19圖 2 五種扁桃苷降解菌的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)注：系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)采用鄰接法構(gòu)建，采用最大簡(jiǎn)約法計(jì)算遺傳圖距Fig.2 Phylogenetic tree of five amygdalin-degrading bacterial strainse: The tree was constructed with the neighbor-joining method, and the genetic distancecomputed by the maximum parsimony options model

每組取 10ml 濾液處理萵苣種子，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)各處理組的種子萌發(fā)和幼苗的生長(zhǎng)情況出現(xiàn)了一些差異（圖6、圖 7），圖 6 可以看出在對(duì)照組中，無(wú)機(jī)鹽組的萵苣種子的發(fā)芽情況及萵苣幼苗的生長(zhǎng)情況整體均優(yōu)于蒸餾水處理組。圖 6 萵苣種子發(fā)芽及幼苗生長(zhǎng)情況注：A-D 為每處理組的種子發(fā)芽情況；E-H 為每處理組的幼苗生長(zhǎng)情況Fig.6 Seeds germination and seedlings growth of lettuceNote: Seeds germination of each treatment group（A-D）；seedings growth of each group（E-H）
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2839485