【摘要】：芽孢桿菌(Bacillus spp.)是一類(lèi)好氧或兼性厭氧,能產(chǎn)生抗逆性芽孢的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌,具有種類(lèi)多、遺傳穩(wěn)定性強(qiáng),耐高溫和抗逆性強(qiáng)等特性,是一類(lèi)重要的資源微生物,包含許多具有特殊功能的菌株,可用于防治植物病蟲(chóng)害、促生和溶解土壤中難溶的含磷化合物等作用,在工業(yè)、農(nóng)業(yè)和醫(yī)學(xué)等科學(xué)領(lǐng)域有著十分廣泛的應(yīng)用前景。本文從不同有機(jī)質(zhì)含量的東北農(nóng)田黑土中分離、純化芽孢桿菌,篩選具有生防和促生作用的芽孢桿菌,同時(shí)應(yīng)用16S rDNA基因鑒定其系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系和分類(lèi)學(xué)地位。研究結(jié)果如下:1.采用平板梯度稀釋法測(cè)定11個(gè)不同農(nóng)田黑土中的芽孢桿菌數(shù)量,經(jīng)1/2 NA培養(yǎng)基28℃培養(yǎng)后,芽孢桿菌數(shù)量在0.30×10~5-58.0×10~5 CFU/g之間,表明不同有機(jī)質(zhì)含量黑土中芽孢桿菌在數(shù)量上存在顯著差異。2.從不同農(nóng)田黑土中分離純化共獲得550株芽孢桿菌菌株,采用改良Salkowski比色法測(cè)定結(jié)果顯示,其中219株芽孢桿菌能產(chǎn)生不同濃度的IAA,占總數(shù)的39.8%,各菌株分泌IAA能力介于5-11μg·mL~(-1)之間。此外,對(duì)分泌IAA能力9μg·mL~(-1)的7株芽孢桿菌進(jìn)行16S rDNA基因鑒定結(jié)果表明:2株屬于賴(lài)氨酸芽孢桿菌屬(Lysinibacillus),5株屬于解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)。3.從550株芽孢桿菌中,采用平板對(duì)峙法,篩選出14株具有拮抗作用的菌株(占總數(shù)的3.0%),分別對(duì)立枯絲核菌(Rhizoctonia solani)、尖孢鐮刀菌(Fusarium oxysporum)和腐皮鐮孢菌(Fusarium solani)均有明顯抑制作用,對(duì)上述病原真菌的抑菌半徑分別在1.2-2.2 cm之間、1.5-2.8 cm之間和1.6-2.9 cm之間。16S rDNA基因鑒定結(jié)果表明:1株屬于巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)、5株屬于短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)、1株屬于枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、5株屬于解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)和2株屬于高地芽孢桿菌(Bacillus altitudinis)。4.從550株芽孢桿菌菌株中,采用溶磷圈法篩選得到10株具有解磷作用的菌株,其中菌株NH-4的解磷圈直徑(D)與菌落生長(zhǎng)直徑(d)的比值最大為1.6。鉬銻抗比色法測(cè)定供試菌株在磷礦粉培養(yǎng)液中溶磷量,結(jié)果顯示培養(yǎng)3 d解磷能力為12.05-22.18 mg·L~(-1),培養(yǎng)6 d解磷能力為7.15-20.83 mg·L~(-1),與對(duì)照相比解磷量均有顯著增加。經(jīng)16S rDNA基因鑒定,8株屬于巨大芽孢桿菌(Bacillus megaterium)、1株屬于蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)和1株屬于短小芽孢桿菌(Bacillus pumilus)。5.以ACC為唯一氮源法,從篩選得到的具有拮抗、分泌IAA、解磷作用的27株菌中獲得9株具有ACC脫氨酶活性菌株,其中菌株NH-7的ACC脫氨酶活性最高,為0.162 U/mg。本研究篩選得到的550株芽孢桿菌菌株,其中27株芽孢桿菌具有生防和促生能力。6株能產(chǎn)生IAA、解磷并具ACC脫氨酶活性、3株具有解磷作用和ACC脫氨酶活性、12株具產(chǎn)IAA和拮抗作用和1株具有IAA和解磷作用、2株只具有拮抗作用和3株芽孢桿菌只具有產(chǎn)生IAA的能力。
【學(xué)位授予單位】：牡丹江師范學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：S476.1
【圖文】：

技術(shù)路線(xiàn)圖

芽孢桿菌數(shù)量與土壤pH之間的關(guān)系

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2732098