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方竹林外生菌根真菌資源調(diào)查及其菌劑制備

發(fā)布時間:2020-06-07 11:50
【摘要】:外生菌根真菌是一種專性活體營養(yǎng)型真菌,與植物根系形成的共生體,能夠促進植物生長,提高養(yǎng)分的吸收,穩(wěn)定生態(tài)系統(tǒng)。本論文采集金佛山方竹和合江方竹天然林地大型真菌,并應用形態(tài)學和分子生物學方法鑒定外生菌根真菌的主要種類,對外生菌根真菌進行分離以及純化培養(yǎng),固體發(fā)酵法進行菌劑的制備。實驗結(jié)果如下:1、在貴州省正安縣新州鎮(zhèn)金佛山方竹天然林地和赤水縣大同鎮(zhèn)合江方竹天然林采集到34種大型真菌,確定外生菌根真菌8科10屬19種,含粉褶菌科(Entolomataceae)2種,馬勃菌科(Lycoperdaceae)2種,蠟傘科(Hygrophoraceae)4種,紅菇科(Russulaceae)7種,乳牛肝菌科(Suillaceae)1種,雞油菌科(Cantharellaceae)1種,白蘑科(Tricholomataceae)1種,鵝膏科(Amanitaceae)1種。2、對19種外生菌根真菌,對rDNA的ITS區(qū)段序列擴增,測序后進行系統(tǒng)發(fā)育分析,確定其中5種外生菌根真菌形態(tài)與分子鑒定一致,分別為黃方孢粉褶菌Entoloma murrayi、橙黃乳菇Lactarius aurantiacus、紅菇Russula lepida、乳牛肝菌Suillus bovinus、紅汁乳菇Lactarius hatsudake。3、對外生菌根真菌子實體進行分離與純化,獲得紅菇(Russula lepida)和橙黃乳菇(Lactarius aurantiacus)純菌絲體菌株。4、研究了不同固體培養(yǎng)基對紅菇菌絲體生長的影響,篩選出適宜培養(yǎng)基配方為:木屑45%,棉籽殼45%,麥麩8%,1%蔗糖,1%石膏;制備了可用于生產(chǎn)的接種用菌劑。
【圖文】:

外生菌根真菌,凝膠電泳,DNA提取,紅汁乳菇


圖 3.1 外生菌根真菌 DNA 提取凝膠電泳結(jié)果1.黃方孢粉褶菌;2.橙黃乳菇;3.紅菇;4 乳牛肝菌;5.紅汁乳菇Fig3.1 Ectomycorrhizal fungi DNAextraction gel electrophoresis results:1.Entoloma murrayi; 2.Lactarius aurantiacus; 3.Russula rosea; 4.Suillus bovinus;5.Lac序結(jié)果種真菌 ITS 區(qū)段的 DNA 序列測序結(jié)果如下:CGAAGGGTATCTACTGATTTGAGGTCAATAAGTCAAGTGTCTTTGCAATTAGAAGCAAAGACAATGTTATCTGGTTCCAATAGTATAGATTATACCATTGATAATCAGTAATGACTCTGCTAATATTTTTGAAGAGATGTTTTAAAACTTAGCAACTCTCAATTATCCAGTCTTTATAAATTTAAAAATCATAAAGATTGAAAATTTCATGACACTCAAACAGGCATAGAATACCAAGAAGTGCAAGGTGCGTTCAAAGATTCGATGATTCACTGCAATTCACATTACTTATCGCATTTCGCTGCGTTCTTCATCGAT

序列,外生菌根真菌,系統(tǒng)發(fā)育樹,分類群


貴州大學 2018 屆碩士研究生學位論文ACTTTTGTGTCAAAAAGTCAGCGACAGCCCTCACACGCCTCACACACGTTGTACGATAATGATCCTTCCGCAGGTTCACCTACGGAAG3.2.3 系統(tǒng)發(fā)育分析將測序所得的序列運用 GenBank 的序列局部相似性查詢系統(tǒng),在 GenBank數(shù)據(jù)庫下載與所測 DNA 序列相似的序列,通過所用的序列建立系統(tǒng)發(fā)育樹分析,可以明顯的看出分為 4 個聚類群,,其中 79,M10 在分類群 Lactarius,M2 在分類群 Russula,M3 在分類群 Suillus,6 在分類群 Entoloma。并且這 5 種外生菌根真菌的分子鑒定與形態(tài)鑒定一致,分別為 6-黃方孢粉褶菌 Entoloma murrayi、79-橙黃乳菇 Lactarius aurantiacus、M2-紅菇 Russula lepida、M3-乳牛肝菌 Suillusbovinus、M10-紅汁乳菇 Lactarius hatsudake(見圖 3.2)。
【學位授予單位】:貴州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2018
【分類號】:S714.3

【參考文獻】

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本文編號:2701375

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