【摘要】：根結線蟲(Meloidogyne spp.)是危害植物最嚴重的廣寄主植物寄生線蟲,由于是土傳病害,一旦發(fā)生很難根除�；瘜W防治有效,但對環(huán)境和人畜的危害已不能滿足可持續(xù)發(fā)展的需要,物理防治、農業(yè)措施和抗性育種雖能在一定程度上遏制根結線蟲病的發(fā)生但也有其局限性,生物防治是當前最有潛力的防治手段,是綠色農業(yè)維持可持續(xù)發(fā)展的重要手段之一。本研究選用4個品系的昆蟲病原線蟲(Entomopathogenic nematodes,EPN)共生菌和7株土壤細菌,通過溫室盆栽試驗和室內生測研究,明確其對根結線蟲病的防治效果,探討生防細菌懸液和代謝產物對南方根結線蟲(M.incognita)和北方根結線蟲(M.hapla)卵孵化和二齡幼蟲活性的影響,試圖篩選高效菌株并初步闡述其作用機制,為其產業(yè)化和推廣應用提供依據(jù)。采用溫室盆栽試驗的方法,南方根結線蟲在中蔬4號番茄上接種劑量為1000和2000個卵/株時,昆蟲病原線蟲Sf-IGA共生細菌10倍稀釋液對M.incognita防效最高,分別為70.9%和69.4%。在接種劑量為5000個卵/株時,4株昆蟲病原線蟲共生細菌防效≤60%;北方根結線蟲在中蔬4號番茄上接種量為2000個卵/株時,Sf-IGA、Hb-NJ和Hb-IGA共生細菌10倍稀釋液的防效與藥劑對照阿維菌素(Awei)差異不顯著,其中Hb-IGA共生細菌的防效最高,為74.5%;M.incognita在中蔬4號番茄上接種劑量為1000和2000個卵/株時,土壤細菌B09 10倍稀釋液防效分別74.9%和61.8%,土壤細菌B01c的防效分別為69.2%和59.1%,與阿維菌素藥劑對照差異不顯著;M.hapla在中蔬4號和VFNT兩個品種番茄上接種劑量為2000個卵/株時,7株土壤細菌10倍稀釋液對2個品種上的M.hapla均有較好的防效,為55.1%~76.6%,與阿維菌素差異不顯著。通過室內生測,EPN共生菌懸液能顯著影響南方根結線蟲卵孵化。6 d時Hb-NJ共生菌10倍稀釋液對M.incognita卵孵化的抑制作用最強,相對抑制率為70.6%,而對M.hapla卵孵化沒有明顯的抑制作用。4株EPN共生菌懸液20倍和50倍稀釋液對南方和北方根結線蟲卵孵化均沒有明顯影響。4株EPN共生菌懸液10倍、20倍和50倍稀釋液對南方和北方根結線蟲二齡幼蟲活性的影響不大。室內生測結果顯示,EPN共生菌代謝物對根結線蟲的卵孵化有明顯的抑制作用。在7 d時,EPN共生菌代謝物2倍稀釋液和5倍稀釋液對南方根結線蟲的卵孵化相對抑制率在70%以上(除Hb-NJ共生菌5倍稀釋液外)。在5 d時,EPN共生菌代謝物2倍稀釋液和5倍稀釋液對北方根結線蟲的卵孵化相對抑制率在70%以上。同時對根結線蟲二齡幼蟲活性影響不大。通過16S rDNA序列的擴增測序結果,構建系統(tǒng)發(fā)育樹,初步鑒定昆蟲病原線蟲共生菌中高效菌株Sf-IGA屬于致病桿菌屬,Hb-IGA屬于發(fā)光桿菌屬,7個土壤細菌均屬于芽孢桿菌屬。
【圖文】：

圖 1.1 根結線蟲的生活史（引自馮志新 等，2001）Figure 1.1 Life cycle of Melonidogyne spp. (Zhixin Feng, 2001)根結線蟲繁殖一代的時間一般需要 4～6 周，但隨溫度影響而有很大變化，例如線蟲在 27.5～30℃從侵染到產卵在需要 17 d，在 15.4℃時需要 57 d（Tyler1933）。我國南方緯度低，年平均溫度在 26℃左右，更易于根結線蟲病害的發(fā)生，

圖 5.1 生防細菌 16S rDNA 序列 PCR 擴增產物Fig 5.1 Electrophoresis patterns of PCR amplified biocontrol bacteria對 EPN 共生菌和土壤細菌 16SrDNA 序列進行擴增后，得到 1500bp 左右的明亮單一的目標片段，如圖 5.1 所示，，如圖 5.2 所示，圖 5.2 的進化樹是基于線粒體基因 16S rDNA 的數(shù)據(jù)矩陣以最大簡約法構建的。進化樹以致病桿菌屬 X.bov 作為外群，通過系統(tǒng)發(fā)育關系樹可以看出發(fā)光桿菌屬 Photorhabdus 的 4 個種 P.lum、P.sp.、Hb-IGA 和 Hb-NJ 在一個進化枝中，形成一個單系群，這些種基于線粒體基因的系統(tǒng)演化關系比較明確，與傳統(tǒng)的形態(tài)學分類相吻合。致病桿菌屬 Xenorhabdusnematophila 的 7 個種在同一進化枝中，形成一個單系群，這個屬的分子學分類與傳統(tǒng)的形態(tài)學分類表現(xiàn)為一致性。發(fā)光桿菌屬與致病桿菌屬之間為明顯的單系性，表明昆蟲病原線蟲
【學位授予單位】：中國科學院大學(中國科學院東北地理與農業(yè)生態(tài)研究所)
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：S432.45;S476

【參考文獻】

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本文編號：2624307