【摘要】：原生質(zhì)體法介導(dǎo)真菌遺傳轉(zhuǎn)化體系是實(shí)現(xiàn)大規(guī)模隨機(jī)、定點(diǎn)突變和菌種改良的方法之一,為研究真菌致病性和侵染機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。原生質(zhì)體法構(gòu)建轉(zhuǎn)化體系的步驟包括原生質(zhì)體的制備、轉(zhuǎn)化與再生,其中關(guān)鍵是原生質(zhì)體的制備,通常采用酶解法破除細(xì)胞壁獲得原生質(zhì)體,其獲得率直接影響轉(zhuǎn)化效率。轉(zhuǎn)化通常借助于聚乙二醇(PEG)介導(dǎo)、電擊或限制性內(nèi)切酶法完成,其中PEG介導(dǎo)的原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化法較傳統(tǒng),技術(shù)較成熟;電擊法操作較簡(jiǎn)單;限制性內(nèi)切酶(REMI)介導(dǎo)的整合轉(zhuǎn)化,因其轉(zhuǎn)化效率較高,可產(chǎn)生大量穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化子,正被越來(lái)越多地應(yīng)用于絲狀真菌的遺傳轉(zhuǎn)化。
[Abstract]:Protoplast mediated fungal genetic transformation system is one of the methods to realize large-scale random, site-directed mutation and strain improvement, which lays a foundation for the study of fungal pathogenicity and infection mechanism. The steps of constructing the transformation system by protoplast method include the preparation, transformation and regeneration of protoplasts, the key of which is the preparation of protoplasts. The transformation is usually done by means of polyethylene glycol (PEG) mediated by electric shock or restriction endonuclease method, in which PEG mediated protoplast transformation is more mature than the traditional one, the electroporation method is simpler to operate, and the restriction endonuclease (REMI) mediated integration transformation. Because of its high conversion efficiency, it can produce a large number of stable transformants, and is being used more and more in the genetic transformation of filamentous fungi.
【作者單位】： 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病蟲(chóng)害生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31571965) 北京市自然科學(xué)基金(6162022) 北京市科技新星(Z131105000413057) 北京市自然科學(xué)基金北京市科學(xué)技術(shù)研究院聯(lián)合資助項(xiàng)目(L140012) 小麥產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-03)
【分類號(hào)】：S432.44

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本文編號(hào)：2287920