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鹽漬化對(duì)甜瓜生長(zhǎng)的影響及甜瓜耐鹽相關(guān)基因CmRAV1的初步研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-16 10:56

  本文選題:甜瓜 + 鹽脅迫 ; 參考:《上海交通大學(xué)》2015年碩士論文


【摘要】:甜瓜(Cucumis melo L.)屬于葫蘆科植物,是我國(guó)重要的經(jīng)濟(jì)栽培作物。土壤鹽漬化會(huì)嚴(yán)重影響甜瓜的生長(zhǎng)發(fā)育,降低產(chǎn)量及品質(zhì)。本文以課題組前期篩選的兩個(gè)甜瓜品種(‘冰雪脆’為耐鹽;‘玉露’為鹽敏感)為材料,研究鹽漬化對(duì)甜瓜生長(zhǎng)的影響,并運(yùn)用分子生物學(xué)手段開展甜瓜CmRAV1基因的初步研究。主要結(jié)果如下:本論文首先是在實(shí)驗(yàn)室前期甜瓜耐鹽種質(zhì)資源篩選的基礎(chǔ)上,利用耐鹽品種‘冰雪脆’和鹽敏感品種‘玉露’,同時(shí)利用生物炭對(duì)鹽漬化土壤進(jìn)行改良,研究生物炭處理對(duì)土壤和甜瓜生長(zhǎng)的影響。結(jié)果表明,生物炭處理明顯降低了土壤中可溶性鹽分含量以及土壤呼吸作用;同時(shí)提高了有機(jī)質(zhì)含量及植株的凈光合速率,但是對(duì)甜瓜生物量及果實(shí)品質(zhì)沒(méi)有顯著差異。300mM NaCl處理后,兩個(gè)甜瓜品種植株地上部和地下部鮮重均有所下降。但是,品種‘冰雪脆’鮮重?zé)o論是地上部還是地下部,均高于品種‘玉露’。隨著鹽處理時(shí)間的延長(zhǎng),兩品種葉綠素含量呈現(xiàn)下降趨勢(shì),直至24h后,相比于對(duì)照差異顯著。鹽處理對(duì)甜瓜根莖葉中離子含量的影響表現(xiàn)為:Na+在莖中的積累量最大,葉片次之,根中最少。同時(shí)K+含量在鹽處理后根中顯著降低,莖中變化不明顯,葉片中顯著增加。CmRAV1基因是從實(shí)驗(yàn)室前期的研究(鹽脅迫下兩個(gè)甜瓜品種耐鹽轉(zhuǎn)錄組測(cè)序結(jié)果及鹽脅迫下構(gòu)建的cDNA文庫(kù))中篩選出來(lái)的,屬于AP2/ERF基因家族的RAV亞家族。序列分析表明,CmRAV1包含1個(gè)AP2結(jié)構(gòu)域和1個(gè)B3結(jié)構(gòu)域,全長(zhǎng)1182bp,編碼321個(gè)氨基酸。序列比對(duì)發(fā)現(xiàn),CmRAV1與黃瓜中一個(gè)RAV同源性最高。CmRAV1基因受鹽脅迫誘導(dǎo)表達(dá),同時(shí)該基因在甜瓜根部及花中的表達(dá)量相對(duì)較高。將CmRAV1的ORF序列連接至植物表達(dá)載體PHB-YFP中,通過(guò)注射煙草表皮細(xì)胞研究該基因在細(xì)胞中的定位情況。結(jié)果顯示該基因主要在細(xì)胞核中表達(dá)。實(shí)驗(yàn)通過(guò)酵母表達(dá)載體pYeDP60,將CmRAV1轉(zhuǎn)化到酵母菌株G19中。結(jié)果表明,CmRAV1可以提高酵母細(xì)胞的耐鹽性。
[Abstract]:Cucumis melo L. Belongs to Cucurbitaceae plants, is an important economic cultivation crops in China. Soil salinization will seriously affect the growth and development of melon and reduce yield and quality. In this paper, the effects of salinization on the growth of muskmelon (CmRAV1 gene) were studied by means of molecular biology. The main results are as follows: firstly, on the basis of the screening of salt-tolerant germplasm resources of muskmelon in the early stage of laboratory, the salt-tolerant varieties "ice and snow brittle" and salt-sensitive variety 'Yulu' were used to improve the salinized soil at the same time. The effects of biochar treatment on soil and melon growth were studied. The results showed that the content of soluble salt in soil and soil respiration were significantly decreased, and the content of organic matter and the net photosynthetic rate of plants were also increased by biochar treatment. However, there was no significant difference in biomass and fruit quality of muskmelon. However, the fresh weight of the variety was higher than that of the variety Yulu. With the prolongation of salt treatment time, the chlorophyll content of the two varieties decreased, and after 24 hours, there was a significant difference compared with the control. The effect of salt treatment on ion content in rhizome leaves of muskmelon showed that the accumulation of Na in stems was the largest, followed by leaves and roots. At the same time, the K content decreased significantly in the roots after salt treatment, but the change in the stem was not obvious. The significant increase of CmRAV1 gene in leaves was isolated from the pre-laboratory studies (sequence analysis of salt tolerant transcriptome and cDNA library constructed under salt stress), which belongs to the RAV subfamily of AP2 / ERF gene family. Sequence analysis showed that CmRAV1 contained an AP2 domain and a B3 domain, with a total length of 1182 BP, encoding 321 amino acids. Sequence alignment showed that CmRAV1 had the highest homology with a single RAV in cucumber. CmRAV1 gene was induced to express under salt stress, and the expression of CmRAV1 gene was relatively high in the roots and flowers of muskmelon. The ORF sequence of CmRAV1 was ligated into the plant expression vector PHB-YFP, and the localization of the gene was studied by injecting tobacco epidermal cells. The results showed that the gene was mainly expressed in the nucleus. CmRAV1 was transformed into yeast strain G19 by yeast expression vector pYeDP60. The results showed that CmRAV1 could improve the salt tolerance of yeast cells.
【學(xué)位授予單位】:上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號(hào)】:S652;S156.41

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本文編號(hào):2026421

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