本文選題：南方根結線蟲 + Mi-eft　； 參考：《熱帶作物學報》2016年06期

【摘要】：以南方根結線蟲延長因子2基因(Mi-eft2)T克隆質粒為模板,克隆該基因的3個部分片段(各200 bp),作為體外合成ds RNA的模版,利用該ds RNA(F1ds,F2ds,F3ds)干擾南方根結線蟲2齡幼蟲(J2)的Mi-eft2表達。結果顯示,利用real-time PCR作為檢測方法,干擾處理后的J2線蟲Mi-eft2的表達量(F1、F2、F3),與對照處理的J2線蟲Mi-eft2的表達量(F0)相比,分別降低了21%、69%、0.02%。將經過干擾處理的J2線蟲和作為對照處理的J2線蟲(500頭/株)分別接種5株番茄,培養(yǎng)45 d后觀察表型。發(fā)現(xiàn)干擾處理后J2線蟲與對照處理的J2線蟲接種番茄后產生的根結數(shù)相比較,分別減少了57.09%、68.94%、7.01%。說明Mi-eft2表達的沉默效應會使南方根結線蟲對番茄造成的危害程度相應降低,也說明了利用RNAi干擾該基因表達的方法有利于對南方根結線蟲病害防治方法的探索。
[Abstract]:Using Mi-eft2T clone plasmid of the prolongation factor 2 gene of Rhizodendron solandii as template, three partial fragments of this gene (200bp each, used as template for synthesis of DS RNA in vitro) were used to interfere with the expression of Mi-eft2 of 2nd instar nematode larvae of Rhizodd-knot nematode. The results showed that the expression of Mi-eft2 in J2 nematode treated by interference was significantly lower than that in the control group (F0), and the expression of Mi-eft2 in J2 nematode treated with interference was decreased by 210.69% and 0.02%, respectively, compared with that of the control treated J2 nematode, the results showed that the expression of Mi-eft2 in J2 nematode treated by interference was significantly lower than that in control group. Five tomato strains were inoculated with interference treated J2 nematode and 500 J2 nematode per plant as control, and the phenotypes were observed after 45 days of culture. It was found that the number of root knots produced by J2 nematodes after inoculation with tomato decreased by 57.0968.94and 7.01, respectively. It indicated that the silencing effect of Mi-eft2 expression would reduce the damage caused by the southern root knot nematode to tomato, and that the method of interfering the gene expression with RNAi was beneficial to the exploration of the control methods of the disease of the southern root knot nematode.
【作者單位】： 中國熱帶農業(yè)科學院熱帶生物技術研究所農業(yè)部熱帶作物生物學與遺傳資源利用重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金項目資助“沉默延長因子2基因在黃燈籠辣椒根結線蟲防治中的作用研究”(No.31101210) 海南省自然科學基金項目“RNAi沉默Mi-eft2基因對南方根結線蟲病害防治的研究”(No.313081) 公益性行業(yè)(農業(yè))科研專項經費項目資助“南繁區(qū)生物安全監(jiān)測預警及控制”(No.201403075)
【分類號】：S432.45

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本文編號：2024565