本文選題：十字花科黑腐病菌 + 趨化性�。� 參考：《廣西大學》2015年碩士論文

【摘要】：十字花科黑腐病菌(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)是引起十字花科植物發(fā)生黑腐病的病原菌,該菌同時也是研究微生物與寄主植物相互作用分子機理的重要模式菌,研究該菌的致病機理對于減少農(nóng)業(yè)經(jīng)濟損失具有重大的意義。目前,細菌的趨化性在病原學方面的意義已經(jīng)被公認。寄主體內(nèi)含有各種化學物質(zhì),因此病原菌的趨利避害顯得尤為重要。根據(jù)Xcc8004基因組的注釋,XC_2307, XC_0286, XC_1074, XC_2313, XC 2504、XC 2304、XC 2316、XC 2320、XC 0336、XC 2306、XC 2136、 XC 1801、XC 1937、XC 2315、XC 2314、XC 0843、XC 1412、XC 1414、 XC_2308、XC_1413、XC_2223、XC_2309、XC+2311、XC_0638這24個基因的編碼產(chǎn)物是趨化蛋白。為了評估這24個基因的功能,本研究利用pKl8mobSacB對這些基因分別進行突變,構(gòu)建了24個基因的缺失突變體,并對這些突變體進行表型分析。植株試驗發(fā)現(xiàn),與野生型菌株相比較,突變體DM2311基本喪失致病性,DM2223、DM2304、DM1937這三個突變體的致病性降低了大約30%,它們的互補菌能恢復野生型的致病力水平。表明XC_2311、XC_2223、XC_2304、XC 1937與病原菌的致病性相關(guān)。對突變體的生長分析發(fā)現(xiàn),DM2311、DM2223、DM2304以及DM1937這四個突變體在MMX培養(yǎng)基的生長緩慢,它們的互補菌的生長與野生型基本一致,表明XC_2311、XC_2223、XC_2304以及XC_1937與菌體繁殖相關(guān)；運動性檢測發(fā)現(xiàn),DM2311、DM2223、DM2304以及DM1937在含0.3%以及0.6%瓊脂糖游動板的游動性降低,它們的互補菌的游動性與野生型基本一致,表明XC_2311、XC_2223、XC_2304以及XC 1937與菌株的游動性相關(guān)；運用毛細管法檢測了Xcc8004對30種化學物質(zhì)(麥芽糖、葡萄糖、果糖、木糖、乳糖、蔗糖、核糖、阿拉伯糖、甘露醇、酪氨酸、精氨酸、丙氨酸、亮氨酸、絲氨酸、賴氨酸、色氨酸、蘇氨酸、組氨酸、纈氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、天冬氨酸、半胱氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、異亮氨酸、氯化鎂、氯化鈣、氯化銨、檸檬酸)的趨化性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)野生型菌株對18種物質(zhì)(蔗糖、麥芽糖、乳糖、核糖、果糖、半乳糖、木糖、葡萄糖、半胱氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺、絲氨酸、異亮氨酸、精氨酸、亮氨酸、氯化鈣、氯化鎂)具有比較明顯的趨化性,為了分析這24個基因如何影響菌株的趨化性,我們分析了這些突變體對這18種物質(zhì)的趨化性。趨化性檢測發(fā)現(xiàn),Xcc8004主要對一些參與細胞生命活動的糖類、氨基酸、以及無機鹽離子具有明顯的趨化性。這些突變體的HR、生物膜、重金屬抗逆性、胞外酶、EPS產(chǎn)量與野生型菌株相比并沒有明顯的差異。
[Abstract]:Xanthomonas campestris pv. Campestris Xcc. is the pathogen causing black rot in cruciferous plants. It is also an important model bacterium for studying the molecular mechanism of interaction between microorganisms and host plants. It is of great significance to study the pathogenic mechanism of this bacterium to reduce the agricultural economic loss. At present, the chemotaxis of bacteria in the etiological significance has been recognized. The host contains all kinds of chemical substances, so it is very important for pathogenic bacteria to take advantage and avoid harm. XC2307, XC0286, XC1074, XC2313, XC2504 XC23304, XC23304 XC2320, XC2306XC2136, XC1801XC1937XC2315XC23141412XC1414, XC2308131313, XC23309XC2311XC0638, the encodings of the 24 genes are chemotaxis proteins. In order to evaluate the function of these 24 genes, we used pKl8mob SacB to mutate these genes, and constructed the deletion mutants of 24 genes, and analyzed the phenotypes of these mutants. Plant experiments showed that the pathogenicity of the mutant DM2311 was reduced by about 30% compared with that of wild type strain DM2311. The pathogenicity of the three mutants, DM2223, DM2304 and DM1937, was reduced by about 30 percent, and their complementary bacteria could restore the pathogenicity of wild type. The results showed that the pathogenicity of the pathogenic bacteria was related to XC2311XC22323 XC1937, which was related to the pathogenicity of the pathogenic bacteria. The growth analysis of the mutant showed that the four mutants DM2311, DM2223, DM2304 and DM1937 grew slowly in MMX medium, and the growth of their complementary bacteria was basically the same as that of wild type, which indicated that XC2311, XC2223 XC2304 and XC1937 were related to cell propagation. The results of exercise test showed that DM2311, DM2223, DM2304 and DM1937 decreased the mobility of DM2304 and DM1937 in 0.3% and 0.6% agarose swimming plates, and the swimming properties of their complementary bacteria were basically the same as that of wild type, which indicated that XC2311 XC2223 XCV2304 and XC 1937 were related to the swimming characteristics of the strain. A capillary method was used to detect 30 chemicals (maltose, glucose, fructose, xylose, lactose, sucrose, ribose, arabinose, mannitol, tyrosine, arginine, alanine, leucine, serine, lysine) in Xcc8004. The chemotaxis of tryptophan, threonine, histidine, valine, glutamine, glutamate, aspartic acid, cysteine, proline, phenylalanine, isoleucine, magnesium chloride, calcium chloride, ammonium chloride, citric acid), The results showed that wild type strains were resistant to 18 substances (sucrose, maltose, lactose, ribose, fructose, galactose, xylose, glucose, cysteine, proline, phenylalanine, glutamine, serine, isoleucine, arginine), Leucine, calcium chloride and magnesium chloride have obvious chemotaxis. In order to analyze how the 24 genes affect the chemotaxis of the strains, we analyzed the chemotaxis of these mutants to these 18 substances. Chemotaxis test showed that Xcc8004 has obvious chemotaxis to some carbohydrates, amino acids and inorganic salt ions which are involved in cell life. There was no significant difference in HRR, biofilm, heavy metal resistance and EPS production between these mutants and wild type strains.
【學位授予單位】：廣西大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S432.4

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本文編號：2009520