本文關(guān)鍵詞：美國白蛾hcapn3基因的克隆及HcAPN3蛋白與Cry1Ac結(jié)合特性分析

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【摘要】：通過比對分析已知昆蟲氨肽酶N(aminopeptidase N,APN)氨基酸序列并結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室的美國白蛾(Hyphantria cunea)中腸iTRAQ結(jié)果,設(shè)計(jì)了hcapn3基因特異引物,獲得hcapn3基因片段。通過RACE-PCR技術(shù)獲得美國白蛾中腸氨肽酶N基因(hcapn3)全長序列(GenBank登錄號(hào)為KJ013598)。Blastp分析表明,獲得的氨肽酶屬于氨肽酶N3家族,命名為HcAPN3。序列分析顯示HcAPN3包括952個(gè)氨基酸殘基,具有典型的谷氨酸鋅化氨肽酶(Gluzincin)結(jié)構(gòu)域和羧基端(ERAP1_C)結(jié)構(gòu)域。利用Bac to Bac表達(dá)系統(tǒng)在昆蟲細(xì)胞中表達(dá)108kDa的HcAPN3蛋白。在原核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)58kDa的Gluzincin結(jié)構(gòu)域和49kDa ERAP1_C的結(jié)構(gòu)域蛋白。Ligand Blot分析結(jié)果顯示,HcAPN3蛋白及Gluzincin結(jié)構(gòu)域可與Cry1Ac蛋白特異性結(jié)合,但ERAP1_C結(jié)構(gòu)域未能與Cry1Ac結(jié)合。本研究首次克隆了美國白蛾氨肽酶基因并分析了HcAPN3與Cry1Ac的結(jié)合特性,為下一步功能研究提供基礎(chǔ)。
【作者單位】： 河北農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院河北省農(nóng)作物病蟲害生物防治工程技術(shù)中心;北京農(nóng)學(xué)院植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 美國白蛾 氨肽酶N HcAPN Gluzincin結(jié)構(gòu)域 Ligand Blot分析
【基金】：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系(CARS-14) 國家自然科學(xué)基金(34711775) 北京農(nóng)學(xué)院促進(jìn)人才培養(yǎng)綜合改革專項(xiàng)計(jì)劃(BNRC&CC201404)
【分類號(hào)】：S433.4
【正文快照】： 美國白蛾[Hyphantria cunea(Drury)]是一種重要的世界性檢疫害蟲。適應(yīng)性強(qiáng),食性廣,繁殖能力強(qiáng)的特點(diǎn)為其大范圍傳播和為害提供了條件。該蟲現(xiàn)已從北美傳播至18個(gè)歐亞國家和地區(qū)[1]。1979年傳入我國以來,已迅速擴(kuò)展至長江以南地區(qū),每年給我國農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)造成巨大的損失[1-2]。

【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1039182