本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用RNAi技術(shù)培育抗TMV病毒轉(zhuǎn)基因煙草，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

利用煙草花葉病毒(TMV)外殼蛋白基因構(gòu)建RNAi干涉載體,通過葉盤法轉(zhuǎn)化至煙草K326和龍江911兩個(gè)栽培品種。對轉(zhuǎn)基因株系的熒光定量PCR分析表明,不同轉(zhuǎn)基因株系的病毒RNA靶序列都得到一定程度的降解,抗病性鑒定結(jié)果證實(shí),轉(zhuǎn)基因K326和龍江911兩個(gè)栽培品種的轉(zhuǎn)基因材料分別有83%和90%轉(zhuǎn)基因株系對TMV呈現(xiàn)免疫級抗性。

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遺付HE E IA B i g 2 0 R DT S( e i ) 0 7年 8月， 98: 0 8 0 2 j n 2 () 1 1—1 2

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研究報(bào)告

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應(yīng)用 R A技術(shù)培育抗 T N i MV病毒轉(zhuǎn)基因煙草 顏培強(qiáng)，白先權(quán)，萬秀清，郭兆奎李麗杰，,公海英，成才儲(chǔ) 1黑龍江省煙草科學(xué)研究所，牡丹江 1 7 1; . 501 2 .中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所，北京 10 0 0 11

摘要：利用煙草花葉病毒( MV)￣ T#殼蛋白基因構(gòu)建 R - NAi干涉載體，通過葉盤法轉(zhuǎn)化至煙草 K3 6和龍江 9 l 2 l 兩個(gè)栽培品種。對轉(zhuǎn)基因株系的熒光定量 P CR分析表明，不同轉(zhuǎn)基因株系的病毒 R NA靶序列都得到一定程度 的降解，抗病性鑒定結(jié)果證實(shí)，轉(zhuǎn)基因 K3 6和龍江 9 1兩個(gè)栽培品種的轉(zhuǎn)基因材料分別有 8%和 9 2 l 3 0%轉(zhuǎn)基因株系對 T MV呈現(xiàn)免疫級抗性。

關(guān)鍵詞： NA;轉(zhuǎn)基因煙草； MV R i T

Ex e s o f TM V o t pr t i e e RNAi i r n g n c t ba c pr s i n o c a o en g n n t a s e i o c o pl n sc n e m un t o t ba c o a c v r n e to a t o f r i m iy t o c o m s i i usi f c i n Y e— in AN P i a g,BA a— u n,WAN Xi— n Q I Xin Q a u Qig,GUO Z a— i h oKu I L— e ,L i i, J GONG iYi g, Ha— n CHU e g. i Ch n Ca 1 H i n j n o a c e e rhIsi t, d nin 5 0, hn; . el g i gT b c oR sa c t ue Mu a j g 1 7 1 C i o a n t a 1 a

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煙草普通花葉病是我國煙區(qū)的主要病害。每年發(fā)病面積約 2 75萬畝，，減少產(chǎn)量 4 3 .9 7. 5 4 2萬擔(dān)， 2造

危害【。近年來，用 R Ai術(shù)創(chuàng)制抗病毒轉(zhuǎn)基因 J J利 N技植株取得了很好的效果【3 Waeh ue等【對馬鈴 0】 ., tro s 薯 Y病毒(VY蛋白酶基因片段構(gòu)建 I S載體進(jìn)行 P ) R煙草轉(zhuǎn)化，獲得抗性植株。Wa g等[以大麥黃矮病 n 5 毒 ( Y V P V)多聚酶基因反向重復(fù)序列載體 B D -A的

成經(jīng)

濟(jì)損失 2 4 7億元人民幣。生產(chǎn)上尚無有效的 .5 3防治藥劑，且主栽品種抗病性差、抗源狹窄，存在大面積爆發(fā)流行的潛在危險(xiǎn)。將病毒外殼蛋白和復(fù)制酶基因?qū)藷煵菘稍谝欢ǔ潭壬显鰪?qiáng)對 T MV病毒的抗性，其抗性主要在病毒侵染初期，可以推遲但發(fā)病，難以持久、有效地控制煙草普通花葉病的但 收稿日期： 0 6 1— 1 2 0— 2 3:修回日期： 0 7 0— 5 2 0— 2 0

(p YD o)化大麥，得對 B V免疫級抗性 h B Vp 1轉(zhuǎn)獲 YD的轉(zhuǎn)基因植株。朱俊華等[馬鈴薯 Y病毒外殼蛋 6 將白基因部分序列反向重復(fù)轉(zhuǎn)化人煙草，獲得對 P VY

基金項(xiàng)目：家煙草專賣局科技項(xiàng)目(號： 12 0 0 0 8[u p r db h eerhPoe to Sa o ac國編 10 0 4 10 ) p ot yteR sac r cs f tt b coMo o oy miit t n S e j eT np lAd ns a o ri ( 1 O O 4 O 8】 No.l 2 O Ol O )

作者簡介：培強(qiáng) (9 7 ),山東人，碩士，中級農(nóng)藝師，研究方向：分子生物育種。T l0 5—5 0 1; - i k lo@1 3 o顏 17一，男 e:4 36 8 2 3 E ma: hd g 6 . m l c

通訊作者：￣

L 16一，男，山東人，博士，高級農(nóng)藝師，研究方向：基因工程。 T l05 .5 0 0; - i g oh o u@yh ocm.' s 94 ) ( e: 4 36 8 2 5 E ma: u z ak i a o . c l o//

  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用RNAi技術(shù)培育抗TMV病毒轉(zhuǎn)基因煙草，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。