MiR-141通過其靶基因ZEB1、SIP1調(diào)控EMT途徑在結(jié)直腸癌細(xì)胞系中的研究
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【摘要】:目的通過比較miR-141、靶基因、上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)標(biāo)志物在不同結(jié)直腸癌細(xì)胞系中的差異性表達(dá)及相關(guān)性;進(jìn)一步揭示MicroRNA-141通過EMT途徑調(diào)控結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移的機(jī)制。方法選取具有間質(zhì)特征的細(xì)胞系SW620和RKO。構(gòu)建含miR-141的重組LV3-p GLV-h1-GFP-puro慢病毒Lenti-miR-141,用空載慢病毒NC-Lenti作為對(duì)照;穩(wěn)定轉(zhuǎn)染及后續(xù)實(shí)驗(yàn):通過qRT-PCR和Western Blot檢測(cè)證實(shí)miR-141的成功轉(zhuǎn)染,并比較miR-141、靶基因、EMT標(biāo)志物在不同結(jié)直腸癌細(xì)胞系中的差異性表達(dá)。結(jié)果 miR-141的重組LV3-p GLV-h1-GFP-puro慢病毒Lenti-miR-141、NC-Lenti對(duì)細(xì)胞系SW620和RKO的最佳感染MOI值均為100;PCR檢測(cè)證實(shí)LentimiR-141病毒的感染使SW620、RKO細(xì)胞中miR-141的表達(dá)明顯增加;免疫組化檢測(cè)證實(shí)miR-141的過表達(dá)有效的抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表達(dá),同時(shí)增加了E-cadherin的表達(dá)并減少了vimentin的表達(dá)。結(jié)論 SW620和RKO具有間質(zhì)特征;miR-141的過表達(dá)有效地抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表達(dá),進(jìn)而影響了EMT途徑標(biāo)志物E-cadherin和vimentin的表達(dá);進(jìn)一步驗(yàn)證了MicroRNA-141通過EMT途徑調(diào)控結(jié)直腸癌肝轉(zhuǎn)移。
【作者單位】: 首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京友誼醫(yī)院普外科國(guó)家消化系統(tǒng)疾病臨床醫(yī)學(xué)研究中心;
【關(guān)鍵詞】: 結(jié)直腸癌 MiR- EMT 靶基因
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81541050,81172317) 北京市自然科學(xué)基金(7154191) 北京市優(yōu)秀人才培養(yǎng)資助(2014000021469G266) 腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移機(jī)制研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放研究課題(2015ZLQX01) 北京友誼醫(yī)院科研啟動(dòng)基金資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】:R735.34
【正文快照】: 抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表達(dá),同時(shí)增加了E-cadherin的表達(dá)并減少了vimentin的表達(dá)。結(jié)論SW620和RKO具有間質(zhì)特征;miR-141的過表達(dá)有效地抑制了靶基因ZEB1和SIP1的表達(dá),進(jìn)而影響了EMT途徑標(biāo)志物E-cadher-in和vimentin的表達(dá);進(jìn)一步驗(yàn)證了MicroRNA-141通過EMT途徑調(diào)控結(jié)直腸癌
【相似文獻(xiàn)】
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1 董超;劉迪;馮業(yè)童;劉朋飛;吳璇;吳昊昱;周余來;;結(jié)直腸癌細(xì)胞外泌體的制備及其促單核細(xì)胞增殖作用[J];吉林大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2013年03期
2 張義平;鄭美蓉;殷嫦嫦;吳萍;周許峰;吳建芳;周小鷗;;熱休克誘導(dǎo)結(jié)直腸癌細(xì)胞外泌體的免疫效應(yīng)[J];腫瘤防治研究;2011年07期
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4 耿焱;姜泊;王偉;馬強(qiáng);;四分子交聯(lián)體5表達(dá)上調(diào)對(duì)結(jié)直腸癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力的促進(jìn)作用觀察[J];解放軍醫(yī)學(xué)雜志;2010年06期
5 楊曉東;邢春根;吳永友;趙奎;龔巍;陳博;何騰飛;;結(jié)直腸癌細(xì)胞輻射敏感性的定量比較蛋白組學(xué)研究[J];原子能科學(xué)技術(shù);2010年09期
6 張繼民,劉明姬,n澗托,
本文編號(hào):584496
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