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馬尾松水通道蛋白PmPIP1基因克隆及在干旱脅迫下的表達(dá)分析

發(fā)布時(shí)間:2017-07-07 11:14

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【摘要】:克隆馬尾松Pinus massoniana水通道蛋白(AQP),并對(duì)其生物信息學(xué)與干旱脅迫表達(dá)模式進(jìn)行分析。采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)以及互補(bǔ)脫氧核糖核酸(c DNA)末端快速擴(kuò)增(RACE)方法克隆馬尾松水通道蛋白基因。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(q RT-PCR)分析其在干旱脅迫下的響應(yīng)模式。結(jié)果克隆到一個(gè)馬尾松水通道蛋白基因,命名為Pm PIP1(Gen Bank登錄號(hào)為KF582038)。此基因c DNA全長(zhǎng)序列為1 301 bp,包括867 bp的完整開放閱讀框,99 bp的5′末端非翻譯區(qū)和335 bp的3′末端非翻譯區(qū)。編碼288個(gè)氨基酸殘基,分子量為30.86 k D,等電點(diǎn)(p I)8.48。Pm PIP1與菠菜Spinacia oleracea(2b5f A)水通道蛋白結(jié)構(gòu)相似。Pm PIP1含有6個(gè)跨膜區(qū),具有膜內(nèi)在蛋白(MIP)家族信號(hào)序列、高等植物高度保守序列HINPAVTFG和2個(gè)天門冬酰胺-脯氨酸-丙氨酸(NPA)保守肽段。Pm PIP1基因?qū)儋|(zhì)膜內(nèi)在蛋白(PIPs)亞族,與挪威云杉Picea abies水通道蛋白基因親緣關(guān)系最近,同源性達(dá)95%。q RT-PCR表明Pm PIP1受干旱脅迫誘導(dǎo)表達(dá)。馬尾松Pm PIP1的克隆豐富了植物AQP基因的資料庫(kù),同時(shí)推測(cè)Pm PIP1基因可能參與了馬尾松干旱脅迫過程。
【作者單位】: 貴州省森林資源與環(huán)境研究中心;貴州大學(xué)林學(xué)院;貴州大學(xué)貴州省農(nóng)業(yè)生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】植物學(xué) 馬尾松 水通道蛋白 克隆 表達(dá)
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31260183) “十二五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2015BAD09B0102) 國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃(“863”計(jì)劃)項(xiàng)目(2011AA10020301) 貴州省重大專項(xiàng)(黔科合重大專項(xiàng)字[2012]6001號(hào)) 貴州省人才基地建設(shè)項(xiàng)目(黔人領(lǐng)發(fā)[2009]9號(hào))
【分類號(hào)】:S791.248
【正文快照】: 水通道蛋白(AQP)是指細(xì)胞膜上能選擇性地高效轉(zhuǎn)運(yùn)水分子的膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白[1]。自1993年Maurel等[2]從擬南芥Arabidopsis thaliana中分離到第1個(gè)植物水孔蛋白γ-TIP以來,已在細(xì)菌、古生菌、真菌、動(dòng)物和植物等幾乎所有生物中發(fā)現(xiàn)AQP[3-5]。在植物中,擬南芥[6]和水稻Oryza sativa[7-

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):529969

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