本文關(guān)鍵詞：miR-27b及其靶基因PPARγ在肌內(nèi)和皮下脂肪細(xì)胞中的差異表達(dá)分析

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【摘要】：[目的]探討過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)在肌內(nèi)和皮下脂肪細(xì)胞中的差異表達(dá)及其與脂質(zhì)差異沉積的關(guān)系,并從miRNAs角度闡述PPARγ基因差異表達(dá)的機(jī)制。[方法]用油紅O染色法檢測肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞與皮下前體脂肪細(xì)胞的分化聚脂能力;采用qRT-PCR與Western blot檢測PPARγ在肌內(nèi)脂肪細(xì)胞和皮下脂肪細(xì)胞中的表達(dá)水平;通過生物信息學(xué)預(yù)測靶向PPARγ的miRNAs,利用qRT-PCR檢測候選miRNAs在肌內(nèi)脂肪細(xì)胞和皮下脂肪細(xì)胞中的表達(dá)水平;用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)鑒定候選miRNAs與PPARγ的靶向性。[結(jié)果]肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞的分化聚脂能力顯著高于皮下前體脂肪細(xì)胞(P0.05);PPARγ的mRNA和蛋白在肌內(nèi)脂肪細(xì)胞中的表達(dá)水平顯著高于其在皮下脂肪細(xì)胞中的表達(dá)量(P0.05);生物信息學(xué)預(yù)測得知miR-130a、miR-130b、miR-128、miR-301、miR-27a和miR-27b可以靶向PPARγ,其中miR-27a與miR-27b在肌內(nèi)脂肪細(xì)胞中的表達(dá)量顯著低于其在皮下脂肪細(xì)胞中的表達(dá)量(P0.05);熒光素酶活性分析表明,miR-27b可以顯著抑制PPARγ的熒光活性。[結(jié)論]在體外,與皮下前體脂肪細(xì)胞相比,肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞具有更強(qiáng)的分化能力。miR-27b在兩種脂肪細(xì)胞中的差異表達(dá)可導(dǎo)致靶基因PPARγ的差異表達(dá),進(jìn)而引起肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞與皮下前體脂肪細(xì)胞分化能力的差異。
【作者單位】： 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;南通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】： 皮下脂肪 肌內(nèi)脂肪 過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ) miR-b
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31272423)
【分類號(hào)】：S852.2
【正文快照】： 肌內(nèi)脂肪(intramuscular fat,IMF)含量可影響肌肉的肉色、嫩度和多汁性,是肉質(zhì)指標(biāo)中的關(guān)鍵參數(shù)[1-2]。在國內(nèi)外瘦肉型豬的選育過程中,在提高瘦肉率的同時(shí)也降低了IMF含量,現(xiàn)在瘦肉型豬中IMF含量約為1.5%左右,明顯低于IMF的最適范圍2%~3%,從而影響了豬肉的品質(zhì)。所以,提高IMF

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本文編號(hào)：529135