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miR-27b及其靶基因PPARγ在肌內(nèi)和皮下脂肪細胞中的差異表達分析

發(fā)布時間:2017-07-07 07:03

  本文關(guān)鍵詞:miR-27b及其靶基因PPARγ在肌內(nèi)和皮下脂肪細胞中的差異表達分析


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【摘要】:[目的]探討過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferator activated receptorγ,PPARγ)在肌內(nèi)和皮下脂肪細胞中的差異表達及其與脂質(zhì)差異沉積的關(guān)系,并從miRNAs角度闡述PPARγ基因差異表達的機制。[方法]用油紅O染色法檢測肌內(nèi)前體脂肪細胞與皮下前體脂肪細胞的分化聚脂能力;采用qRT-PCR與Western blot檢測PPARγ在肌內(nèi)脂肪細胞和皮下脂肪細胞中的表達水平;通過生物信息學預測靶向PPARγ的miRNAs,利用qRT-PCR檢測候選miRNAs在肌內(nèi)脂肪細胞和皮下脂肪細胞中的表達水平;用雙熒光素酶報告系統(tǒng)鑒定候選miRNAs與PPARγ的靶向性。[結(jié)果]肌內(nèi)前體脂肪細胞的分化聚脂能力顯著高于皮下前體脂肪細胞(P0.05);PPARγ的mRNA和蛋白在肌內(nèi)脂肪細胞中的表達水平顯著高于其在皮下脂肪細胞中的表達量(P0.05);生物信息學預測得知miR-130a、miR-130b、miR-128、miR-301、miR-27a和miR-27b可以靶向PPARγ,其中miR-27a與miR-27b在肌內(nèi)脂肪細胞中的表達量顯著低于其在皮下脂肪細胞中的表達量(P0.05);熒光素酶活性分析表明,miR-27b可以顯著抑制PPARγ的熒光活性。[結(jié)論]在體外,與皮下前體脂肪細胞相比,肌內(nèi)前體脂肪細胞具有更強的分化能力。miR-27b在兩種脂肪細胞中的差異表達可導致靶基因PPARγ的差異表達,進而引起肌內(nèi)前體脂肪細胞與皮下前體脂肪細胞分化能力的差異。
【作者單位】: 南京農(nóng)業(yè)大學動物科技學院;南通大學公共衛(wèi)生學院;
【關(guān)鍵詞】皮下脂肪 肌內(nèi)脂肪 過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ) miR-b
【基金】:國家自然科學基金項目(31272423)
【分類號】:S852.2
【正文快照】: 肌內(nèi)脂肪(intramuscular fat,IMF)含量可影響肌肉的肉色、嫩度和多汁性,是肉質(zhì)指標中的關(guān)鍵參數(shù)[1-2]。在國內(nèi)外瘦肉型豬的選育過程中,在提高瘦肉率的同時也降低了IMF含量,現(xiàn)在瘦肉型豬中IMF含量約為1.5%左右,明顯低于IMF的最適范圍2%~3%,從而影響了豬肉的品質(zhì)。所以,提高IMF

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