本文關鍵詞：苯達莫司汀在中國人群中藥代動力學、藥效學研究及SLC22A1、CYP1A2、GSTA1基因單核酸多態(tài)性與其血藥濃度相關性分析

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【摘要】：目的:研究苯達莫司汀在中國人群(B細胞惰性淋巴瘤患者)中藥代動力學、藥效學特性,并分析與苯達莫司汀轉運、代謝相關基因SLC22A1、CYP1A2、GSTA1的SNP對其血藥濃度的影響。方法:1采用超高效液相串聯(lián)質譜(UPLC-MS/MS)建立測定苯達莫司汀血藥濃度方法,并進行方法學驗證,包括考察方法的專一性、準確度、精密度、基質效應、回收率、樣品穩(wěn)定性、稀釋效應。2按入選、排除標準,篩選14位在天津醫(yī)科大學腫瘤醫(yī)院接受治療的B細胞惰性淋巴瘤患者進行藥代動力學研究。受試者按照120 mg/m2/d,第1天和第2天給藥,以21天為一個周期。靜脈滴注時長120分鐘。用藥第一天于靜脈滴注前(0 h)和滴注開始后1 h、2 h,滴注完成后5 min、10 min、20 min、30 min、45 min、1 h、1.5 h、2 h、2.5 h、3 h、4 h、6 h、8 h從靜脈采血4.0 ml。靜脈血以肝素鈉抗凝后,在3000 r/min,4℃條件下離心4 min,血漿置于-80℃冰箱中冷凍保存待測。UPLC-MS/MS法測定苯達莫司汀血藥濃度,應用DAS2.0軟件計算藥代動力學參數。3按入選、排除標準,篩選21位受試者進行Ⅱ期研究(其中5位受試者用藥一周期后,停止用藥,退出臨床試驗),用藥6周期后采用RECIST標準評價苯達莫司汀藥效。同時,將給藥方案調整為靜脈滴注4 h;在給藥結束時、第二次給藥前采集血樣,測定苯達莫司汀血藥濃度。4使用QIAamp血液DNA提取試劑盒提取DNA,采用PCR-直接測序法檢測SLC22A1(rs200684404,rs4646277,rs2282143,rs628031,rs35167514,rs622342)、CYP1A2(rs762551,rs2069514,rs2470890,rs2472304,rs12720461)、GSTA1(rs3957356,rs3957357)的多態(tài)性。采用SPSS19.0軟件統(tǒng)計分析SNP與苯達莫司汀血藥濃度之間的關系。結果:1建立了UPLC-MS/MS法測定苯達莫司汀血藥濃度。其專一性、準確度、精密度、基質效應、回收率、樣品穩(wěn)定性、稀釋效應均符合藥代動力學研究要求。血漿苯達莫司汀濃度在5~1000 ng·m L-1范圍內線性關系良好(r2=0.9981),定量下限為5 ng·m L-1,日內和日間精密度(RSD)均小于12.17%,準確度為91.39%~99.60%;提取回收率和基質效應分別為102.70%~104.77%和84.82%~91.77%。2單次靜脈滴注鹽酸苯達莫司汀120 mg/m2/d,滴注時長120min;主要藥代動力學參數:Cmax為4822.571±3477.123 ng·m L-1;CL為25.75±15.198 L/h/m2;t1/2為0.388±0.157 h;AUC(0-∞)為6463.691±3859.084ug/L*h。3Ⅱ期16例受試者進行療效評價結果:鹽酸苯達莫司汀以120 mg/m2/d,第一天、第二天給藥,以21天為一個周期,滴注時長為4 h,療效CR為12.5%、PR為50.0%、SD為18.8%、PD為18.8%。4 SNP分型結果發(fā)現(xiàn)只有SLC22A1(rs683369、rs2282143、rs628031、rs622342),CYP1A2(rs762551、rs2069514、rs2472304、rs2470890)存在多態(tài)性。我們并未發(fā)現(xiàn)SNP與苯達莫司汀血藥濃度存在相關性。結論:1已建立的檢測苯達莫司汀血藥濃度UPLC-MS/MS方法滿足臨床藥代動力學要求。2苯達莫司汀藥代動力學研究結果表明其在體內快速消除,t1/2為0.388±0.157 h。3在中國人群中試驗表明,苯達莫司汀治療B細胞惰性淋巴瘤有較好療效。4我們并未發(fā)現(xiàn)SNP與苯達莫司汀血藥濃度之間存在相關性,可能原因是樣本量太少造成的。
【關鍵詞】：苯達莫司汀 藥代動力學 藥效學 CYP1A2 GSTA1 SLC22A1 單核酸基因多態(tài)性
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R969.1
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-11
• 縮略語/符號說明11-13
• 前言13-18
• 研究現(xiàn)狀、成果13-17
• 研究目的、方法17-18
• 一、UPLC-MS/MS法測定苯達莫司汀血藥濃度及藥代動力學研究18-33
• 1.1 材料和方法18
• 1.1.1 藥品和試劑18
• 1.1.2 儀器18
• 1.2 血漿中苯達莫司汀測定的方法建立18-20
• 1.2.1 液相條件18-19
• 1.2.2 質譜條件19
• 1.2.3 工作溶液配制19-20
• 1.2.4 含藥樣品的配制20
• 1.2.5 樣品處理20
• 1.3 血漿中苯達莫司汀測定的方法學驗證20-26
• 1.3.1 方法的專屬性20-21
• 1.3.2 標準曲線制備21-22
• 1.3.3 最低定量濃度（LLOQ）22
• 1.3.4 準確度和精密度22-23
• 1.3.5 基質效應和回收率考察23-24
• 1.3.6 穩(wěn)定性考察24-25
• 1.3.7 稀釋效應25-26
• 1.4 苯達莫司汀藥代動力學研究26-29
• 1.4.1 藥物26
• 1.4.2 試驗方案26
• 1.4.3 受試者血漿中苯達莫司汀濃度測定26-29
• 1.4.4 苯達莫司汀藥代動力學研究29
• 1.5 苯達莫司汀Ⅱ期受試者血藥濃度測定29-30
• 1.5.1 受試者血漿樣品采集29
• 1.5.2 Ⅱ期受試者苯達莫司汀血漿藥物濃度測定29-30
• 1.6 討論30-31
• 1.6.1 樣品處理30-31
• 1.6.2 內標篩選31
• 1.6.3 藥代動力學分析31
• 1.7 小結31-33
• 二、苯達莫司汀藥效學研究33-39
• 2.1 材料和方法33-36
• 2.1.1 受試者33-35
• 2.1.2 研究方法35-36
• 2.2 討論36-38
• 2.3 小結38-39
• 三、轉運、代謝相關基因SNP對苯達莫司汀血藥濃度影響研究39-51
• 3.1 材料和方法39-43
• 3.1.1 藥品和試劑39
• 3.1.2 DNA提取39-40
• 3.1.3 SLC22A1、CYP1A2, GSTA1相應的SNP分型40-43
• 3.2 結果43-49
• 3.2.1 SLC22A1、CYP1A2, GSTA1相應的SNP分型結果43-47
• 3.2.2 SLC22A1、CYP1A2相應的SNP對對苯達莫司汀的血藥濃度的影響47-49
• 3.3 討論49-50
• 3.4 小結50-51
• 結論51-52
• 參考文獻52-59
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明59-60
• 附錄60-61
• 綜述 苯達莫司汀藥代動力學、代謝相關基因的單核酸多態(tài)性研究進展61-71
• 綜述參考文獻66-71
• 致謝71-72
• 個人簡歷72

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本文編號：527297