密碼子優(yōu)化的納豆激酶基因在番茄果實(shí)中的瞬時表達(dá)
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【摘要】:根據(jù)植物偏愛密碼子設(shè)計(jì)并人工合成了納豆激酶基因sNK,在其中插入番茄內(nèi)含子構(gòu)成sNKi基因.將這兩種基因通過農(nóng)桿菌滲透法在不同成熟時期的番茄果實(shí)中實(shí)現(xiàn)了瞬時表達(dá).通過實(shí)時熒光定量PCR法(RT-qPCR)比較兩種基因在番茄果實(shí)中轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)量,通過纖維蛋白平板法檢測兩種基因表達(dá)產(chǎn)物的纖溶酶活性.結(jié)果表明,兩種基因在番茄果實(shí)的轉(zhuǎn)色期、成熟期和完熟期均有表達(dá),其中成熟期表達(dá)量最高,破色期基本無表達(dá).果實(shí)特異性E8啟動子調(diào)控下的納豆激酶基因的表達(dá)量較組成型35S啟動子調(diào)控下的該基因表達(dá)量明顯提高.插入內(nèi)含子的sNKi基因的表達(dá)量高于沒有內(nèi)含子的sNK基因,表明內(nèi)含子在提高納豆激酶的表達(dá)量方面具有顯著的作用.
【作者單位】: 內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院內(nèi)蒙古自治區(qū)牧草與特色作物生物技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;呼和浩特職業(yè)學(xué)院生物化學(xué)工程學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 納豆激酶 密碼子優(yōu)化 番茄 瞬時表達(dá) 農(nóng)桿菌滲透法
【基金】:內(nèi)蒙古自治區(qū)高等學(xué)校創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃(No.NMGIRT1401)
【分類號】:Q943.2
【正文快照】: 血栓性疾病嚴(yán)重威脅著人類的健康與生命,是現(xiàn)今僅次于癌癥的第二大病癥[1].采用纖維蛋白溶解酶或其激活劑進(jìn)行的溶栓療法被認(rèn)為是治療血栓病最有效的方法.溶栓藥物可激活纖溶系統(tǒng),使血栓中交聯(lián)成網(wǎng)的纖維蛋白溶解.目前常用的及一些還在研制開發(fā)的溶栓藥物如鏈激酶(SK)、尿激酶
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