本文關(guān)鍵詞：棉花EPSPS基因一個(gè)可變剪接體的克隆及功能分析，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：可變剪接是生物體基因在轉(zhuǎn)錄過程中存在的普遍現(xiàn)象,該現(xiàn)象是導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能多樣性的重要原因之一,但是在棉花中關(guān)于功能基因可變剪接事件的報(bào)到相對(duì)較少。本文在克隆棉花EPSPS(5-enolpyruvylshikimate 3-phosphate synthase)基因的過程中,發(fā)現(xiàn)了該基因的一條可變剪接序列。運(yùn)用生物信息學(xué)的方法研究發(fā)現(xiàn),該序列比正常的EPSPS基因的c DNA序列少152 bp,這造成了終止密碼子在該序列的提前出現(xiàn);正常的EPSPS基因內(nèi)含子的剪切都遵循常見的"GT-AG"剪切規(guī)律,而該可變剪接序列最后一個(gè)內(nèi)含子的剪切是按照"AT-AC"規(guī)則進(jìn)行;該可變剪接序列預(yù)測(cè)的三維結(jié)構(gòu)模型同正常的EPSPS基因的三維結(jié)構(gòu)存在顯著差異。將該可變剪接序列插入到原核表達(dá)載體p ET32a,隨后將構(gòu)建好的原核表達(dá)重組載體轉(zhuǎn)化入大腸桿菌菌株BL21(DE3)Δaro A,通過在M9基本培養(yǎng)基中的生長(zhǎng)研究發(fā)現(xiàn)該可變剪接序列不具備正常EPSPS基因所具有的功能。本研究結(jié)果豐富了棉花EPSPS基因轉(zhuǎn)錄本存在的形式,為深入研究棉花EPSPS基因的轉(zhuǎn)錄機(jī)制打下了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所/農(nóng)業(yè)部長(zhǎng)江下游棉花和油菜重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;國(guó)家棉花工程技術(shù)研究中心;江蘇沿江地區(qū)農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所;
【關(guān)鍵詞】： 可變剪接 棉花 EPSPS基因 原核表達(dá)
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31301682) 江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新基金(CX(14)5009) 國(guó)家轉(zhuǎn)基因重大專項(xiàng)(2013ZX08005) 國(guó)家科技支撐計(jì)劃課題(2014BAD11B02)
【分類號(hào)】：S562
【正文快照】： 選擇性剪接又稱為可變剪接(Alternativesplicing),是指一個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物在不同的生長(zhǎng)發(fā)育階段、特異的組織器官和外界環(huán)境影響下,通過不同的剪接方式,可以得到不同的m R-NA和蛋白質(zhì)產(chǎn)物,這種現(xiàn)象是導(dǎo)致蛋白質(zhì)功能多樣性的重要原因之一[1]�？勺兗艚宇l率的認(rèn)識(shí)隨著研究技術(shù)的

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  本文關(guān)鍵詞：棉花EPSPS基因一個(gè)可變剪接體的克隆及功能分析，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：507936